一种惰性载体大肠杆菌及其潜在应用

    公开(公告)号:CN110257276B

    公开(公告)日:2020-03-24

    申请号:CN201910424381.9

    申请日:2019-05-21

    Applicant: 扬州大学

    Abstract: 本发明涉及一种惰性载体大肠杆菌及其潜在应用,基于该大肠杆菌分离株具备惰性载体特性,有望开发成一种用于间接凝集试验的载体菌。所述惰性载体大肠杆菌已保藏于中国普通微生物菌种保藏管理中心(CGMCC),保藏地址为中国北京,保藏编号为CGMCC No.17339,保藏日期为2019年3月18日,分类命名为大肠埃希氏菌(Escherichia coli),菌株代号SE1。该大肠杆菌分离株来自健康鸡群,在较高的工作浓度下的细菌数量与不同遗传背景的多种鸡源血清不发生任何肉眼可见的凝集反应,即与鸡源血清不产生非特异性凝集反应,我们称该大肠杆菌为惰性载体大肠杆菌。本发明为开发简便快速间接凝集检测方法提供了一种惰性载体菌和其潜在应用。

    一种番鸭细小病毒感染性克隆的构建及拯救方法

    公开(公告)号:CN107012170A

    公开(公告)日:2017-08-04

    申请号:CN201710299948.5

    申请日:2017-05-02

    Applicant: 扬州大学

    Abstract: 本发明涉及生物技术领域,特别涉及一种番鸭细小病毒(Muscovy duck parvovirus,MDPV)感染性克隆的构建和拯救方法。该方法是将MDPV的完整基因组克隆入载体质粒pBSKN,获得重组质粒;将重组质粒与转染试剂混合后,通过绒毛尿囊膜途径接种非免疫番鸭胚,重组质粒在番鸭胚中得到拯救;所述pBSKN载体,是将商品化质粒pBluescript II(SK)多克隆位点原有的EcoRV酶切位点用NcoI位点替换而得到。产生的感染性病毒可致死番鸭胚,拯救病毒与亲本病毒对雏番鸭具有相近的致死率。该拯救方法操作简便高效,避免了转染原代细胞带来的繁琐和低效问题,在MDPV反向遗传学研究和疫苗创制上具有潜在应用价值。

    快速检测沙门氏菌的抗体试剂及检测方法

    公开(公告)号:CN103837684A

    公开(公告)日:2014-06-04

    申请号:CN201410120962.0

    申请日:2014-03-27

    Applicant: 扬州大学

    CPC classification number: G01N33/56916 G01N33/54393

    Abstract: 本发明提供了一种快速、简便、特异性高,且能够检测所有沙门氏菌的单克隆抗体及其制备方法。其抗体具体为沙门氏菌鞭毛fliC基因编码蛋白特异性单克隆抗体;其制备方法具体涉及沙门氏菌特定鞭毛成分蛋白及其单克隆抗体的制备。本发明的单克隆抗体用于检测样本中的所有沙门氏菌,其经倍比稀释至合适浓度,加入一滴待检菌液后,即可在室温下利用简单的玻板凝集反应通过观察混合液是否呈絮状或颗粒状肉眼可见沉淀判断样本是否含有沙门氏菌或为沙门氏菌所污染,从而用于实验室、临床及日常生产生活中沙门氏菌的检测或诊断。

    肠炎沙门菌ryhB-1和stdA双基因缺失株及其构建方法和应用

    公开(公告)号:CN116948927A

    公开(公告)日:2023-10-27

    申请号:CN202310569194.6

    申请日:2023-05-19

    Applicant: 扬州大学

    Abstract: 本发明属于生物工程技术领域,具体涉及一种肠炎沙门菌ryhB‑1和stdA双基因缺失株SE50336ΔryhB‑1ΔstdA及其构建方法和应用。本发明的双基因缺失株已保藏于中国典型培养物保藏中心,保藏号为CCTCC NO:M 20221958。该缺失株是利用λ‑Red同源重组技术,将肠炎沙门菌50336的非编码小RNA RyhB‑1和stdA基因敲除后获得的。本发明制备的双基因缺失株毒力显著下降,具有良好的安全性。可诱导较强的细胞免疫和体液免疫,攻毒保护效果好,免疫效果优良,3~4周内可被清除,安全性能优异,为预防家禽的肠炎沙门菌感染提供了安全、免疫原性好、保护效力高的禽肠炎沙门菌减毒疫苗。

    基于内镜引导下的公鸡睾丸注射模型的建立方法和应用

    公开(公告)号:CN116942357A

    公开(公告)日:2023-10-27

    申请号:CN202310951697.X

    申请日:2023-07-31

    Applicant: 扬州大学

    Abstract: 本发明属于生物技术领域,涉及基于内镜引导下的公鸡睾丸注射模型的建立方法和应用,包括以下步骤:将公鸡全身麻醉,术部选择最后肋骨的肋弓后缘与脊柱交界的凹陷处,术部消毒后,划开术部皮肤,直至腹腔,将内镜镜头操作鞘沿打开的切口深入腹腔,前斜式内镜插入操作鞘内并卡紧;打开膨宫加压器,使腹腔膨起,通过内镜显示器观察公鸡腹腔内结构,将内镜向脊柱侧缓慢移动,直至视野中出现睾丸组织;注射器在操作鞘上方与之平行方向进针,缓慢深入腹腔内;在内镜观察下,将注射器缓慢扎入公鸡睾丸内,边退针边推注。本发明方法采取新的手术通路,切口更小,对实验动物损伤小,成功率高,操作时间短,术后感染概率低,可提高动物术后的存活率。

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