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公开(公告)号:CN117683805A
公开(公告)日:2024-03-12
申请号:CN202311681903.6
申请日:2023-12-08
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明提供一种可以拆分的紧凑型CRISPR/Cas系统。所述系统包括依次连接的以下单元:(a)Cas12j2‑STU.v4‑N:依次设置的玉米Ubi启动子、nCas12j2的N端、内含肽的N端、连接序列(SGGS linker)、核定位信号(BpNLS);和(b)Cas12j2‑STU.v4‑C:依次设置的玉米Ubi启动子、内含肽的的C端、nCas12j2的C端、连接序列(SGGS linker)、核定位信号(BpNLS)、PolyA、Cas12j2的pre‑crRNA变体、间隔区Spacer、Cas12j2的crRNA变体、豌豆rbcS‑E9终止子(E9ter)。Cas12j2系统相比于常见的Cas9和Cas12a,体积小、结构简单且特异性较强,在细胞间递送效率上更有优势,有更广泛的适用场景。本方案在高效Cas12j2系统的基础上,选择Cas12j2蛋白上的关键氨基酸残基对Cas12j2基因编辑工具进行进一步拆分,在尽量不影响其效率的基础上缩小系统的整体体积,拓宽系统的递送方式。
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公开(公告)号:CN116411017A
公开(公告)日:2023-07-11
申请号:CN202310531375.X
申请日:2023-05-12
Applicant: 南京农业大学
IPC: C12N15/82 , C12N15/113 , A01H6/46 , A01H5/00
Abstract: 本发明公开一种多靶点基因编辑工具及其在调节水稻抽穗期方面的应用。基于CRISPR‑Cas9基因编辑方法,通过改进tRNA‑sgRNA系统实现一种高效的多靶点基因编辑工具。在水稻抽穗期基因Hd1启动子上设计八个敲除靶点。稳定遗传转化发现八个靶点的编辑效率从59%到88%不等,通过转基因后代的表型和分子鉴定,筛选出34个抽穗期呈现连续分布的家系,提高了优良品种的地区适应性,扩大优良品种的种植面积。同样我们在抽穗期基因DTH8和Ghd7的启动子也获得了抽穗期连续变异的品系。本发明同时为启动子多靶点编辑微调基因表达及寻找顺式调控元件的研究奠定基础。
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公开(公告)号:CN118995765A
公开(公告)日:2024-11-22
申请号:CN202411393560.8
申请日:2024-10-08
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明公开一种水稻耐储藏、耐盐基因OsPSKR3及其编码蛋白质和应用,本发明提供的基因OsPSKR3,为如下1)或2)或3)或4)所述的DNA分子:1)SEQ ID NO.1所示的DNA分子;2)SEQ ID NO.2所示的DNA分子;3)在严格条件下与1)或2)限定的DNA序列杂交且编码所述蛋白的DNA分子;4)与1)或2)或3)限定的DNA序列具有90%以上同源性,且编码植物磺肽素受体的DNA分子。本发明还提供所述基因编码的蛋白质,所述蛋白影响植物种子的耐储性。将所述蛋白的编码基因在耐储性正常的植物过表达,可以培育耐盐性增强的转基因植物。所述蛋白及其编码基因可以应用于植物遗传改良。
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公开(公告)号:CN116855511A
公开(公告)日:2023-10-10
申请号:CN202310925548.6
申请日:2023-07-26
Applicant: 南京农业大学
IPC: C12N15/29 , C07K14/415 , C12N15/84 , A01H5/00 , A01H6/46
Abstract: 本发明公开一种水稻胚乳发育相关基因OsTML及其编码蛋白质和应用,本发明提供的基因OsTML,为如下1)或2)或3)或4)所述的DNA分子:1)SEQ ID NO.1所示的DNA分子;2)SEQ ID NO.2所示的DNA分子;3)在严格条件下与1)或2)限定的DNA序列杂交且编码所述蛋白的DNA分子;4)与1)或2)或3)限定的DNA序列具有90%以上同源性,且编码植物胚乳发育相关蛋白的DNA分子。本发明还提供所述基因编码的蛋白质,所述蛋白影响植物胚乳的发育,将所述蛋白的编码基因导入胚乳发育异常的植物中,可以培育胚乳发育正常的转基因植物。所述蛋白及其编码基因可以应用于植物遗传改良。
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公开(公告)号:CN113957082B
公开(公告)日:2023-09-01
申请号:CN202111482879.4
申请日:2021-12-07
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明公开一种低温下保护水稻叶绿体发育基因TSA及其编码蛋白质和应用,通过图位克隆技术克隆了一个低温条件下调控叶绿体发育的基因TSA,转基因敲除及功能互补实验证明TSA在低温条件下保护叶绿体正常发育至关重要。荧光定量PCR发现TSA在低温条件下(20℃)被诱导表达,适当调节TSA的表达提高水稻冷胁迫的适应性,为培育耐冷水稻新品种提供新思路。同时可利用该基因调控水稻叶绿体发育,提高光合作用效率,增加水稻产量。除此之外该基因突变体遗传稳定,可以作为标记用于生产实践中。
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公开(公告)号:CN115851768A
公开(公告)日:2023-03-28
申请号:CN202211592738.2
申请日:2022-12-13
Applicant: 南京农业大学
IPC: C12N15/29 , C12N15/82 , C07K14/415 , A01H5/00 , A01H6/46
Abstract: 本发明属于基因工程技术领域,公开了一个水稻抽穗期基因EHD5及其编码蛋白质和应用。该基因编码一个RNA结合蛋白,野生型基因序列如SEQ ID NO.1所示,氨基酸序列如SEQ ID NO.3所示。遗传转化实验证明EHD5在长、短日照条件下均促进水稻抽穗。由于ehd5较野生型晚抽穗天数在长、短日照下较稳定,因此通过杂交或者转基因编辑将其导入常规品种后对其抵抗环境变化引起的抽穗期波动及扩大地域适应性有重要意义。
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公开(公告)号:CN111153980B
公开(公告)日:2022-03-15
申请号:CN202010095556.9
申请日:2020-02-17
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明公开了一个植物控制水稻粒型相关蛋白OsSDSG及其编码基因与应用。本发明提供的蛋白质,是如下(a)或(b)的蛋白质:(a)由SEQ ID NO.1所示的氨基酸序列组成的蛋白质;(b)将SEQ ID NO.1的氨基酸序列经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加且与植物粒型大小相关的由SEQ ID NO.1衍生的蛋白质。将所述蛋白的编码基因导入存在粒型变小缺陷的植物中,可以培育粒型变大的植物。所述蛋白及其编码基因可以应用于作物遗传改良。
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公开(公告)号:CN113957082A
公开(公告)日:2022-01-21
申请号:CN202111482879.4
申请日:2021-12-07
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明公开一种低温下保护水稻叶绿体发育基因TSA及其编码蛋白质和应用,通过图位克隆技术克隆了一个低温条件下调控叶绿体发育的基因TSA,转基因敲除及功能互补实验证明TSA在低温条件下保护叶绿体正常发育至关重要。荧光定量PCR发现TSA在低温条件下(20℃)被诱导表达,适当调节TSA的表达提高水稻冷胁迫的适应性,为培育耐冷水稻新品种提供新思路。同时可利用该基因调控水稻叶绿体发育,提高光合作用效率,增加水稻产量。除此之外该基因突变体遗传稳定,可以作为标记用于生产实践中。
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