一种用于肝细胞培养的无血清培养基

    公开(公告)号:CN102311938A

    公开(公告)日:2012-01-11

    申请号:CN201110276700.X

    申请日:2011-09-16

    Abstract: 本发明公开了一种用于肝细胞培养的无血清培养基,其包含基础培养基和添加组分。其中,所述添加组分包括:胰岛素0.1~10μg/mL、转铁蛋白0.5~10μg/mL、亚硒酸钠5~10μg/L、表皮生长因子1~100ng/mL、肝细胞生长因子1~100ng/mL、纤粘连蛋白0.1~1μg/mL、地塞米松0.1~10nmol/mL和胰高血糖素0.05~5μg/mL。本发明所提供的无血清培养基不含有胎牛血清及不含任何动物来源成份,能提供细胞生长增值所需的充足营养与良好环境,各添加组份能通过各种机制在肝细胞培养过程中有效地代替血清成分,细胞生长良好,细胞形态、密度、活力、功能与含血清培养基基本相同。

    人原代肝细胞分离培养方法

    公开(公告)号:CN102061284A

    公开(公告)日:2011-05-18

    申请号:CN201010205227.1

    申请日:2010-06-13

    Abstract: 本发明提供了一种人原代肝细胞分离培养方法,包括以下步骤:用D-Hank’s液清洗肝组织表面血块,并将结缔组织剪除;用针头注射器多点穿刺灌注预温38℃的前灌流液,使肝组织块由暗红色变为灰白色且流出的前灌流液变清亮;继以预温的II型胶原酶溶液针头多点穿刺灌注,直至组织块变疏松、失去弹性,表面呈龟背状裂隙,II型胶原酶溶液可循环使用;剪开组织块,钝性分离肝组织,并去除残存的包膜和纤维结缔组织,然后继续在II型胶原酶溶液中37℃震荡消化;将消化物吹打为细胞悬液,在冰浴条件下,过滤,收集过滤后的肝细胞悬液,移至离心管中,低速离心;第一次低速离心所得底层沉淀加入红细胞裂解液,吹打,室温静置后加入DMEM混匀清洗、低速离心,再加入DMEM混匀、低速离心重复2-4次,最后一次低速离心所得沉淀加入Williams’Medium E完全培养基悬浮;调整肝细胞密度为1×105/ml,接种于铺有鼠原胶原的培养瓶中,于CO2培养箱中37℃恒温培养,贴壁后,换液除去死亡及未贴壁细胞,继续培养。本发明建立的人原代肝细胞培养模型简便易行,成本低。

    一种肝细胞的体外三维培养方法

    公开(公告)号:CN106554937A

    公开(公告)日:2017-04-05

    申请号:CN201610951267.8

    申请日:2016-10-26

    Abstract: 本发明公开一种细胞聚球培养基质,其包括培养区和连接在所述培养区外周的围挡;所述培养区设有若干下半部分为球缺形腔体的聚球孔。还公开一种基质模具,包括相互嵌套以形成细胞聚球培养基质灌注成型腔的板状的第一模板和第二模板;所述第一模板内设有凸台和邻近所述凸台周向设置的凹槽,所述凸台表面设有若干上半部分为球缺体的凸点;所述第二模板开设有与所述凹槽外侧槽壁的外轮廓配合的通孔。还公开一种利用所述细胞聚球培养基质进行动物细胞体外三维聚球培养的方法。本发明肝细胞的体外三维培养方法成本较低、规模可控、工序简单,培养效果大大优于二维平板培养。

    体外肝细胞异质性培养装置及其培养方法

    公开(公告)号:CN106497788A

    公开(公告)日:2017-03-15

    申请号:CN201611067530.3

    申请日:2016-11-28

    Abstract: 本发明提供一种体外肝细胞异质性培养装置,包括诱导芯片和与所述诱导芯片相连通的微量注射泵;所述诱导芯片包括用于形成浓度梯度的流体分流通道以及与所述流体分流通道相通的细胞诱导区域;还提供一种体外肝细胞异质性培养方法,采用所述的体外肝细胞异质性培养装置;将肝细胞悬液加入到所述细胞诱导区域并等待所述肝细胞贴壁生长;从所述流体分流通道持续匀速通入不同浓度或不同成分的诱导液,以便诱导形成异质性分布的肝细胞。通过本方案可实现体外诱导体外肝细胞异质性分布。

    生物人工肝用往返翻转灌流型生物反应器及其处理方法

    公开(公告)号:CN102091360B

    公开(公告)日:2012-08-29

    申请号:CN201110021074.X

    申请日:2011-01-18

    Abstract: 本发明公开一种生物反应容器,其包括圆柱形的容器体,所述容器体圆周侧壁的上端和下端分别设有液体进口,所述容器体的两个端部分别设有液体出口。所述容器体内的液体进口处设有一个压力缓冲环,所述容器体内两端部的液体出口处分别设细胞筛网。本发明还提供一种包括有所述生物反应容器的生物人工肝用往返翻转灌流型生物反应器及其处理方法。本发明的有益之处在于:微载体上培养的肝细胞能够均匀的分布在整个生物反应容器内部,在往返运动中对肝细胞损伤小,肝衰竭血浆能够充分接触,有效的避免灌流死腔和无效灌流,能够高效的对血浆进行解毒、并且操作简单、成本低、功效强,能够最大限度的发挥生物人工肝的治疗作用。

    一种治疗肝脏移植排斥反应的悬液及其制备方法

    公开(公告)号:CN1943785A

    公开(公告)日:2007-04-11

    申请号:CN200610122811.4

    申请日:2006-10-17

    Abstract: 本发明提供了一种治疗肝脏移植排斥反应的悬液,该悬液包含受体骨髓间充质干细胞和缓冲液,还包含受体骨髓造血干细胞。本发明所述的悬液的制备方法是先从受体骨髓中分离得到的受体骨髓间充质干细胞和受体骨髓造血干细胞,再将受体骨髓间充质干细胞调制成细胞浓度为0.25~1×106个/ml得到,或者再将所制得两种干细胞分别调制成细胞浓度为0.25~1×106个/ml的悬液后再按1∶1的比例混合制得。本发明所述的治疗肝脏移植排斥反应的悬液,由于其中骨髓干细胞取自受体本身,因此不仅能有效治疗肝脏移植排斥反应,而且安全性极高,几乎没有不良反应,更无外源性污染和疾病传播问题。

    一种肝胆引流冲洗装置
    19.
    发明公开

    公开(公告)号:CN116832237A

    公开(公告)日:2023-10-03

    申请号:CN202310967889.X

    申请日:2023-08-02

    Inventor: 何国林 张志

    Abstract: 本发明属于医疗器械技术领域,并公开了一种肝胆引流冲洗装置,包括:底座、针管、引流机构、冲洗机构、消毒机构、风干机构和控制器;其中,所述引流机构和所述风干机构均与所述控制器连接,所述引流机构、冲洗机构、消毒机构、风干机构和所述控制器均设置于所述底座上方;所述底座上还设置有支架,所述针管设置于所述支架上方,所述针管中设置有破碎机构,所述冲洗机构通过管道连接装置与所述消毒机构连接,所述风干机构、引流机构和所述管道连接装置均通过单向阀与所述针管连接。本发明所述技术方案能够实现冲洗、防堵塞与引流一体化以及消毒风干一体化,更加方便医生的操作和病人的治疗。

    制备全肝脏生物支架的试剂盒及全肝脏生物支架制备方法

    公开(公告)号:CN103751843B

    公开(公告)日:2015-09-16

    申请号:CN201310651684.7

    申请日:2013-12-05

    Abstract: 本发明公开了一种制备全肝脏生物支架的试剂盒,包括灌注液Ⅰ和灌注液Ⅱ,其中,灌注液Ⅰ包括0.2g/L EDTA、25000U/L肝素钠及磷酸缓冲液,灌注液Ⅱ包括2.5g/L十二烷基硫酸钠。利用本试剂盒的灌注液来制备全肝脏生物支架,具体为灌注液Ⅰ以15ml/min的灌注流速经离体肝脏的门静脉对离体肝脏进行灌注,灌注液Ⅱ以3ml/min的灌注流速经离体肝脏的门静脉对离体肝脏进行灌注。通过上述试剂盒和方法,能够降低十二烷基硫酸钠与全肝脏生物支架的接触时间,使制备的全肝脏生物支架最大程度的保留肝脏细胞外基质成分,并可完全去除肝脏细胞。

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