一种肺炎克雷伯菌外膜囊泡的提取方法

    公开(公告)号:CN117126764A

    公开(公告)日:2023-11-28

    申请号:CN202310714730.7

    申请日:2023-06-16

    Abstract: 本发明涉及一种肺炎克雷伯菌外膜囊泡的提取方法,包括如下步骤:S1、单菌落摇菌过夜;S2、1:100接种培养肺炎克雷伯菌菌液,37℃摇床6‑8小时,监测菌液OD600nm达到1.0;S3、低速离心,回收上清:菌液以11000×g离心,4℃,20分钟,上清11000×g离心,4℃,20分钟离心一次;S4、中速离心,回收上清:上清13000×g离心,4℃,20分钟离心一次;S5、回收上清,用PVDF膜滤器进行过滤2次;S6、超高速离心粗提外膜囊泡:将过滤的上清转移到超离心管中,使用T70i rotor转子,150,000×g,4℃,1.5h,弃去上清;S7、密度梯度离心提纯外膜囊泡:超离管中加入不连续密度梯度OptiPrep,使用SW40 Tirotor转子,4°C,150000×g,16小时,弃去上清。本发明的方法实现了蔗糖垫超高速离心提取高纯度和高产量肺炎克雷伯菌OMVs。

    一种快速检测院感病原菌的试剂盒和制备方法

    公开(公告)号:CN114994004A

    公开(公告)日:2022-09-02

    申请号:CN202210542509.3

    申请日:2022-05-18

    Abstract: 本发明公开了一种快速检测院感病原菌的试剂盒和制备方法。属于生物技术领域。包括:AMBs;SA‑QBs;Bio‑Amp。本发明通过将耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)的特异性抗体与磁珠偶连,形成具有富集作用的功能化免疫磁性纳米材料(AMBs),并利用SA‑QBs、Bio‑Amp构建荧光信号探针(Amp‑bio‑SA‑QBs)。当MRSA不存在时,AMBs与荧光信号探针独立存在。当MRSA存在时,由于抗体、青霉素对待测物的双重识别效果,形成AMBs~MRSA~Amp‑bio‑SA‑QBs复合物,经磁分离后,复合物在980nm近红外光激发下,产生荧光信号,因此,基于此原理实现了院感病原菌快速高效检测的目的。

    一种负载纳米银和生物活性因子的医用敷料及其制备方法

    公开(公告)号:CN110478517A

    公开(公告)日:2019-11-22

    申请号:CN201910739892.X

    申请日:2019-08-12

    Abstract: 本发明涉及一种慢性创面敷料的制备方法,具体是一种一种负载纳米银和生物活性因子的医用敷料及其制备方法。敷料包括海藻酸钙、壳聚糖或壳聚糖衍生物为基质,负载纳米银抑菌组合物颗粒和生长因子EGF。制备中向氯化钙溶液滴加混有生长因子的海藻酸钠溶液中得到包裹生长因子的海藻酸钙核心微球。将微球加入到壳聚糖醋酸溶液形成聚电解质复合物。再将聚电解质复合物和纳米银、壳聚糖混合搅拌,加入到海藻酸钠中进行交联,冷冻干燥,最终形成负载纳米银和生长因子的慢性创面敷料。本发明方法原料廉价易得、制备过程稳定,慢性创面敷料抑菌性能良好,创面修复能力优良,用于癌症放射治疗及糖尿病、缺血等引起的各类慢性创面的治疗,诱导创面清洗修复。

    一种针对头孢他啶阿维巴坦纸片法灰区的耐药性检查方法

    公开(公告)号:CN119220633A

    公开(公告)日:2024-12-31

    申请号:CN202411751552.6

    申请日:2024-12-02

    Abstract: 本发明公开了一种针对头孢他啶阿维巴坦纸片法灰区的耐药性检查方法,采用肉汤纸片洗脱法配制不同浓度的头孢他啶阿维巴坦药敏溶液:最终分别得到6/4μg/ml浓度组、8/4μg/ml浓度组、12/4μg/ml浓度组、16/4μg/ml浓度组、18/4μg/ml浓度组,以CAMHB作为生长对照组;然后进行接种物配制、孵育、结果观察判断是否为耐药。本发明通过两种不同的药敏纸片组合进行,以高低浓度按一定比例混合调配来达到头孢他啶阿维巴坦药敏试验MIC法折点所需的浓度,作为CZA纸片法的抑菌圈直径灰区(20‑22mm)的一种补充验证方法。

    一种磁珠富集金黄色葡萄球菌的方法

    公开(公告)号:CN114774508A

    公开(公告)日:2022-07-22

    申请号:CN202210542730.9

    申请日:2022-05-18

    Abstract: 本发明公开了一种磁珠富集金黄色葡萄球菌的方法,属于生物技术领域。包括磁性纳米粒子洗涤后重悬;活化磁性纳米粒子,得活化后磁性纳米粒子;使用聚氧乙烯二胺与活化后磁性纳米粒子反应,得聚氧乙烯二胺修饰的磁性纳米粒子复合物;使用戊二醛与聚氧乙烯二胺修饰的磁性纳米粒子复合物反应,得物质A;使用头孢吡肟与物质A反应,得聚氧乙烯二胺介导的头孢吡肟功能化磁性纳米粒子复合物;富集捕获。本发明采用聚氧乙烯二胺作为介导物能减少空间位阻,采用头孢吡肟作为识别元件可提高与细菌之间的结合力,采用结合比表面积大的纳米级磁珠可提高识别元件的负载量,进而提高细菌的捕获效率。与传统的方法相比,孵育时间短,耗材少,成本低,适应性广。

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