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公开(公告)号:CN1877328A
公开(公告)日:2006-12-13
申请号:CN200610014764.1
申请日:2006-07-12
Applicant: 南开大学 , 中华人民共和国天津出入境检验检疫局
Abstract: 本发明公开了一种用23S核糖体基因探针阵列检验多种能够导致水生动物传染病病原菌的方法,其技术原理为分子杂交——酶联免疫显色技术,属于细菌检测技术,其技术方案是用生物信息学方法设计特异性探针,包括设计筛选的34条用作探针的寡核苷酸序列以及与之配套的PCR和杂交反应条件。通过PCR扩增并用地高辛标记细菌23srRNA基因内部分序列,并用该PCR产物和一组特异性的寡核苷酸探针杂交,经酶联免疫显色显色后,可以从待测样品中,精确检测出是否存在水生动物传染病病原菌。该方法的优点是,省去了重复的细菌培养筛选环节,节约时间;分子杂交鉴定方法不受培养条件和细菌生理状态的影响,较生理生化鉴定方法更为准确。
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公开(公告)号:CN1877327A
公开(公告)日:2006-12-13
申请号:CN200610014761.8
申请日:2006-07-12
Applicant: 南开大学 , 中华人民共和国天津出入境检验检疫局
Abstract: 本发明公开了一种利用核糖体操纵子间区探针组成寡核苷酸微阵列检验多种能够导致水生动物传染病病原菌的方法,其技术原理为分子杂交——酶联免疫显色技术,属于细菌检测技术,其技术方案是用生物信息学方法设计特异性探针,包括设计筛选的34条用作探针的寡核苷酸序列以及与之配套的PCR和杂交反应条件。通过PCR扩增并用地高辛标记细菌16s-23srRNA基因间区序列,并用该PCR产物和一组特异性的寡核苷酸探针杂交,经酶联免疫显色显色后,可以从待测样品中,精确检测出是否存在水生动物传染病病原菌。该方法的优点是,省去了重复的细菌培养筛选环节,节约时间;分子杂交鉴定方法不受培养条件和细菌生理状态的影响,较生理生化鉴定方法更为准确。
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公开(公告)号:CN1877297A
公开(公告)日:2006-12-13
申请号:CN200610014762.2
申请日:2006-07-12
Applicant: 南开大学
Abstract: 本发明涉及一种多杀巴斯德氏菌PCR快速检测试剂盒和检测方法。属于兽医学和水产学诊断技术领域,主要技术方案是利用PCR技术特异性扩增16S-23S核糖体RNA转录间区,达到区分多杀巴斯德氏菌(Pasteurella multocida)和相近致病菌的目的,并且能够排除一些用传统的生化鉴定难以排除的与多杀巴斯德氏菌相近的几个致病菌。该方法与传统方法相比能够大大提高兽医临床诊断多杀巴斯德氏菌的效率,缩短诊断时间,准确度更高,节省劳动力和成本。
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公开(公告)号:CN1215177C
公开(公告)日:2005-08-17
申请号:CN02129314.7
申请日:2002-08-30
Applicant: 南开大学 , 天津南开基因工程有限公司
IPC: C12Q1/68
Abstract: 本发明涉及医学体外诊断技术,具体地讲是一种基因芯片。它是在尼龙膜上设置包括有鉴定细菌的种,属特异性的探针,还包括由此衍生的探针以及每种探针的互补探针或它们的变体。特异性探针可以鉴定包括:流感嗜血杆菌、肺炎克雷伯菌、铜绿假单胞菌、肺炎链球菌、金黄色葡萄球菌、甲型副伤寒沙门氏菌、脑膜炎奈瑟氏菌等至少40细菌,还包括有革兰氏阴性细菌通用探针、细菌通用探针以及假丝酵母探针。基于基因探针构成的基因芯片检测法比较快速、准确,可以用于临床微生物实验室中进行常规诊断,可用于提高微生物感染诊断的速度和准确度,因此可以达到更有效的治疗。
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公开(公告)号:CN101608243A
公开(公告)日:2009-12-23
申请号:CN200910069251.4
申请日:2009-06-15
Applicant: 南开大学
IPC: C12Q1/70 , C12Q1/68 , G01N21/78 , G01N27/447 , C12R1/93
Abstract: 本发明涉及一种用环介导等温扩增技术检测海水淋巴囊肿病毒的方法,属于水体病原体污染检测领域。主要技术方案是利用LAMP技术,针对淋巴囊肿病毒的主要衣壳蛋白基因,设计七条高特异性引物,并通过过滤浓缩水样富集病毒,达到高效特异性检测水样中淋巴囊肿病毒的目的。与传统方法相比,该方法所需设备和操作步骤简单,特异性强,操作方便,设备简单,可以快速、准确地鉴定特异的目标病原体。它用环介导等温扩增方法扩增病毒特异性靶基因,避免了冗长的一系列生化反应,节约时间、劳动力和成本。LAMP鉴定方法不受病毒生理状态的影响,较生理生化鉴定方法更为准确。
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公开(公告)号:CN101348835A
公开(公告)日:2009-01-21
申请号:CN200810151271.1
申请日:2008-09-09
Applicant: 南开大学
CPC classification number: Y02A50/451
Abstract: 本发明涉及一种利用环介导等温扩增(LAMP)技术检测创伤弧菌(Vibrio vulnificus)的试剂盒和检测方法,属于病原菌诊断领域。主要技术方案是利用LAMP技术,针对创伤弧菌毒性相关基因(virulence-correlated gene)的六个区域,设计四条高特异性引物,达到特异性检测创伤弧菌的目的。与传统方法相比,该方法所需设备和操作步骤简单,而且具有快速,高特异性,稳定性强以及灵敏度高等优点,检测成本较低,适合普通诊所和野外检验。
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公开(公告)号:CN101235411A
公开(公告)日:2008-08-06
申请号:CN200810052321.0
申请日:2008-02-26
Applicant: 南开大学
Abstract: 本发明涉及一种利用环介导等温扩增(LAMP)技术检测豚鼠气单胞菌(Aeromonas caviae)的试剂盒和检测方法,属于病原菌诊断领域。主要技术方案是利用LAMP技术,针对16S和23S核糖体RNA基因转录间区的六个区域,设计四对高特异性引物,达到特异性检测豚鼠气单胞菌的目的。与传统方法相比,该方法所需设备和操作步骤简单,而且具有快速和高特异性优点,检测成本较低,适合普通诊所和野外检验。
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公开(公告)号:CN100372946C
公开(公告)日:2008-03-05
申请号:CN200510014860.1
申请日:2005-08-25
Applicant: 南开大学
IPC: C12Q1/68
Abstract: 本发明公开了一种利用正反义探针共杂交技术提高基因芯片检测效率的方法,属于核酸分子杂交技术领域。其技术方案是通过设计两条能够和目的基因的核酸双链分别杂交的探针,形成稳定的探针一目的基因杂交产物,促进杂交反应向形成产物的方向进行,大幅度提高杂交信号的强度。应用该方法设计的正反义探针所制备的杂交膜,可以大大提高探针与目的基因的结合效率。在相同条件下,与常规的单探针杂交相比,检测目的基因的灵敏度提高50倍。该方法可应用于高灵敏度基因检测芯片的制备和所有核酸杂交实验。
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公开(公告)号:CN101113473A
公开(公告)日:2008-01-30
申请号:CN200710057580.8
申请日:2007-06-07
Applicant: 天津出入境检验检疫局动植物与食品检测中心 , 南开大学
CPC classification number: Y02A50/451 , Y02A50/52
Abstract: 本发明公开了一种运用复合荧光PCR技术检测食源性致病弧菌的方法,属于细菌检验技术领域,主要的技术方案是设计了引物组序列。致病弧菌是食品中常见的致病菌,感染弧菌后影响十分严重。快速、准确的检测食品中的致病弧菌是有效预防和控制病原菌感染的重要条件。需要检测的食源性致病弧菌主要包括以下几种:副溶血弧菌、霍乱弧菌、创伤弧菌。针对上述目标菌,本发明克服了现有技术中的缺点,提供一种运用复合荧光PCR技术快速低成本的检测副溶血弧菌、霍乱弧菌、创伤弧菌的方法。该方法可以使用一管PCR反应,能够初筛出上述几种病原微生物。
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公开(公告)号:CN1316039C
公开(公告)日:2007-05-16
申请号:CN200410072707.X
申请日:2004-11-11
Applicant: 南开大学 , 中华人民共和国天津出入境检验检疫局
IPC: C12Q1/68
CPC classification number: Y02A50/451
Abstract: 本发明公开了一种运用PCR技术检测坂崎肠杆菌(Enterobacter sakazakii)的方法,属于细菌检验技术,特别是运用PCR反应来检测致病细菌的技术。其技术方案是利用新发现的坂崎肠杆菌种特异性DNA序列,用生物信息学方法设计特异性引物,用PCR方法直接从样本中扩增细菌靶基因。本发明包括新发现的坂崎肠杆菌种特异性DNA序列和由此设计筛选的PCR引物的四条寡核苷酸序列以及与之配套的PCR反应条件。本发明解决了从食品和临床样本中检测坂崎肠杆菌的标准方法的问题。它用PCR的方法扩增细菌靶基因,省去了细菌培养筛选环节,节约时间;而且不受培养条件和细菌生理状态的影响,较生理生化鉴定方法更为准确。
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