一种光皮桦木质部原生质体制备及瞬时转化的方法

    公开(公告)号:CN106167787A

    公开(公告)日:2016-11-30

    申请号:CN201610713001.X

    申请日:2016-08-23

    Abstract: 本发明提供一种光皮桦木质部原生质体制备及瞬时转化的方法,其包括如下步骤:1)选择生长状况良好的光皮桦一年生植株,取当年生的茎段,用流水冲洗5‑20min,剥去树皮;2)将步骤1)获得的光皮桦茎段木质部用酶解液在黑暗中进行酶解;3)将酶解后茎段转移到MMG溶液中,将原生质体分散到MMG溶液中,用孔径为70μm的细胞筛进行过滤,收集滤液,滤液离心,用MMG溶液把收集到的原生质体重新悬浮,得到纯化的原生质体;4)在质粒浓度为1500ng/μl,PEG处理时间为10min时,木质部原生质体瞬时转化效率最高。本发明方法得到的原生质体平均密度为4.5×106个·mL‑1,平均产量为1.2×106个·g‑1·FW‑1,活性最高可达到96%,最高瞬时转化效率平均可达55%左右。

    一种云锦杜鹃多倍体的培育方法

    公开(公告)号:CN108935087B

    公开(公告)日:2020-04-28

    申请号:CN201811057689.6

    申请日:2018-09-11

    Abstract: 本发明提供了一种云锦杜鹃多倍体的培育方法,涉及植物生物技术领域,包括如下步骤:云锦杜鹃种子灭菌后,以氨磺乐灵进行处理;种子萌发后移栽至育苗块进行培养,然后通过气孔法和流式细胞仪法检测染色体倍性变化,检测确认的染色体加倍植株移栽至温室培养,即可获得多倍体植株。采用本方法进行云锦杜鹃的多倍体的培育,诱导率高(可达30%),变异植株成活率高(85%以上),鉴定方法简便,可同时获得大量多倍体材料,大大提高了育种效率。

    一种云锦杜鹃多倍体的培育方法

    公开(公告)号:CN108935087A

    公开(公告)日:2018-12-07

    申请号:CN201811057689.6

    申请日:2018-09-11

    Abstract: 本发明提供了一种云锦杜鹃多倍体的培育方法,涉及植物生物技术领域,包括如下步骤:云锦杜鹃种子灭菌后,以氨磺乐灵进行处理;种子萌发后移栽至育苗块进行培养,然后通过气孔法和流式细胞仪法检测染色体倍性变化,检测确认的染色体加倍植株移栽至温室培养,即可获得多倍体植株。采用本方法进行云锦杜鹃的多倍体的培育,诱导率高(可达30%),变异植株成活率高(85%以上),鉴定方法简便,可同时获得大量多倍体材料,大大提高了育种效率。

    一种光皮桦组培苗生根基质及其生根移栽的方法

    公开(公告)号:CN104365485A

    公开(公告)日:2015-02-25

    申请号:CN201410731267.8

    申请日:2014-12-05

    Abstract: 一种光皮桦组培苗生根基质及其生根移栽的方法,属于植物无性繁殖技术领域。其特征在于:所述基质为泥炭、珍珠岩和蛭石混合物,并用MS+蔗糖的液体培养基浸湿。其生根移栽主要包括基质的选取与配制、接种、培养、炼苗移栽等步骤。本发明的有益效果是:(1)选用一种基质代替传统的琼脂固体培养基,不影响光皮桦组培苗的正常生长,炼苗移栽成活率达到95%;(2)本方法操作简便,所采用的培养基及基质成本低廉,易于获取,降低了生产成本;(3)由无菌组织培养得到的光皮桦组培苗遗传性状稳定,为光皮桦的遗传改良提供基础。

    一种光皮桦木质部原生质体制备及瞬时转化的方法

    公开(公告)号:CN106167787B

    公开(公告)日:2020-01-14

    申请号:CN201610713001.X

    申请日:2016-08-23

    Abstract: 本发明提供一种光皮桦木质部原生质体制备及瞬时转化的方法,其包括如下步骤:1)选择生长状况良好的光皮桦一年生植株,取当年生的茎段,用流水冲洗5‑20min,剥去树皮;2)将步骤1)获得的光皮桦茎段木质部用酶解液在黑暗中进行酶解;3)将酶解后茎段转移到MMG溶液中,将原生质体分散到MMG溶液中,用孔径为70μm的细胞筛进行过滤,收集滤液,滤液离心,用MMG溶液把收集到的原生质体重新悬浮,得到纯化的原生质体;4)在质粒浓度为1500ng/μl,PEG处理时间为10min时,木质部原生质体瞬时转化效率最高。本发明方法得到的原生质体平均密度为4.5×106个·mL‑1,平均产量为1.2×106个·g‑1·FW‑1,活性最高可达到96%,最高瞬时转化效率平均可达55%左右。

    一种光皮桦组培苗生根基质及其生根移栽的方法

    公开(公告)号:CN104365485B

    公开(公告)日:2016-09-21

    申请号:CN201410731267.8

    申请日:2014-12-05

    Abstract: 一种光皮桦组培苗生根基质及其生根移栽的方法,属于植物无性繁殖技术领域。其特征在于:所述基质为泥炭、珍珠岩和蛭石混合物,并用MS+蔗糖的液体培养基浸湿。其生根移栽主要包括基质的选取与配制、接种、培养、炼苗移栽等步骤。本发明的有益效果是:(1)选用一种基质代替传统的琼脂固体培养基,不影响光皮桦组培苗的正常生长,炼苗移栽成活率达到95%;(2)本方法操作简便,所采用的培养基及基质成本低廉,易于获取,降低了生产成本;(3)由无菌组织培养得到的光皮桦组培苗遗传性状稳定,为光皮桦的遗传改良提供基础。

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