一种表达非洲猪瘟病毒EP153R基因重组腺病毒载体、构建方法及重组腺病毒制备方法

    公开(公告)号:CN108504686A

    公开(公告)日:2018-09-07

    申请号:CN201810263508.9

    申请日:2018-03-28

    Applicant: 扬州大学

    Abstract: 本发明提供了一种表达非洲猪瘟病毒EP153R基因重组腺病毒载体、构建方法及重组腺病毒制备方法,属于基因工程技术领域。该方法利用腺病毒穿梭载体 pKO-FH、pAD-EF1a-GFP,经一系列中间过程,得到重组腺病毒表达质粒pAD-EP153R。将最后得到的线性化重组腺病毒载体质粒转染 HEK293 细胞;根据腺病毒感染形成的细胞病变筛选重组病毒,最终实现腺病毒包装过程,并通过扩增、浓缩和鉴定得到能够直接感染真核细胞的重组腺病毒,从而实现了EP153R基因在真核细胞中正常表达的目的,为研究基于表达EP153R的腺病毒载体疫苗奠定基础。

    一种表达非洲猪瘟病毒B646L基因重组腺病毒载体、构建方法及重组腺病毒制备方法

    公开(公告)号:CN108342414A

    公开(公告)日:2018-07-31

    申请号:CN201810263507.4

    申请日:2018-03-28

    Applicant: 扬州大学

    Abstract: 本发明提供了一种表达非洲猪瘟病毒B646L基因重组腺病毒载体、构建方法及重组腺病毒制备方法,属于基因工程技术领域。该方法利用腺病毒穿梭载体pKO-FH、pAD-EF1a-GFP,经一系列中间过程,得到重组腺病毒表达质粒pAD-B646L。将最后得到的线性化重组腺病毒载体质粒转染HEK293细胞;根据腺病毒感染形成的细胞病变筛选重组病毒,最终实现腺病毒包装过程,并通过扩增、浓缩和鉴定得到能够直接感染真核细胞的重组腺病毒,从而实现了B646L基因在真核细胞中正常表达的目的,为研究基于表达B646L的腺病毒载体疫苗奠定基础。

    一种肝螺杆菌CdtB蛋白单克隆抗体及其分泌杂交瘤细胞株和应用

    公开(公告)号:CN113462654B

    公开(公告)日:2023-07-14

    申请号:CN202110937064.4

    申请日:2021-08-16

    Applicant: 扬州大学

    Abstract: 本发明提供了一种肝螺杆菌CdtB蛋白单克隆抗体及其分泌杂交瘤细胞株和应用,属于单克隆抗体技术领域。本发明针对肝螺杆菌CdtB蛋白检测空白的问题,用具有良好免疫原性的肝螺杆菌CdtB第19位至273位氨基酸区域经重组表达免疫动物,筛选得到分泌肝螺杆菌CdtB蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞株2D9,保藏编号为CCTCCNO:C2021140。杂交瘤细胞株2D9分泌的肝螺杆菌CdtB蛋白单克隆抗体可特异性结合肝螺杆菌CdtB蛋白,具具有亲和力高、特异性好的特点,且为小鼠IgG1亚型,为利用免疫学检测方法检测或诊断肝螺杆菌的感染提供了基础,为肝螺杆菌相关疾病的研究、新型诊断试剂的研制提供有力的研究基础。

    一种基于荧光定量PCR鉴定啮齿类螺杆菌的引物、试剂盒及鉴定方法

    公开(公告)号:CN107227374A

    公开(公告)日:2017-10-03

    申请号:CN201710646881.8

    申请日:2017-08-01

    Applicant: 扬州大学

    CPC classification number: C12Q1/689 C12Q1/686 C12Q2563/107 C12Q2545/114

    Abstract: 本发明提供了一种基于荧光定量PCR鉴定啮齿类螺杆菌的引物、试剂盒及鉴定方法,属于分子生物学技术领域。本发明提供的引物适用于16S rRNA荧光定量PCR扩增,并且准确地从肝螺杆菌、胆螺杆菌等多种螺杆菌中鉴别出啮齿类螺杆菌,特异性达100%。本发明还提供了一种基于荧光定量PCR鉴定啮齿类螺杆菌的试剂盒及其鉴别方法,所述试剂盒方便准确地鉴定啮齿类螺杆菌的存在,操作简便,无需进行琼脂糖凝胶电泳,只需荧光定量PCR仪即可完成,实现快速、大通量诊断和检测,降低了鉴别时间和检测成本,研究表明本发明提供的这一荧光PCR检测方法,灵敏度达30拷贝。

    一种乳鼠螺杆菌感染制备小鼠非酒精性脂肪肝炎的构建方法

    公开(公告)号:CN117296796A

    公开(公告)日:2023-12-29

    申请号:CN202311580954.X

    申请日:2023-11-24

    Applicant: 扬州大学

    Abstract: 本发明涉及一种乳鼠螺杆菌感染制备小鼠非酒精性脂肪肝炎的构建方法,以血清肝功能异常、肝脏炎性细胞浸润、肝脏脂肪沉积、气球样变和纤维化等为特征,由高脂饮食及腹腔注射感染乳鼠螺杆菌引起的非酒精性脂肪肝炎动物模型。选用BALB/c小鼠,随机分为对照组、高脂饮食组、乳鼠螺杆菌感染组和高脂饮食联合乳鼠螺杆菌感染组。小鼠每周称量1次体重,于14和22周后分别取血制备血清并检测肝功能,同时处死小鼠;取新鲜肝组织进行肝脏总甘油三酯、总胆固醇含量测定,制备肝脏组织切片进行H&E、油红O及天狼星红染色,判定NASH模型效果。通过本发明,可为NASH新药研发提供良好的动物模型,还为研究肠道微生物在NASH发病中的机制提供了便利的动物模型。

    EP402R、CP204L和E183L共表达重组腺病毒及构建和应用

    公开(公告)号:CN112522286A

    公开(公告)日:2021-03-19

    申请号:CN202011592585.2

    申请日:2020-12-29

    Applicant: 扬州大学

    Abstract: 本发明提供了EP402R、CP204L和E183L共表达重组腺病毒及构建和应用,属于基因工程技术领域,所述基因插入到pShuttle‑CMV真核表达载体上,能够用于构建表达非洲猪瘟病毒EP402R、CP204L和E183L蛋白的重组腺病毒,该重组腺病毒能够直接感染真核细胞,从而实现EP402R、CP204L与E183L基因在真核细胞中共表达的目的,为进一步研究基于共表达EP402R、CP204L与E183L基因重组腺病毒载体疫苗打好基础。

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