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    一种基因缺失的无毒猪痘病毒及其应用
    11.
    发明授权
    一种基因缺失的无毒猪痘病毒及其应用 有权

    公开(公告)号：CN112626036B

    公开(公告)日：2022-04-22

    申请号：CN202011576486.5

    申请日：2020-12-28

    Applicant: 南京农业大学

    Inventor： 蔺辉星 ,  范红结 ,  周红

    IPC: C12N7/01 ,  C12N15/85 ,  C12N15/65 ,  A61K39/275 ,  A61P31/20 ,  C12R1/93

    Abstract: 本发明公开了一种基因缺失的无毒猪痘病毒及其在制备疫苗中的应用，所述无毒猪痘病毒是野生猪痘病毒的SPV009基因缺失病毒，所述SPV009基因的核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示。相对于现有技术，本发明经过大量试验成功构建了SPVSPV009基因缺失的猪痘病毒，该病毒对猪安全无毒，可作为疫苗表达载体用于其他动物疫病的活载体疫苗的研制，减少养殖业的经济损失。

    一种副猪嗜血杆菌抗体检测方法及其试剂盒
    12.
    发明授权
    一种副猪嗜血杆菌抗体检测方法及其试剂盒 有权

    公开(公告)号：CN110376388B

    公开(公告)日：2021-10-19

    申请号：CN201910756529.9

    申请日：2019-08-16

    Applicant: 南京农业大学 ,  南京昌吉生物科技有限公司

    Inventor： 范红结 ,  张鹏云 ,  周红 ,  蔺辉星

    IPC: G01N33/68 ,  G01N33/569 ,  G01N33/535

    Abstract: 本发明公开了一种新型副猪嗜血杆菌抗体间接ELISA检测方法，涉及抗体的检测领域，尤其涉及利用一种重组截短蛋白P2检测副猪嗜血杆菌抗体的间接ELISA检测方法及其试剂盒。这种副猪嗜血杆菌间接ELISA检测方法通过截短表达一种重组副猪嗜血杆菌外膜蛋白P2，并以该蛋白作为包被抗原，并通过对ELISA反应条件、检测方式和临界值确定方式的优化；能够实现对副猪嗜血杆菌抗体的准确检测，具有较好的特异性和敏感性；有效解决了在抗体检测过程中本底过高的问题；并较大程度降低了检测成本。

    一种重组猪胞内劳森菌Hsp60蛋白单克隆抗体及其应用
    13.
    发明公开
    一种重组猪胞内劳森菌Hsp60蛋白单克隆抗体及其应用 有权

    公开(公告)号：CN113444175A

    公开(公告)日：2021-09-28

    申请号：CN202110855204.3

    申请日：2021-07-28

    Applicant: 南京农业大学

    Inventor： 范红结 ,  李剑男 ,  肖宁 ,  胡雨婷 ,  周红 ,  蔺辉星 ,  陈长风

    IPC: C07K16/12 ,  C12N15/13 ,  G01N33/577 ,  G01N33/569

    Abstract: 本发明公开了一种重组猪胞内劳森菌Hsp60蛋白单克隆抗体及其应用，所述单克隆抗体的重链可变区包括HCDR1、HCDR2和HCDR3，其氨基酸序列分别如SEQ ID NO.1、SEQ ID NO.2和SEQ ID NO.3所示；所述单克隆抗体的轻链可变区包括LCDR1、LCDR2和LCDR3，其氨基酸序列分别如SEQ ID NO.4、SEQ ID NO.5和SEQ ID NO.6所示。本发明所制备的重组猪胞内劳森菌Hsp60蛋白单克隆抗体纯度高、特异性好、灵敏度高，与其它肠道致病菌无交叉反应性，可用于ELISA、IFA检测，对于临床LI诊断和实验室LI诊断技术研发具有重要意义。

    一种胞内劳森菌的IPMA抗体检测方法
    14.
    发明公开
    一种胞内劳森菌的IPMA抗体检测方法 无效

    公开(公告)号：CN113376375A

    公开(公告)日：2021-09-10

    申请号：CN202110631461.9

    申请日：2021-06-07

    Applicant: 南京农业大学

    Inventor： 范红结 ,  肖宁 ,  周红 ,  蔺辉星 ,  李剑男 ,  胡雨婷 ,  李敏雪

    IPC: G01N33/569

    Abstract: 本发明公开了一种胞内劳森菌的IPMA抗体检测方法，包括以下步骤：(1)利用McCoy细胞进行胞内劳森菌的培养；(2)制备IPMA反应板：将步骤(1)培养的胞内劳森菌加入到含McCoy细胞的细胞板中培养，连续培养4‑5d，之后依次进行固定、通透和封闭；(3)在步骤(2)所得的IPMA反应板中加入待测血清，同时分别加入阳性对照血清和阴性对照血清，孵育；加入过氧化物酶标记的二抗，孵育；加入显色液，反应，干燥；(4)显微镜下观察，当待测血清样品为胞内劳森菌抗体阳性时，则被胞内劳森菌感染的阳性细胞胞质将被染为棕红色；而当待测猪血清样品为胞内劳森菌抗体阴性时，则被胞内劳森菌感染的McCoy细胞胞质不着色。该法具有特异性强、灵敏度高、操作简单等优点。

    一种胞内劳森菌弱毒疫苗菌株、疫苗及其应用
    17.
    发明授权
    一种胞内劳森菌弱毒疫苗菌株、疫苗及其应用 有权

    公开(公告)号：CN114836356B

    公开(公告)日：2023-09-05

    申请号：CN202210629474.7

    申请日：2022-06-06

    Applicant: 南京农业大学 ,  南京昌吉生物科技有限公司

    Inventor： 范红结 ,  肖宁 ,  周红 ,  李剑男 ,  蔺辉星

    IPC: C12N1/20 ,  A61K39/02 ,  A61P31/04 ,  A61P1/00 ,  C12R1/01

    Abstract: 本发明公开了一种胞内劳森菌弱毒疫苗菌株、疫苗及其应用，所述胞内劳森菌弱毒疫苗菌株保藏在中国典型培养物保藏中心，命名为LJS19051‑P80，保藏日期为2022年5月12日，保藏编号为CCTCC NO：V202239。所述胞内劳森菌弱毒疫苗菌株用于制作胞内劳森菌弱毒疫苗菌株疫苗，能有效预防猪增生性回肠炎。本发明以前期分离的胞内劳森菌LJS19051菌株为疫苗候选菌株，使用体外传代致弱方式对其进行致弱，并选择合适代次的致弱菌株制备胞内劳森菌弱毒疫苗，为猪增生性回肠炎商品化弱毒疫苗的研制及猪场猪增生性回肠炎的有效防控奠定了基础。

    一种猪源胞内劳森菌Omp2蛋白单克隆抗体及其应用
    19.
    发明公开
    一种猪源胞内劳森菌Omp2蛋白单克隆抗体及其应用 有权

    公开(公告)号：CN113292651A

    公开(公告)日：2021-08-24

    申请号：CN202110750619.4

    申请日：2021-07-01

    Applicant: 南京农业大学

    Inventor： 范红结 ,  肖宁 ,  蔺辉星 ,  周红 ,  李剑男 ,  胡雨婷

    IPC: C07K16/12 ,  C12N15/13 ,  G01N33/577 ,  G01N33/569

    Abstract: 本发明公开了一种猪源胞内劳森菌Omp2蛋白单克隆抗体及其应用，所述单克隆抗体的重链可变区包括HCDR1、HCDR2和HCDR3，其氨基酸序列分别如SEQ ID NO.1、SEQ ID NO.2和SEQ ID NO.3所示；所述单克隆抗体的轻链可变区包括LCDR1、LCDR2和LCDR3，其氨基酸序列分别如SEQ ID NO.4、SEQ ID NO.5和SEQ ID NO.6所示。本发明所得猪源胞内劳森菌Omp2蛋白单克隆抗体能够用于胞内劳森菌，以制备的单克隆抗体为一抗，IFTC‑标记的羊抗鼠抗体为二抗，检测感染细胞中的胞内劳森菌，为肠上皮细胞中胞内劳森菌抗原检测方法的建立奠定基础。

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