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公开(公告)号：CN120026018A
公开(公告)日：2025-05-23
申请号：CN202411948334.1
申请日：2024-12-27
Applicant: 大连理工大学
IPC: C12N15/10 , C12N9/12 , C12Q1/6895 , C12Q1/6851 , C12N15/82 , C12N15/54 , A01H5/00 , A01H6/82 , C12N15/64 , G16B20/00 , G16B35/20
Abstract: 本发明提供一种番茄抗晚疫病基因CDPK12的克隆方法与应用，克隆方法包括以番茄早粉2号的cDNA为模板进行PCR扩增，将得到的PCR产物与双酶切的pBI‑121克隆载体连接，转化大肠杆菌CDPK12，挑取单菌落提取质粒，进行质粒PCR后将质粒送测序，与CDPK12一致的即为连接正确的质粒；还提供了番茄抗晚疫病基因CDPK12在番茄抗晚疫病中的应用。本发明抗晚疫病基因CDPK12，将其过表达以后，可以增强番茄对晚疫病的抗性。此外，CDPK12的过表达还会上调PR基因的表达量，本发明为揭示CDPK参与番茄抗晚疫病的分子机制奠定了基础。
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公开(公告)号：CN112195178B
公开(公告)日：2023-11-24
申请号：CN202010984101.2
申请日：2020-09-18
Applicant: 大连理工大学
Abstract: 本发明提供了一种通过沉默miR394来提高番茄晚疫病抗性的长链非编码RNA‑lncRNA40787，所述DNA分子的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示；提供了该长链非编码RNA的克隆方法：以野生型感晚疫病番茄早粉2号的cDNA为模板进行PCR扩增，将得到的PCR产物与pMD‑18T克隆载体连接，转化大肠杆菌DH5α，挑取单菌落进行测序：还提供了该长链非编码RNA的应用方法，用于番茄抵御病原菌侵染，即在番茄中瞬时过表达所述番茄抗晚疫病的长链非编码RNA‑lncRNA40787。本发明得到的长链非编码RNA在番茄瞬时过表达后，番茄miR394的表达量显著降
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公开(公告)号：CN116947990A
公开(公告)日：2023-10-27
申请号：CN202310857702.0
申请日：2023-07-13
Applicant: 大连理工大学
IPC: C07K14/415 , C12N15/29 , C12N15/84 , C12N15/70 , A01H5/00 , A01H6/82 , A01N37/46 , A01P21/00 , A01P3/00 , C12R1/19
Abstract: 本发明提供一种番茄抗晚疫病基因SlPROPEP的克隆及其与小肽SlPep的应用，番茄抗晚疫病基因SlPROPEP的核苷酸序列如SEQ ID NO:2所示，其编码的小肽SlPep前体蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO:3所示，小肽SlPep来源于SEQ ID NO:3的C末端，如SEQ ID NO:1所示。本发明构建了SlPROPEP的重组表达载体，SlPep前体蛋白的编码基因SlPROPEP的过表达，可以实现对番茄晚疫病抗性基因的调控，SlPROPEP的过表达可以提高植物体内抗病蛋白PR的转录积累，PR蛋白可直接影响植株的抗病性。另外，小肽SlPep通过喷施番茄植株，可增强番茄免疫，提高番茄植株对致病疫霉的抗性，这有助于番茄抗药性的保护和番茄产业的发展。而且小肽SlPep可提高植物体内抗病蛋白PR的转录积累，PR蛋白可直接影响植株的抗病性。
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公开(公告)号：CN106916825B
公开(公告)日：2020-06-02
申请号：CN201710172194.7
申请日：2017-03-22
Applicant: 大连理工大学
Abstract: 本发明提供了一种番茄抗晚疫病基因SpNBS‑LRR，其DNA分子序列如SEQ ID NO.1所示；提供了该基因的克隆方法，以野生型抗晚疫病番茄L3708的cDNA为模板进行PCR扩增；将得到的PCR产物与pMD‑19T克隆载体连接，转化大肠杆菌DH5α，挑取单菌落进行测序；还提供了该基因的应用方法，培育抗晚疫病番茄植株。本发明方法得到的过表达植株中SpNBS‑LRR的表达量高于野生型植株，其抗晚疫病效果更优。本发明通过过表达SpNBS‑LRR基因使番茄对晚疫病的抗性增强，对培育抗晚疫病番茄品种具有重要意义。
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公开(公告)号：CN106916825A
公开(公告)日：2017-07-04
申请号：CN201710172194.7
申请日：2017-03-22
Applicant: 大连理工大学
Abstract: 本发明提供了一种番茄抗晚疫病基因SpNBS‑LRR，其DNA分子序列如SEQ ID NO.1所示；提供了该基因的克隆方法，以野生型抗晚疫病番茄L3708的cDNA为模板进行PCR扩增；将得到的PCR产物与pMD‑19T克隆载体连接，转化大肠杆菌DH5α，挑取单菌落进行测序；还提供了该基因的应用方法，培育抗晚疫病番茄植株。本发明方法得到的过表达植株中SpNBS‑LRR的表达量高于野生型植株，其抗晚疫病效果更优。本发明通过过表达SpNBS‑LRR基因使番茄对晚疫病的抗性增强，对培育抗晚疫病番茄品种具有重要意义。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN119120521A
公开(公告)日：2024-12-13
申请号：CN202411516427.7
申请日：2024-10-29
Applicant: 大连理工大学
Abstract: 本发明提供一种番茄抗晚疫病的基因SlLRR‑RLK95，其核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示；提供了该基因的克隆方法及应用，SlLRR‑RLK95基因的克隆包括：以野生型番茄早粉2号的基因组为模板使用PCR技术进行扩增；将扩增且纯化后的PCR产物与pBI121植物载体进行连接，将构建的pBI121‑SlLRR‑RLK95转化至大肠杆菌DH5α中挑取单菌落，摇菌提质粒后进行测序；并且提供了该基因的应用方法，SlLRR‑RLK95的过表达可以正向调控番茄中SA相关抗病相关基因，用于提高番茄植株的抗病性。本发明通过瞬时过表达SlLRR‑RLK95基因增强番茄对晚疫病的抗性，对抗晚疫病番茄品种的培育及番茄产业的保护有着重要意义。
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公开(公告)号：CN118308366A
公开(公告)日：2024-07-09
申请号：CN202410240240.2
申请日：2024-03-04
Applicant: 大连理工大学
Abstract: 本发明属于植物基因工程技术领域，具体涉及一种番茄抗晚疫病基因SlRALF，其核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示；本发明还提供了该基因的克隆方法及应用，SlRALF基因的克隆包括：以栽培番茄早粉2号的基因组为模板使用PCR技术进行扩增后构建pMD‑19T‑SlRALF重组载体，将其转化至大肠杆菌DH5α后挑取单菌落，摇菌提质粒后进行测序；并且提供了该基因的应用方法，SlRALF的过表达可以正向调控番茄中的抗病相关基因，用于增强番茄对晚疫病的抗性。本发明对于抗晚疫病番茄品种的创制以及番茄病害的预防和控制具有重要意义。
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公开(公告)号：CN112210555B
公开(公告)日：2022-02-22
申请号：CN202010984073.4
申请日：2020-09-18
Applicant: 大连理工大学
Abstract: 本发明提供了一种番茄抗晚疫病的基因Sly‑miR166b，其DNA分子序列如SEQ ID NO.1所示；提供了该基因的克隆方法，以野生型感晚疫病番茄早粉2号的DNA为模板进行PCR扩增；将得到的PCR产物与pMD‑19T克隆载体连接，转化大肠杆菌DH5α，挑取单菌落进行测序；还提供了该基因的应用方法，用于番茄抵御病原菌侵染。本发明方法得到Sly‑miR166b在番茄中瞬时过表达后，植株中Sly‑miR166b的表达量高于野生型植株，其抗晚疫病效果更优，对培育抗晚疫病番茄品种具有重要意义。
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公开(公告)号：CN108588078B
公开(公告)日：2021-09-10
申请号：CN201810430303.5
申请日：2018-05-08
Applicant: 大连理工大学
IPC: C12N15/113 , C12N15/10 , C12N15/84 , A01H5/00 , A01H6/82
Abstract: 本发明提供了一种番茄抗晚疫病外显子环状RNA‑EcircRNA45以及该基因的克隆方法；本发明还提供了上述番茄抗晚疫病外显子环状RNA‑EcircRNA45的应用方法，用于番茄抵御病原菌侵染，即在番茄中过表达所述番茄抗晚疫病外显子环状RNA‑EcircRNA45。本发明首先设计特异的环状RNA引物进行PCR、一代测序实验证实番茄抗晚疫病外显子环状RNA‑EcircRNA45的客观存在；还提供了一种有效检测番茄抗晚疫病外显子环状RNA‑EcircRNA45的特异qRT‑PCR引物，减少了假阳性的存在。藉由本发明外显子环状RNA‑EcircRNA45的过表达，可以实现对番茄晚疫病抗性基因的调控。
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公开(公告)号：CN112210555A
公开(公告)日：2021-01-12
申请号：CN202010984073.4
申请日：2020-09-18
Applicant: 大连理工大学
Abstract: 本发明提供了一种番茄抗晚疫病的基因Sly‑miR166b，其DNA分子序列如SEQ ID NO.1所示；提供了该基因的克隆方法，以野生型感晚疫病番茄早粉2号的DNA为模板进行PCR扩增；将得到的PCR产物与pMD‑19T克隆载体连接，转化大肠杆菌DH5α，挑取单菌落进行测序；还提供了该基因的应用方法，用于番茄抵御病原菌侵染。本发明方法得到Sly‑miR166b在番茄中瞬时过表达后，植株中Sly‑miR166b的表达量高于野生型植株，其抗晚疫病效果更优，对培育抗晚疫病番茄品种具有重要意义。
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