公开(公告)号：CN109988864A

公开(公告)日：2019-07-09

申请号：CN201910410222.3

申请日：2019-05-15

Applicant: 南京林业大学

Inventor： 戴婷婷 ,  焦彬彬 ,  胡涛 ,  徐月

IPC: C12Q1/6895 ,  C12Q1/6844 ,  C12Q1/04 ,  C12N15/11 ,  C12R1/645

Abstract: 本发明公开了一种RPA‑LFD技术检测雪松疫霉的引物和探针组合及其应用方法。采用所述引物及探针组合检测雪松疫霉的具体方法为：1)提取待测样本DNA；2)以DNA为模板，进行RPA扩增；3)应用LFD进行扩增产物检测；当试纸条出现两条棕色条带，一条位于质控区内，一条位于检测区，则结果为阳性，表明样本中含有雪松疫霉；当试纸条只有质控区出现一条棕色条带，检测区没有条带，则结果是阴性，表明样本中不含有雪松疫霉。本发明所提供的引物及探针组合RPA扩增效果好，条带特异性强、灵敏度高，为雪松疫霉的检测提供了新的技术手段。

公开(公告)号：CN109988860A

公开(公告)日：2019-07-09

申请号：CN201910194831.X

申请日：2019-03-14

Applicant: 南京林业大学

Inventor： 戴婷婷 ,  焦彬彬 ,  胡涛 ,  徐月 ,  廖婷婷 ,  田雯

IPC: C12Q1/6895 ,  C12Q1/6844 ,  C12Q1/04 ,  C12N15/11 ,  C12R1/645

Abstract: 本发明公开了一种用于检测冬生疫霉的引物及探针组合物及其试剂盒和检测方法，该引物和探针序列为：RPA‑PSYPT‑F：5'‑TTCCACCCTTCCACCAGACTGCTGAGGAGG‑3'，RPA‑PSYPT‑R：5’‑[Biotin]TGTTAGCTGCGTGTTCGTTGGTCACCCCAGA‑3’，SYPT‑P：5’‑[FAM]CTTCTGTGATTTATCCAGAAAATCCGTACGAT‑THE‑GAGCTGGACGGCAAGA[C3‑spacer]‑3’。本发明所使用的引物探针组RPA扩增效果好，条带特异性强，与其他病菌无交叉反应，在检测区的有阳性反应，增加了检测的灵敏性。

公开(公告)号：CN109943624A

公开(公告)日：2019-06-28

申请号：CN201910194830.5

申请日：2019-03-14

Applicant: 南京林业大学

Inventor： 戴婷婷 ,  焦彬彬 ,  胡涛 ,  徐月 ,  廖婷婷 ,  田雯

IPC: C12Q1/6844 ,  C12Q1/6895 ,  C12Q1/04 ,  C12N15/11 ,  C12R1/645

Abstract: 本发明公开了一种基于RPA-侧流层析技术检测大豆疫霉的方法及其专用引物及探针组合，该方法包括1)提取待测样本DNA；2)以DNA为模板，进行RPA扩增；3)应用侧流层析试纸条进行扩增产物检测；当试纸条出现两条棕色条带，一条位于质控区内，一条位于检测区，则结果为阳性，表明样本中含有大豆疫霉；当试纸条只有质控区出现一条棕色条带，检测区没有条带，则结果是阴性，表明样本中不含有大豆疫霉。本发明所使用的引物探针组RPA扩增效果好，条带特异性强，与其他病菌无交叉反应，在检测区的有阳性反应，增加了检测的灵敏性，为检疫性疫霉菌的检测提供了新的技术平台，同时在病害侵染初期鉴定出病原物，能够对出入境大豆中的大豆疫霉进行检测。