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公开(公告)号：CN101603082B
公开(公告)日：2012-06-06
申请号：CN200910038727.8
申请日：2009-04-17
Applicant: 广州甘蔗糖业研究所
Abstract: 本发明涉及甘蔗种苗的繁殖生产技术领域，提出一种甘蔗宿根矮化病菌的PCR快速检测方法，包括取甘蔗汁、蔗汁预处理、改良优化CTAB法提取RSD的基因组DNA、PCR扩增、电泳检测等步骤，其中电泳检测是将PCR扩增步骤的PCR产物经过5％聚丙烯酰胺凝胶电泳后于0.1％的硝酸银液中染色10分钟，用双蒸水清洗1-2次，然后再于显色液(1.5％NaOH，0.15％甲醛，)显色，后观测结果。本发明有如下突出特点和显著进步：1.检测快速、结果稳定，从大田取蔗汁起到得出检测结果只需8小时，且检测结果稳定。2.可以大批量检测，本发明仅需1～2mL甘蔗蔗汁，蔗汁采集方便不需要特殊设备，操作简单，可以进行批量化检测，一个熟练的技术人员每天可以检测800个以上样品。3.检测结果准确、灵敏度高，本发明在蔗汁前处理中能有效去除甘蔗蔗汁中蔗蜡等次生物质对RSD的DNA影响，获取DNA纯度高，PCR过程干扰较小，RSD的电泳结果准确可靠、灵敏度高。
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公开(公告)号：CN102204465A
公开(公告)日：2011-10-05
申请号：CN201110099531.7
申请日：2011-04-20
Abstract: 本发明涉及植物抗病性鉴定技术领域，提出一种甘蔗黑穗病抗性鉴定方法，首先用微量新鲜甘蔗黑粉菌冬孢子分离培养出甘蔗黑粉菌异型交配型（+、-）单倍体担孢子，然后经过菌株扩大培养、接种、发病率调查、抗性评价等步骤，本发明具有以下突出的实质性特点和显著的进步：1、只需极少量甘蔗黑粉菌冬孢子经分离培养，即可满足接种需要，工作量小；2、异型交配型菌株能够超低温保存，经活化、扩大培养后可作接种源，无需每次鉴定都重新采取菌种并分离培养；3、本发明抗性鉴定历期短、灵敏性高；4、还可利用本发明的方法，鉴别出参试品种所抗感的黑穗病生理小种类型，有效指导甘蔗抗黑穗病育种及蔗区品种合理配置。
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公开(公告)号：CN101401549A
公开(公告)日：2009-04-08
申请号：CN200810218883.8
申请日：2008-11-04
Applicant: 广州甘蔗糖业研究所
Abstract: 本发明涉及一种甘蔗组培一次成苗的方法。以健壮甘蔗的幼嫩心叶或茎尖生长锥作为外植体，一次成苗培养40－50天左右获得带少量蔗根的小苗后，将其转入生根培养基中经10－20天的促根处理后，然后进入炼苗和假植阶段。或在一次性成苗培养基中培养50－70天左右，获得根系长势较好的甘蔗完整小苗后直接进入炼苗和假植阶段。本发明不更换、或只更换一次培养基，有效减少了常规甘蔗侧芽或嫩叶诱导愈伤组织及分化过程中多次转接造成的污染，简化了甘蔗组培苗生产的程序，节约成本，成苗率高，显著缩短了甘蔗组培苗的生产周期，适用于甘蔗种苗工厂化快速繁殖。
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公开(公告)号：CN101560256A
公开(公告)日：2009-10-21
申请号：CN200910039842.7
申请日：2009-05-27
Applicant: 广州甘蔗糖业研究所
Abstract: 本发明涉及甘蔗宿根矮化病的防治技术领域，提出甘蔗宿根矮化病病菌多克隆抗体的制备方法，其步骤包括：(1)病原菌的分离培养，获取抗原；(2)取抗原与等量的弗氏完全佐剂混合，乳化，免疫家兔；(3)取抗原与等量的弗氏不完全佐剂混合，乳化，再免疫家兔，重复免疫多次，测定效价达到要求后，心脏采血，分离抗血清；(4)抗血清纯化、获得目标多克隆抗体。在本发明中，甘蔗宿根矮化病病菌分离自甘蔗蔗汁，基于此得到的多克隆抗体可特异性识别蔗汁中的甘蔗宿根矮化病病菌。用本发明制备的甘蔗宿根矮化病病菌多克隆抗体，具有特异性高，纯度及效价高，可长期保存的优点，这对今后在甘蔗科研及生产上用免疫学方法检测病原菌进行甘蔗宿根矮化病(RSD)诊断具有重要的现实意义。
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