公开(公告)号：CN115844879A

公开(公告)日：2023-03-28

申请号：CN202310168493.9

申请日：2023-02-27

Applicant: 三亚南京农业大学研究院 ,  南京农业大学

Inventor： 粟硕 ,  任文凯 ,  王宁宁 ,  王宇彤 ,  吴伊凡 ,  翟小凤

IPC: A61K31/4045 ,  A61P31/14

Abstract: 本发明属于生物医药技术领域，尤其涉及褪黑素在抗盖塔病毒中的应用；本发明公开的褪黑素在抗盖塔病毒中的应用，其作用机制为褪黑素抑制病毒的复制过程。本发明首次发现褪黑素在胞内水平上具有抑制盖塔病毒的作用，并且将褪黑素抑制盖塔病毒的作用时间明确到病毒感染后的前4小时，为临床应用褪黑素抵抗盖塔病毒感染提供了理论基础；而且褪黑素具有价格低廉、低毒性、便于运输贮存等优点；这开拓了褪黑素在抗病毒防治方向的新领域，从而为新型抗甲病毒药物的开发提供新的思路和方向。

公开(公告)号：CN118667772B

公开(公告)日：2025-03-21

申请号：CN202411154639.5

申请日：2024-08-22

Applicant: 南京农业大学三亚研究院 ,  因卓生物技术(上海)有限公司

Inventor： 粟硕 ,  李东艳 ,  邢刚 ,  姜智文 ,  朱梦梦

IPC: C12N7/00 ,  A61K39/15 ,  A61P31/14 ,  G01N33/569 ,  G01N33/68 ,  C12R1/93

Abstract: 本发明公开了一株G9P[23]基因型猪轮状病毒毒株及其应用；所述G9P[23]基因型猪轮状病毒从广东省某猪场的仔猪腹泻样品中分离传代获得，命名为RVA/pig/CH/U945/2022/G9P[23]，保藏编号为CCTCC NO:V202454。该分离毒株能够在MA104细胞稳定增殖，产生典型细胞病变。本发明分离到的G9P[23]基因型猪轮状病毒毒株，可用于检验用毒种以及灭活疫苗的制备，作为疫苗株具有良好的免疫原性，免疫动物后能产生较高水平的抗体，为后续轮状病毒疫苗的研制与开发提供必要的物质和理论基础。

公开(公告)号：CN118127077B

公开(公告)日：2024-07-16

申请号：CN202410557841.6

申请日：2024-05-08

Applicant: 南京农业大学三亚研究院 ,  因卓生物技术(上海)有限公司

Inventor： 粟硕 ,  姜智文 ,  邢刚 ,  秦颖

IPC: C12N15/85 ,  C12N15/40 ,  C12N7/04 ,  C12N15/66 ,  A61K39/12 ,  A61P31/14

Abstract: 本发明公开了一种基于盖塔病毒骨架的嵌合甲病毒制备方法和应用；本发明先公开一种质粒载体，所述质粒载体以含有盖塔病毒基因组的感染性cDNA克隆为骨架质粒，再通过如下（A1）或（A2）任一方式进行构建：（A1）将盖塔病毒的ORF2基因序列替换成其他甲病毒ORF2基因；（A2）保留盖塔病毒Cap基因前123位氨基酸序列，而其余盖塔病毒ORF2基因序列替换为去除Cap基因N端前102~123位氨基酸的其他甲病毒ORF2基因序列。本发明还公开了前述基础上的嵌合甲病毒的制备方法、所述制备方法获得的嵌合甲病毒减毒株。所述嵌合甲病毒对小鼠的毒力显著减弱，不引起死亡及严重的体重下降，但保持了良好的免疫原性。

公开(公告)号：CN111763766B

公开(公告)日：2022-12-27

申请号：CN202010290281.4

申请日：2020-04-14

Applicant: 南京农业大学

Inventor： 粟硕 ,  王茹怡 ,  张文艳 ,  潘中洲 ,  李改茹

IPC: C12Q1/70 ,  C12Q1/6851 ,  C12N15/11

Abstract: 本申请公开一步法检测犬腹泻病毒的引物对、TaqMan探针及方法与应用，从引物探针的特异性、反应体系的关键因子、质控构建等多个方面对多重荧光PCR进行了探索研究，以待检样品的核酸或反转录产物扩增检测片段并连接pMD18‑T载体，成功构建质粒作为模板，建立了犬细小病毒，犬冠状病毒，犬星状病毒，犬库布病毒多重实时荧光定量PCR方法，该专利允许在一个反应管中最多同时检测出4种能够导致犬腹泻的病毒，其检测灵敏度达到1×102个拷贝明显提高了四种犬腹泻病毒检测的灵敏性和特异性，而且有效的缩短了其检测周期，具有重要意义。

公开(公告)号：CN114807437A

公开(公告)日：2022-07-29

申请号：CN202210359161.4

申请日：2022-04-06

Applicant: 南京农业大学

Inventor： 粟硕 ,  张乐天 ,  姜智文 ,  周子彤 ,  孙久萌 ,  盛守志

IPC: C12Q1/70 ,  C12Q1/686 ,  C12N15/11

Abstract: 本发明公开了一种用于检测猪流行性腹泻病毒和猪轮状病毒的四重荧光定量PCR检测试剂盒及其应用，该试剂盒包括热启动Taq DNA聚合酶、无酶水、PCR反应液、探针法荧光定量PCR配套Buffer，以及用于检测G1基因型猪流行性腹泻病毒、G2基因型猪流行性腹泻病毒、猪A群轮状病毒、猪C群轮状病毒的四对特异性引物和相应的TaqMan探针及对照品。本发明的试剂盒实现了在一个PCR反应管中同时检测四种能够引起猪腹泻的病毒，并具有极佳的特异性和重复性，可直接应用于猪临床腹泻样品的常规实验室诊断，为猪流行性腹泻病毒和猪轮状病毒的流行病学研究提供快速、准确的检测方法。

公开(公告)号：CN111763766A

公开(公告)日：2020-10-13

申请号：CN202010290281.4

申请日：2020-04-14

Applicant: 南京农业大学

Inventor： 粟硕 ,  王茹怡 ,  张文艳 ,  潘中洲 ,  李改茹

IPC: C12Q1/70 ,  C12Q1/6851 ,  C12N15/11

Abstract: 本申请公开一步法检测犬腹泻病毒的引物对、TaqMan探针及方法与应用，从引物探针的特异性、反应体系的关键因子、质控构建等多个方面对多重荧光PCR进行了探索研究，以待检样品的核酸或反转录产物扩增检测片段并连接pMD18-T载体，成功构建质粒作为模板，建立了犬细小病毒，犬冠状病毒，犬星状病毒，犬库布病毒多重实时荧光定量PCR方法，该专利允许在一个反应管中最多同时检测出4种能够导致犬腹泻的病毒，其检测灵敏度达到1×102个拷贝明显提高了四种犬腹泻病毒检测的灵敏性和特异性，而且有效的缩短了其检测周期，具有重要意义。

公开(公告)号：CN111187859A

公开(公告)日：2020-05-22

申请号：CN202010104535.9

申请日：2020-02-20

Applicant: 南京农业大学

Inventor： 粟硕 ,  张乐天 ,  潘中洲 ,  王宁宁 ,  何婉婷 ,  鄢梓晴 ,  高琪

IPC: C12Q1/70 ,  C12Q1/6851 ,  C12N15/11

Abstract: 本发明公开了一种用于检测丙型流感病毒（Influenza C virus,ICV）和丁型流感病毒（Influenza D virus,IDV）的双重TaqMan探针qPCR检测方法。具体地，针对丙型流感病毒和丁型流感病毒计了特异性引物和TaqMan探针，实现了在一个PCR反应管中同时检测丙型流感病毒和丁型流感病毒。本发明可以检测最低浓度为1×101 copies/μL的ICV、IDV阳性样品，同时具有极佳的特异性和重复性，为这两种流感病毒的检测提供了一种简便、高效和经济的方法。

公开(公告)号：CN106435024B

公开(公告)日：2020-02-14

申请号：CN201610850592.5

申请日：2016-09-26

Applicant: 南京农业大学

Inventor： 周继勇 ,  闫丽萍 ,  刘俊丽 ,  雷静 ,  粟硕 ,  胡伯里

IPC: C12Q1/70 ,  C12Q1/6851 ,  C12N15/11 ,  C12R1/93

Abstract: 本发明提供了检测H5、H7和H9亚型流感病毒的多重荧光定量PCR引物和探针，所述引物结合探针能采用多重荧光定量PCR同时检测H5、H7和H9亚型流感病毒具体为哪种亚型，不同亚型的引物之间互相没有影响，并且特异性强，检测灵敏度为10～50拷贝数，对靶序列可以准确定量、定性检测，重复性好，可信度高。本发明提供的一种同时检测H5、H7和H9亚型流感病毒的多重荧光定量PCR试剂盒，所述试剂盒检测灵敏度为10～50拷贝数，敏感度高，特异性强。本申请还提供检测方法具有良好的稳定性；采用基因融合的质粒做阳性标准品，避免多次更换阳性标准品的繁琐操作，大大缩短检测时间和检测次数，样品可在2小时内完成检测。

公开(公告)号：CN110512027A

公开(公告)日：2019-11-29

申请号：CN201910794842.1

申请日：2019-08-27

Applicant: 南京农业大学

Inventor： 粟硕 ,  张骋 ,  潘中洲 ,  贺微 ,  翟晓凤

IPC: C12Q1/70 ,  C12Q1/686 ,  C12N15/11 ,  C12R1/93

Abstract: 本申请公开了猪病毒性腹泻病病原的五重RT-PCR检测方法，其中5对引物分别为猪德尔塔冠状病毒（又名猪丁型冠状病毒）的检测引物、猪凸隆病毒的检测引物、猪流行性腹泻病毒的检测引物、猪急性腹泻综合征冠状病毒的检测引物、传染性胃肠炎病毒的检测引物。以待检样品的核酸或反转录产物作为模板，采用2×Taq Plus Master Mix，使用本申请中的5对引物对进行PCR扩增。该专利允许在一个PCR反应管中最多同时检测出5种能够导致猪群腹泻的病毒，其检测灵敏度达到初始模板浓度为每微升1×103个拷贝（1×103 copies/μL），并具有极佳的特异性和重复性，可以直接应用到临床样品检测中。

公开(公告)号：CN119215160B

公开(公告)日：2025-03-11

申请号：CN202411775390.X

申请日：2024-12-05

Applicant: 南京农业大学三亚研究院 ,  因卓生物技术(上海)有限公司

Inventor： 粟硕 ,  李东艳 ,  邢刚 ,  姜智文 ,  朱梦梦

IPC: A61K39/15 ,  A61K39/39 ,  A61P31/14

Abstract: 本发明公开了一种猪A群轮状病毒DNA疫苗及其应用。所述DNA疫苗由含有G5基因型VP7蛋白基因序列的真核表达质粒、含有G9基因型VP7蛋白基因序列的真核表达质粒、含有P[23]基因型VP4蛋白基因序列的真核表达质粒与TNFα佐剂构成，所述G5基因型VP7蛋白基因序列如SEQ ID NO:1所示，所述含有G9基因型VP7蛋白基因序列如SEQ ID NO:2所示，所述P[23]基因型VP4蛋白基因序列如P[23]基因型VP4蛋白基因序列如SEQ ID NO:3所示，所述TNFα基因序列如SEQ ID NO:4所示。采用本发明制备的DNA疫苗能够引起显著的体液免疫和细胞免疫，具有广阔的应用前景。