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公开(公告)号：CN111394435A
公开(公告)日：2020-07-10
申请号：CN202010415742.6
申请日：2020-05-16
Applicant: 扬州大学
IPC: C12Q1/6851 , C12N15/11
Abstract: 本发明涉及一种反义RNA ch-MYC-AS1表达检测的引物及试剂盒，属于分子生物学领域。所述引物包括链特异性RT引物和荧光定量PCR检测引物；其中链特异性RT引物的序列如SEQ ID NO.8所示；荧光定量PCR检测引物的序列如SEQ ID NO.9和SEQ ID NO.10所示。本研究发明还提供了ch-MYC-AS1表达检测试剂盒，为ch-MYC-AS1表达规律分析提供了方法和基础。
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公开(公告)号：CN111235278A
公开(公告)日：2020-06-05
申请号：CN202010258136.8
申请日：2020-04-03
Applicant: 扬州大学
IPC: C12Q1/6886 , C12N15/11
Abstract: 本发明涉及一种可用于检测与肝癌相关的H19基因RNA甲基化程度的试剂盒及其应用，本发明首次公开了可用于检测与肝癌相关的H19基因RNA甲基化程度的试剂盒及其应用，所述的检测试剂盒包含一对H19 RNA甲基化特异性扩增引物及一个甲基化特异性测序引物，H19 RNA的高甲基化与肝癌的恶性程度显著相关，通过检测H19 RNA的甲基化程度，为恶性肝癌辅助诊断提供新的思路。
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公开(公告)号：CN111073982A
公开(公告)日：2020-04-28
申请号：CN202010069860.6
申请日：2020-01-21
Applicant: 扬州大学
IPC: C12Q1/6886 , C12Q1/6869
Abstract: 本发明涉及一种可用于检测与肝癌相关的GRB2基因mRNA甲基化程度的试剂盒及其应用，本发明首次公开了可用于检测与肝癌相关的GRB2基因mRNA甲基化程度的试剂盒及其应用，所述的检测试剂盒包含一对GRB2 mRNA甲基化特异性扩增引物及一个甲基化特异性测序引物，GRB2 mRNA的高甲基化与肝癌的恶性程度显著相关，通过检测GRB2 mRNA的甲基化程度，为恶性肝癌辅助诊断提供新的思路。
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公开(公告)号：CN110699487A
公开(公告)日：2020-01-17
申请号：CN201911085477.3
申请日：2019-11-08
Applicant: 扬州大学
IPC: C12Q1/70 , C12Q1/6886 , C12N15/113 , C12N15/10 , C12N15/11 , C12N15/85
Abstract: 本发明涉及动物病毒学、分子生物学和基因工程领域，具体涉及用于诊断禽白血病病毒肿瘤发生的反义RNA及制备方法、应用和构建过表达载体的引物。该RNA来源于鸡基因组2号染色体中周期蛋白依赖性激酶CDK6基因反义链转录的长链非编码RNA，采用RACE和PCR克隆技术鉴定后，将其命名为chCDK6-AS。然后，构建pcDNA3.1-chCDK6-AS过表达载体。体外实验显示J亚群禽白血病病毒感染可显著上调鸡DF-1细胞和HD11细胞chCDK6-AS的表达。本发明不仅提供了一种诊断禽白血病病毒肿瘤发生的新手段，也为禽白血病病毒致瘤机制研究提供了新思路。
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公开(公告)号：CN107488750B
公开(公告)日：2019-11-05
申请号：CN201710883276.2
申请日：2017-09-26
Applicant: 扬州大学
IPC: C12Q1/70 , C12Q1/6851 , C12N15/11
Abstract: 本发明属于分子生物学领域，具体涉及一种长链非编码RNA lnc‑ALVE1‑AS1表达检测引物及试剂盒。所述引物包括链特异性RT引物和荧光定量PCR检测引物；其中链特异性RT引物的序列如SEQ ID NO.8和SEQ ID NO.9所示；荧光定量PCR检测引物的序列如SEQ ID NO.10和SEQ ID NO.11所示。本研究发明还提供了lnc‑ALVE1‑AS1表达检测试剂盒，为lnc‑ALVE1‑AS1表达规律分析提供了方法和基础，在生产实践可用于检测鸡群的禽白血病天然免疫状态。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN107881200A
公开(公告)日：2018-04-06
申请号：CN201711157630.X
申请日：2017-11-20
Applicant: 扬州大学
IPC: C12N15/90 , C12N15/89 , C12N9/22 , A01K67/027
CPC classification number: C12N15/902 , A01K67/0275 , A01K2227/40 , A01K2267/03 , C12N9/22 , C12N15/89
Abstract: 本发明提供一种应用于模式动物斑马鱼转基因的快速筛选方法，包括以下步骤：1)构建含有强启动子、目的基因和标签基因的基因表达载体；2)设计出针对靶基因的特异性靶点，获得靶向SgRNA序列；3)在特异性靶点的基础上构建同源重组载体；4)将同源重组载体片段、SgRNA序列体外转录合成的mRNA，以及体外转录合成的nCas9-mRNA，三者共同注射斑马鱼受精卵；5)先筛选出靶基因功能缺失的斑马鱼；再通过标签基因进行第二次筛选，获得标签基因表达个体，从而获得表达目的基因表达个体。该方法可以对早期斑马幼鱼进行筛选，达到快速建立转基因模型目的。
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公开(公告)号：CN106520829A
公开(公告)日：2017-03-22
申请号：CN201610903540.X
申请日：2016-10-17
Applicant: 扬州大学
Abstract: 本发明提供了一种终止双等位基因转录的方法，包括以下步骤：1)构建分别含有两种不同抗生素筛选基因的SA-T2A-抗生素筛选基因-PolyA DNA片段；2)根据不同靶向基因设计gRNA，构建Cas9/gRNA表达载体；3)在靶向基因中插入步骤1)中所得的SA-T2A-抗生素筛选基因-PolyA DNA片段，构建含有靶向基因的同源重组载体；4)导入细胞：将步骤3)中所获得的含有靶向基因的一对同源重组载体，以及步骤2)中所获得的含有靶向基因的Cas9/gRNA表达载体共转染细胞；5)使用步骤1)中所使用的抗生素基因的相关抗生素筛选至少2周，获取双等位基因被敲除的多克隆细胞株；该方法可以实现以达到在高效定点插入的同时，快速获得双等位基因同时敲除的细胞株的目的。
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公开(公告)号：CN105441574A
公开(公告)日：2016-03-30
申请号：CN201610015862.0
申请日：2016-01-11
Applicant: 扬州大学
IPC: C12Q1/68
CPC classification number: C12Q1/6851 , C12Q2531/113 , C12Q2523/125 , C12Q2545/113
Abstract: 本发明属于合成DNA甲基化检测领域，具体涉及一种DNA甲基化分析中DNA样本重亚硫酸盐处理转化率的评估方法。本发明分别以梯度稀释的重亚硫酸盐处理和未处理DNA标准品转化与未转化的DNA的Ct值以及对应的DNA拷贝数的标准曲线。设计人工合成与任何物种无同源性的序列作为样本的参考序列，使用SybrGreen法应用上述方法评估所有物种重亚硫酸盐处理样本的转化效率，并对该检测方法进行可靠性评估，结果显示，该方法能够有效地评估DNA样品重亚硫酸盐的转化效率，为广泛物种DNA甲基化准确分析提供了可靠快捷的方法。
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公开(公告)号：CN117210505A
公开(公告)日：2023-12-12
申请号：CN202210626728.X
申请日：2022-06-05
Applicant: 扬州大学 , 江苏易诺维生物医学研究院有限公司
IPC: C12N15/867 , C12N5/10 , C12N15/12 , A61P39/06
Abstract: 本发明公开了一种NGF基因修饰的人脐带间充质干细胞外泌体的制备方法，包括以下步骤：1)构建含有目的基因的NGF表达载体；2)将步骤1)所获得的NGF表达载体与vsvg包膜质粒、ΔR8.2包装质粒共转染293细胞，包装病毒，收集细胞上清；3)用步骤2)收集的细胞上清感染间充质干细胞，使用嘌呤素药物筛选至少一周后，获取高表达NGF基因的人脐带间充质干细胞稳转细胞株；4)用含有步骤3)收集的高表达NGF基因的人脐带间充质干细胞稳转细胞株的细胞液，利用PEG6000提取外泌体，得到高表达NGF基因的人脐带间充质干细胞外泌体。本发明通过构建NGF的慢病毒载体在人脐带间充质干细胞中高表达进而使MSC来源的外泌体NGF蛋白高表达，从而使其具有有效的抗氧化作用。
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