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公开(公告)号：CN113981148A
公开(公告)日：2022-01-28
申请号：CN202111367488.8
申请日：2021-11-18
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心)
IPC: C12Q1/70 , C12Q1/6848 , C12N15/11
Abstract: 本发明涉及生物技术技术领域，具体涉及一种鉴别RV感染以及鉴定病毒基因型的方法及其应用。所述的方法包括：引物设计、病毒核酸提取、病毒核酸反转录、PCR扩增和测序分析。本发明提供的优点：操作简单、检测周期短、费用低且检测敏感性高。有效确定轮状病毒感染以及病毒基因型。方法效率高、重复性好且对于新的基因型可以覆盖。能快速、准确鉴定轮状病毒VP4基因型。
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公开(公告)号：CN108359641B
公开(公告)日：2021-07-09
申请号：CN201810235163.6
申请日：2018-03-21
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心)
Abstract: 本发明公开了一株稳定表达全猪源抗猪流行性腹泻病毒(Porcine Epidemic Diarrhea Virus，PEDV)中和抗体PC10‑IgA的CHO细胞系及其构建方法和应用。所述的细胞系命名为PC10‑IgA‑CHO，保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，其菌种保藏编号为：CGMCC No.15293。此外，本发明还提出了一种由所述的CHO细胞系分泌产生的全猪源抗猪流行性腹泻病毒的PC10‑IgA中和抗体，该中和抗体具有中和PEDV病毒的能力，同时可以与感染Vero‑E6细胞的病毒蛋白结合，具有抗PEDV的生物学活性和功能。通过对该细胞系进行培养，可获得大量的具有抗PEDV作用的PC10‑IgA中和抗体，因此，本发明的提出使治疗性抗PEDV IgA抗体大量的获得和使用成为了可能，为PEDV的预防和治疗提供了新的技术手段。
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公开(公告)号：CN119950692A
公开(公告)日：2025-05-09
申请号：CN202510130934.5
申请日：2025-02-06
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心)
Abstract: 本发明提供了利用猪副流感病毒5型作为表达载体的应用，属于生物疫苗技术领域。本发明利用一株分离自中国江苏省腹泻猪的PIV5毒株，构建出了PIV5病毒感染性克隆。将eGFP基因插入PIV5感染性克隆病毒基因组中，成功拯救出能表达该绿色荧光蛋白的重组PIV5病毒，并发现当eGFP基因插入P/M基因间隔区时，表达量最高，表明外源基因表达盒会影响外源基因的表达水平，P/M基因间隔区是插入外源基因的最佳位点，为利用猪源PIV5开发载体疫苗奠定了坚实基础。利用本发明的猪副流感病毒5型作为表达载体，可以表达外源蛋白，还可以制备口服式疫苗，能够减轻猪在免疫过程中的应激反应。
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公开(公告)号：CN116286679A
公开(公告)日：2023-06-23
申请号：CN202310514420.0
申请日：2023-05-09
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心)
IPC: C12N7/00 , A61K39/215 , A61P31/14 , C12R1/93
Abstract: 本发明公开了一株经分离得到的猪流行性腹泻病毒变异株及其应用。属于生物技术领域。本发明发明人采集辽宁某猪场腹泻仔猪的小肠，将阳性病料接种Vero E6细胞分离病毒并继代，期间进行2次噬斑克隆，并通过RT‑PCR、间接免疫荧光试验和透射电镜鉴定，最终证实成功分离纯化得到一株猪流行性腹泻病毒变异株，命名为LNct2a，保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为：CGMCC No.45224。将本发明分离的PEDV变异株LNct2a株制成灭活疫苗免疫仔猪后，免疫原性和安全性皆十分良好，可产生较高的中和抗体，最高可达1000倍以上。本发明的提出为猪流行性腹泻的防治提供了有效的技术手段。
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公开(公告)号：CN114958918A
公开(公告)日：2022-08-30
申请号：CN202210728853.1
申请日：2022-06-24
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心)
IPC: C12N15/85 , C12N15/65 , C12N15/66 , C12Q1/66 , C12N15/113
Abstract: 本发明提供了一种基于猪NLRP6基因启动子区的双荧光素酶报告基因载体，属于基因工程技术领域，将NLRP6基因启动子连接到pGL3‑Basic质粒中，得到双荧光素酶报告基因载体；所述NLRP6基因启动子的核苷酸序列如SEQ ID No.1或SEQ ID No.2所示。本发明明确了NLRP6基因启动子在NLRP6基因中的具体位置，将NLRP6基因启动子连接到pGL3‑Basic质粒中，得到双荧光素酶报告基因载体具有转录活性。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN112522443A
公开(公告)日：2021-03-19
申请号：CN202011506329.7
申请日：2020-12-18
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心)
IPC: C12Q1/70 , C12Q1/6844 , C12N15/11
Abstract: 本发明提供了一种检测猪急性腹泻综合征冠状病毒的引物组合物和试剂盒以及应用，属于生物技术领域。本发明的目的是解决提高检测猪急性腹泻综合征冠状病毒的准确性、速度、灵敏性和稳定性的技术问题。本发明提供了一种检测猪急性腹泻综合征冠状病毒的引物组合物，所述引物组合物由以下序列组成：FIP引物、BIP引物、F3引物和B3引物，检测的步骤为提取检测样本的RNA，然后进行RT‑LAMP反应，本发明建立的RT‑LAMP检测方法可以用于临床样本的检测，且较普通RT‑PCR更加快速和简便，比RT‑PCR方法的灵敏性高103倍。
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公开(公告)号：CN110468113A
公开(公告)日：2019-11-19
申请号：CN201910728644.5
申请日：2019-08-07
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心)
Abstract: 本发明涉及猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)强毒株的重组及表达。由于不同病毒株之间的序列存在特异性，本发明以TGEV流行强毒株AH为研究对象，以BAC载体pBeloBAC11为基本骨架，构建AH株感染性克隆，在感染性克隆的基础上，构建表达外源基因的重组质粒，获得了重组TGEV-AH病毒。
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公开(公告)号：CN108359641A
公开(公告)日：2018-08-03
申请号：CN201810235163.6
申请日：2018-03-21
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心)
Abstract: 本发明公开了一株稳定表达全猪源抗猪流行性腹泻病毒(Porcine Epidemic Diarrhea Virus，PEDV)中和抗体PC10-IgA的CHO细胞系及其构建方法和应用。所述的细胞系命名为PC10-IgA-CHO，保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，其菌种保藏编号为：CGMCC No.15293。此外，本发明还提出了一种由所述的CHO细胞系分泌产生的全猪源抗猪流行性腹泻病毒的PC10-IgA中和抗体，该中和抗体具有中和PEDV病毒的能力，同时可以与感染Vero-E6细胞的病毒蛋白结合，具有抗PEDV的生物学活性和功能。通过对该细胞系进行培养，可获得大量的具有抗PEDV作用的PC10-IgA中和抗体，因此，本发明的提出使治疗性抗PEDV IgA抗体大量的获得和使用成为了可能，为PEDV的预防和治疗提供了新的技术手段。
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公开(公告)号：CN110468112A
公开(公告)日：2019-11-19
申请号：CN201910728643.0
申请日：2019-08-07
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心)
Abstract: 本发明涉及猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)弱毒株的重组及表达。由于不同病毒株之间的序列存在特异性，本发明以TGEV流行弱毒株H165为研究对象，以BAC载体pBeloBAC11为基本骨架，构建TGEV H165株感染性克隆，在感染性克隆的基础上，构建表达外源基因的重组质粒，获得了重组TGEV-H165病毒。
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公开(公告)号：CN110187097A
公开(公告)日：2019-08-30
申请号：CN201910452755.8
申请日：2019-05-28
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所 , 南京微测生物科技有限公司 , 哈尔滨维科生物技术有限公司
IPC: G01N33/533 , G01N33/569
Abstract: 本发明公开了猪流行性腹泻病毒荧光定量检测试纸条及其制备方法和应用。所述的荧光定量检测试纸条按照连接顺序依次包括样品垫、喷有荧光标记物探针的荧光标记物结合垫、喷涂有检测线T和质控线C的硝酸纤维素膜以及吸水纸，还包括位于下方的塑料底衬、其中塑料底衬的作用是提供组装平台，其中，荧光标记物结合垫上喷涂有PEDV单抗荧光微球标记物和兔IgG荧光微球标记物，所述的硝酸纤维素膜上喷涂有PEDV单抗形成的检测线T以及羊抗兔IgG多抗形成的质控线C。实验证明，本发明的试纸条敏感性比现有的RT-PCR和胶体金试纸条检测方法至少提高10倍，而且对检测样本进行了初步定量，并将检测结果数字化，避免了人的主观性偏差，为早期确诊PEDV提供了技术手段。
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