一种真空渗透辅助农杆菌介导转化苜蓿的方法

    公开(公告)号:CN101457235A

    公开(公告)日:2009-06-17

    申请号:CN200810138770.7

    申请日:2008-08-05

    Abstract: 本发明公开一种真空渗透辅助农杆菌介导转化苜蓿的方法,包括(1)种子灭菌和试管苗培育,(2)含有目标基因的根癌农杆菌培养,(3)真空渗透辅助农杆菌侵染,(4)抑菌和抗性植株选育培养,(5)抗性植株的生根选育,(6)转化植株炼苗及大田移栽等步骤;本发明以农杆菌介导转化苜蓿幼嫩真叶的转化方式,在侵染过程中采用真空渗透的方法,从而大大提高转化效率,通过抗性植株的二次抗性生根选育减少了后期检测工作量,得到大量的转化植株;本发明的方法克服了现有苜蓿遗传转化效率低及转化周期长的难点,提高了苜蓿的转化效率95%以上,缩短转化周期2~3个月,对于苜蓿基因工程方面的理论研究以及遗传育种实践均具有重要意义。

    利用60Cor射线辐射诱变红叶石楠体细胞育种的方法

    公开(公告)号:CN102934613A

    公开(公告)日:2013-02-20

    申请号:CN201210500422.6

    申请日:2012-11-30

    Abstract: 本发明公开了一种利用60Co r射线辐射诱变红叶石楠体细胞育种的方法,是以在愈伤组织增殖培养基上暗培养获得的红叶石楠胚性愈伤组织为辐射材料,用辐照剂量为15-45Gy的60Co r射线辐射对其处理1-2小时,然后将辐射处理后的愈伤组织转到愈伤组织分化培养基上,在温度为25±2℃条件下暗培养30-35天,之后转移到组培室光照条件下培养,愈伤组织绿芽分化率高达79%,由辐射诱变筛选的细胞再生出植株。本发明适宜用于植物新品种选育,为在细胞水平上开展植物体细胞突变体育种提供条件。

    一种真空渗透辅助农杆菌介导转化苜蓿的方法

    公开(公告)号:CN101457235B

    公开(公告)日:2011-04-27

    申请号:CN200810138770.7

    申请日:2008-08-05

    Abstract: 本发明公开一种真空渗透辅助农杆菌介导转化苜蓿的方法,包括(1)种子灭菌和试管苗培育,(2)含有目标基因的根癌农杆菌培养,(3)真空渗透辅助农杆菌侵染,(4)抑菌和抗性植株选育培养,(5)抗性植株的生根选育,(6)转化植株炼苗及大田移栽等步骤;本发明以农杆菌介导转化苜蓿幼嫩真叶的转化方式,在侵染过程中采用真空渗透的方法,从而大大提高转化效率,通过抗性植株的二次抗性生根选育减少了后期检测工作量,得到大量的转化植株;本发明的方法克服了现有苜蓿遗传转化效率低及转化周期长的难点,提高了苜蓿的转化效率95%以上,缩短转化周期2~3个月,对于苜蓿基因工程方面的理论研究以及遗传育种实践均具有重要意义。

    农杆菌介导的国槐转基因及组培快繁方法

    公开(公告)号:CN101006768A

    公开(公告)日:2007-08-01

    申请号:CN200710013185.X

    申请日:2007-01-24

    Abstract: 本发明公开一种农杆菌介导的国槐转基因及组培快繁方法,包括(1)种子选择与消毒,(2)根癌农杆菌的选择与培养,(3)组培苗培育,(4)农杆菌侵染,(5)抗性植株选育,(6)转化植株鉴定,(7)转化植株培育,(8)幼苗移栽等步骤;本发明通过选择国槐的特定叶片(大叶片)建立了适宜遗传转化的高频再生体系以及一个可重复的、转化效率高的林木基因转化技术体系,获得了抗盐性提高的转化植株,并建立了配套的组培快繁育苗技术体系;本发明的方法为农杆菌介导的目的基因在木本植物上的转化及包括丛生芽分化、生根和移栽等组培快繁技术提供了依据。

    四倍体刺槐转基因及组培快繁方法

    公开(公告)号:CN1307312C

    公开(公告)日:2007-03-28

    申请号:CN200410024208.3

    申请日:2004-05-25

    Abstract: 本发明公开一种四倍体刺槐转基因及组培快繁方法,由以下步骤组成:将四倍体刺槐当年生新梢的茎段,消毒后经启动培养基、诱导培养基培养,得到的愈伤组织,经含有双元载体pBin438的根癌农杆菌LBA4404菌系转基因处理后,再经分化培养和选择培养获得的Kan抗性植株,经分子检测筛选出转化植株,转入生根培养基,经过驯化炼苗后,栽入大田。本发明的方法为农杆菌介导的目的基因在木本植物上的转化及包括丛生芽分化、生根和移栽等组培快繁技术提供了依据。

    红叶石楠离体叶片诱导快繁培养基

    公开(公告)号:CN102124954B

    公开(公告)日:2012-11-28

    申请号:CN201110033598.0

    申请日:2011-01-31

    Abstract: 一种红叶石楠离体叶片体细胞胚诱导快繁培养基包括芽启动培养基、试管苗增殖培养基、第一诱导体胚和/或不定芽形成培养基、第二诱导体胚和/或不定芽形成培养基、第三诱导体胚和/或不定芽形成培养基、第一体胚和/或不定芽生长与分化培养基、第二体胚和/或不定芽生长与分化培养基和壮苗生根培养基。本发明所述的红叶石楠离体叶片体细胞胚诱导快繁培养基通过改良基本培养基及成分、调整培养条件,使繁殖困难的红叶石楠通过体细胞胚发生途径快繁,植株移栽成活率达到95%以上,种苗生长健壮,可有效解决优良种苗种质退化问题,也可为生产上提供大量优质提纯复壮的脱毒苗木,还可为红叶石楠遗传转化或诱变育种选育新品种提供一个理想的受体体系。

    红叶石楠离体叶片体细胞胚诱导快繁培养方法

    公开(公告)号:CN102124955A

    公开(公告)日:2011-07-20

    申请号:CN201110033701.1

    申请日:2011-01-31

    Abstract: 一种红叶石楠离体叶片体细胞胚诱导快繁培养方法,包括以下步骤:(1)建立红叶石楠无菌试管苗再生体系;(2)建立离体叶片体胚和不定芽诱导的高频快繁体系;(3)试管苗生根炼苗移栽。本发明所述的红叶石楠离体叶片体细胞胚诱导快繁培养方法通过选择适宜外植体、改良基本培养基及成分、调整培养条件等配套措施,使种子繁殖困难的红叶石楠通过体细胞胚胎发生途径快繁,并使得植株移栽成活率达到95%以上,种苗生长健壮,可有效解决优良种苗种质退化问题,也可为生产上提供大量优质提纯复壮的脱毒苗木,此外,还可为红叶石楠遗传转化或诱变育种选育新品种提供一个理想的受体体系。

    红叶石楠离体叶片体细胞胚诱导快繁培养基

    公开(公告)号:CN102124954A

    公开(公告)日:2011-07-20

    申请号:CN201110033598.0

    申请日:2011-01-31

    Abstract: 一种红叶石楠离体叶片体细胞胚诱导快繁培养基包括芽启动培养基、试管苗增殖培养基、第一诱导体胚和/或不定芽形成培养基、第二诱导体胚和/或不定芽形成培养基、第三诱导体胚和/或不定芽形成培养基、第一体胚和/或不定芽生长与分化培养基、第二体胚和/或不定芽生长与分化培养基和壮苗生根培养基。本发明所述的红叶石楠离体叶片体细胞胚诱导快繁培养基通过改良基本培养基及成分、调整培养条件,使繁殖困难的红叶石楠通过体细胞胚发生途径快繁,植株移栽成活率达到95%以上,种苗生长健壮,可有效解决优良种苗种质退化问题,也可为生产上提供大量优质提纯复壮的脱毒苗木,还可为红叶石楠遗传转化或诱变育种选育新品种提供一个理想的受体体系。

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