-
公开(公告)号:CN108504686A
公开(公告)日:2018-09-07
申请号:CN201810263508.9
申请日:2018-03-28
Applicant: 扬州大学
IPC: C12N15/861 , C12N15/66 , C12N15/34 , C12N7/01 , C12R1/93
Abstract: 本发明提供了一种表达非洲猪瘟病毒EP153R基因重组腺病毒载体、构建方法及重组腺病毒制备方法,属于基因工程技术领域。该方法利用腺病毒穿梭载体 pKO-FH、pAD-EF1a-GFP,经一系列中间过程,得到重组腺病毒表达质粒pAD-EP153R。将最后得到的线性化重组腺病毒载体质粒转染 HEK293 细胞;根据腺病毒感染形成的细胞病变筛选重组病毒,最终实现腺病毒包装过程,并通过扩增、浓缩和鉴定得到能够直接感染真核细胞的重组腺病毒,从而实现了EP153R基因在真核细胞中正常表达的目的,为研究基于表达EP153R的腺病毒载体疫苗奠定基础。
-
公开(公告)号:CN108342414A
公开(公告)日:2018-07-31
申请号:CN201810263507.4
申请日:2018-03-28
Applicant: 扬州大学
IPC: C12N15/861 , C12N15/66 , C12N7/01
Abstract: 本发明提供了一种表达非洲猪瘟病毒B646L基因重组腺病毒载体、构建方法及重组腺病毒制备方法,属于基因工程技术领域。该方法利用腺病毒穿梭载体pKO-FH、pAD-EF1a-GFP,经一系列中间过程,得到重组腺病毒表达质粒pAD-B646L。将最后得到的线性化重组腺病毒载体质粒转染HEK293细胞;根据腺病毒感染形成的细胞病变筛选重组病毒,最终实现腺病毒包装过程,并通过扩增、浓缩和鉴定得到能够直接感染真核细胞的重组腺病毒,从而实现了B646L基因在真核细胞中正常表达的目的,为研究基于表达B646L的腺病毒载体疫苗奠定基础。
-
公开(公告)号:CN107475298A
公开(公告)日:2017-12-15
申请号:CN201710809678.8
申请日:2017-09-11
Applicant: 扬州大学
IPC: C12N15/867 , C12N15/66 , C12N15/12
CPC classification number: C12N15/86 , C07K14/195 , C12N15/66 , C12N2740/15043
Abstract: 本发明提供了cdtB基因过表达慢病毒载体及其构建方法和包含cdtB基因的慢病毒及其应用,属于基因工程技术领域。一种cdtB基因过表达慢病毒载体pLVX-AcGFP1-N1-cdtB,以pLVX-AcGFP1-N1慢病毒表达载体为基础,在多克隆位点处引入cdtB基因。本发明还提供了含有cdtB基因的慢病毒,利用构建得到的pLVX-AcGFP1-N1-cdtB载体与慢病毒包装体系VSVG、pCMV△R8.2混合,实现慢病毒包装过程,得到能够直接感染真核细胞的慢病毒,从而实现了cdtB基因在真核细胞中正常表达的目的,为进一步了解cdtB基因的功能打好基础。
-
公开(公告)号:CN104388575A
公开(公告)日:2015-03-04
申请号:CN201410758583.4
申请日:2014-12-10
Applicant: 扬州大学
CPC classification number: C12Q1/686 , C12Q1/689 , C12Q2537/143
Abstract: 本发明提供了一种多重PCR鉴别分枝杆菌病原核酸的试剂盒,包括引物组合物:5'-acggtgggtactaggtgtgggtttc-3'、5'-tctgcgattagcgactaagacttca-3';5'-gcgttgaccgagatggattat-3'、5'-gctcatctcacccagttggc-3';5'-ttccgaatcccttgtga-3'、5'-ggagagcgccgttgta-3'或5'-agtcgccgtggcttctctttta-3'。本发明该试剂盒灵敏度好,特异性高,操作简单,能实现致病性与非致病性分枝杆菌快速、大通量的检测。
-
公开(公告)号:CN118620039A
公开(公告)日:2024-09-10
申请号:CN202410793893.3
申请日:2024-06-19
Applicant: 扬州大学
Abstract: 本发明属于疫苗技术领域,涉及非洲猪瘟病毒重组蛋白及其制备方法和应用。本发明基于原核表达系统,将ASFV免疫保护相关抗原与分子佐剂Hsp70c串联表达后纯化,制作而成的重组蛋白。利用原核表达载体pET30a载体成功构建重组载体,并表达出M448R‑I73R、p37‑I177L、MGF110_4L‑MGF110_5L‑I125L、A151R‑CP129R‑E146L、E199L‑F317L的重组蛋白。本发明提供的重组蛋白可以诱导试验猪产生较强的体液和细胞免疫,并且制作工艺简单,适合大规模量产,可用于非洲猪瘟亚单位疫苗的制备。
-
公开(公告)号:CN113462654B
公开(公告)日:2023-07-14
申请号:CN202110937064.4
申请日:2021-08-16
Applicant: 扬州大学
IPC: C12N5/20 , C12N15/70 , C07K16/12 , C07K14/205 , G01N33/577 , G01N33/569 , C12R1/91
Abstract: 本发明提供了一种肝螺杆菌CdtB蛋白单克隆抗体及其分泌杂交瘤细胞株和应用,属于单克隆抗体技术领域。本发明针对肝螺杆菌CdtB蛋白检测空白的问题,用具有良好免疫原性的肝螺杆菌CdtB第19位至273位氨基酸区域经重组表达免疫动物,筛选得到分泌肝螺杆菌CdtB蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞株2D9,保藏编号为CCTCCNO:C2021140。杂交瘤细胞株2D9分泌的肝螺杆菌CdtB蛋白单克隆抗体可特异性结合肝螺杆菌CdtB蛋白,具具有亲和力高、特异性好的特点,且为小鼠IgG1亚型,为利用免疫学检测方法检测或诊断肝螺杆菌的感染提供了基础,为肝螺杆菌相关疾病的研究、新型诊断试剂的研制提供有力的研究基础。
-
公开(公告)号:CN116333167A
公开(公告)日:2023-06-27
申请号:CN202310112087.0
申请日:2023-02-14
Applicant: 扬州大学
Abstract: 本发明提供了一种靶向抑制非洲猪瘟病毒的融合蛋白、重组腺病毒载体及腺病毒和应用,属于基因工程技术领域。本发明提供了所述融合蛋白的元件包括:非洲猪瘟病毒M448R、MGF505‑7R以及OVA257‑264多肽OVA323‑339多肽。本发明提供了一种共表达上述融合蛋白的的重组腺病毒载体,以pShuttle‑CMV真核表达载体为基础,在多克隆位点处引入上述融合蛋白的编码基因,可用于构建直接感染真核细胞的腺病毒,并实现M448R、MGF505‑7R蛋白在真核细胞中的共表达。
-
公开(公告)号:CN107227374A
公开(公告)日:2017-10-03
申请号:CN201710646881.8
申请日:2017-08-01
Applicant: 扬州大学
CPC classification number: C12Q1/689 , C12Q1/686 , C12Q2563/107 , C12Q2545/114
Abstract: 本发明提供了一种基于荧光定量PCR鉴定啮齿类螺杆菌的引物、试剂盒及鉴定方法,属于分子生物学技术领域。本发明提供的引物适用于16S rRNA荧光定量PCR扩增,并且准确地从肝螺杆菌、胆螺杆菌等多种螺杆菌中鉴别出啮齿类螺杆菌,特异性达100%。本发明还提供了一种基于荧光定量PCR鉴定啮齿类螺杆菌的试剂盒及其鉴别方法,所述试剂盒方便准确地鉴定啮齿类螺杆菌的存在,操作简便,无需进行琼脂糖凝胶电泳,只需荧光定量PCR仪即可完成,实现快速、大通量诊断和检测,降低了鉴别时间和检测成本,研究表明本发明提供的这一荧光PCR检测方法,灵敏度达30拷贝。
-
公开(公告)号:CN117296796A
公开(公告)日:2023-12-29
申请号:CN202311580954.X
申请日:2023-11-24
Applicant: 扬州大学
IPC: A01K67/02
Abstract: 本发明涉及一种乳鼠螺杆菌感染制备小鼠非酒精性脂肪肝炎的构建方法,以血清肝功能异常、肝脏炎性细胞浸润、肝脏脂肪沉积、气球样变和纤维化等为特征,由高脂饮食及腹腔注射感染乳鼠螺杆菌引起的非酒精性脂肪肝炎动物模型。选用BALB/c小鼠,随机分为对照组、高脂饮食组、乳鼠螺杆菌感染组和高脂饮食联合乳鼠螺杆菌感染组。小鼠每周称量1次体重,于14和22周后分别取血制备血清并检测肝功能,同时处死小鼠;取新鲜肝组织进行肝脏总甘油三酯、总胆固醇含量测定,制备肝脏组织切片进行H&E、油红O及天狼星红染色,判定NASH模型效果。通过本发明,可为NASH新药研发提供良好的动物模型,还为研究肠道微生物在NASH发病中的机制提供了便利的动物模型。
-
公开(公告)号:CN112522286A
公开(公告)日:2021-03-19
申请号:CN202011592585.2
申请日:2020-12-29
Applicant: 扬州大学
IPC: C12N15/34 , C12N15/62 , C12N15/861 , C12N15/66 , C12N5/10
Abstract: 本发明提供了EP402R、CP204L和E183L共表达重组腺病毒及构建和应用,属于基因工程技术领域,所述基因插入到pShuttle‑CMV真核表达载体上,能够用于构建表达非洲猪瘟病毒EP402R、CP204L和E183L蛋白的重组腺病毒,该重组腺病毒能够直接感染真核细胞,从而实现EP402R、CP204L与E183L基因在真核细胞中共表达的目的,为进一步研究基于共表达EP402R、CP204L与E183L基因重组腺病毒载体疫苗打好基础。
-
-
-
-
-
-
-
-
-