一种噬菌体ФX174裂解蛋白E及其应用

    公开(公告)号:CN108624545A

    公开(公告)日:2018-10-09

    申请号:CN201810392228.8

    申请日:2018-04-27

    Applicant: 江南大学

    Abstract: 本发明公开了一种噬菌体ФX174裂解蛋白E及其应用,属于遗传工程领域。本发明是以重组大肠杆菌E.coli(PAI/GroELS)作为出发菌株,通过引入噬菌体ФX174裂解蛋白E,在重组大肠杆菌细胞表面产生孔洞,再利用细胞内外渗透压差,从而将亚油酸异构酶从细胞中释放出来的方法。最后经过对释放条件优化,使细胞内81%的亚油酸异构酶被释放出重组大肠杆菌细胞。

    一种提高重组大肠杆菌中1,2,4-丁三醇产量的方法

    公开(公告)号:CN108410875A

    公开(公告)日:2018-08-17

    申请号:CN201810219618.5

    申请日:2018-03-16

    Applicant: 江南大学

    Abstract: 本发明公开了一种提高重组大肠杆菌中1,2,4-丁三醇产量的方法,属于遗传工程领域。本发明是以重组大肠杆菌E.coli W3110ΔyagEΔyjhHΔyiaEΔycdW(pEtac-mdlC-tac-xdh)(ATCC 27325)作为出发菌株,通过构建含有木糖异构酶XylA的反义RNA片段的重组表达载体,抑制木糖分支途径中木糖异构酶的表达水平,加强碳流流向代谢终产物,从而提高1,2,4-丁三醇产量的方法。最后质粒pEtac-mdlC-tac-xdh-lac-asRNA3,使重组大肠杆菌1,2,4-丁三醇产量提高了44%。

    产甘油假丝酵母热休克蛋白基因CgYDJ1及其应用

    公开(公告)号:CN107858362A

    公开(公告)日:2018-03-30

    申请号:CN201711314455.0

    申请日:2017-12-12

    Applicant: 江南大学

    Abstract: 本发明属于酵母基因工程领域,公开了一种源于产甘油假丝酵母Candida glycerinogenes CCTCC M93018的热休克蛋白基因CgYDJ1,在Saccharomyces cerevisiae中过表达该基因,可显著提高S.cerevisiae的热耐受性。其核苷酸序列为与如序列表SEQ ID NO.1中所示的DNA序列的相似性在75%以上,进一步优选在85%以上,更优选在95%以上且具有与如序列表SEQ ID NO.1中所示的DNA序列相同功能的DNA序列;最优选DNA序列如序列表SEQ ID NO.1所示。本发明在利用基因工程技术提高S.cerevisiae热耐受性上有重要作用。

    一种产衣康酸的重组酵母菌株及其构建方法与应用

    公开(公告)号:CN107058144A

    公开(公告)日:2017-08-18

    申请号:CN201710080169.6

    申请日:2017-02-15

    Applicant: 江南大学

    Abstract: 本发明公开了一种产衣康酸的重组酵母菌株及其构建方法与应用。所述重组酵母菌以C.glycerolgenesis为出发菌株,在C.glycerolgenesis基因组中插入顺乌头酸脱羧酶基因得到的重组酵母菌株。通过基因工程改造构建含顺乌头酸脱羧酶基因表达盒Pgap‑CadA‑Tgap‑zeocin的重组质粒,将其线性化后插入C.glycerolgenesis基因组中表达顺乌头酸脱羧酶催化顺乌头酸获得衣康酸。本发明提供的重组酵母菌株能够合成衣康酸,为衣康酸生产提供了新思路。

    一套高效铜抗性标记酿酒酵母表达系统及其应用

    公开(公告)号:CN103695456A

    公开(公告)日:2014-04-02

    申请号:CN201310722485.0

    申请日:2013-12-24

    Applicant: 江南大学

    Abstract: 本发明公开了一套高效铜抗性标记酿酒酵母表达系统及其应用,包括一种铜离子敏感型酿酒酵母W303-1A cup1Δ及含有CUP1铜抗性筛选标记的酵母表达载体,本发明通过基因敲除酿酒酵母铜抗性基因cup1,获得一株铜离子敏感型酿酒酵母W303-1A cup1Δ,其对Cu2+的最低抑制浓度(SC培养基上)由1.2mM降为0.08mM;以pYX212载体为基本构架,以铜离子敏感型酿酒酵母为宿主菌,构建了以CUP1作为铜抗性标记的pYX212M酿酒酵母高效表达系统,并成功表达了绿色荧光蛋白基因(gfp),可用于酿酒酵母高效表达外源蛋白,拓宽了酿酒酵母的使用领域。

    一种应用静息细胞转化1,3-丙二醇为3-羟基丙酸的方法

    公开(公告)号:CN103525727A

    公开(公告)日:2014-01-22

    申请号:CN201310468917.X

    申请日:2013-10-10

    Applicant: 江南大学

    Abstract: 本发明公开了一种应用静息细胞转化1,3-丙二醇为3-羟基丙酸的方法,属于生物工程领域。本发明首先利用快速筛选法筛选出一株具有高转化性能、高生产能力的微生物菌株,经鉴定为醋杆菌(Acetobacter sp.)JDB-71,并利用该菌静息细胞在水相体系中高效催化1,3-丙二醇为3-羟基丙酸,所得醋杆菌培养工艺简单、转化效率高、产物产量大、转化液成分简单利于产品分离纯化、转化过程可以人为地调节菌体浓度以缩短生产时间,节约大量的能源和生产成本。

    一种GAP基因启动子及其应用

    公开(公告)号:CN102952800A

    公开(公告)日:2013-03-06

    申请号:CN201210452244.4

    申请日:2012-11-12

    Applicant: 江南大学

    Abstract: 本发明公开了一种GAP启动子基因及其应用,属于微生物分子生物学领域。本发明提供的启动子序列如SEQ ID NO.1所示,来源于产甘油假丝酵母WL2002-5-59。该基因及其启动子的克隆扩大了微生物抗渗透压胁迫研究的基因资源,也为产甘油假丝酵母高产甘油的分子机理研究奠定了基础。含有本发明启动子序列的应用如表达载体可构建为筛选细胞转化的标志,用于评估基因克隆的效率。作为产甘油假丝酵母基因敲除的工具,进行菌种改良,产生更安全及更具产业利用性的产甘油假丝酵母种。

    一种乙酸作为碳源及胁迫作用促进角鲨烯生成的方法

    公开(公告)号:CN117625424A

    公开(公告)日:2024-03-01

    申请号:CN202311523536.7

    申请日:2023-11-15

    Applicant: 江南大学

    Abstract: 本发明公开了一种乙酸作为碳源及胁迫作用促进角鲨烯生成的方法,属于微生物技术领域。本发明选用产甘油假丝酵母CCTCC M93018仅利用乙酸作为碳源,不额外添加其他碳源,不使用乙酸盐,并利用乙酸胁迫作用,促进角鲨烯生成的方法。在发酵罐中通过恒速流加补料的方式控制发酵罐乙酸浓度为6g/L,无需额外控制发酵罐pH,可生成10.8g/L的角鲨烯,单位时间单位菌体角鲨烯产率为0.003g/L/OD/h,是出发菌株角鲨烯产量的540倍,是目前报道最高产率。本发明的制备方法具有操作方便、转化效率高、生产成本低、工业化应用前景广等特点。

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