公开(公告)号：CN112646934B

公开(公告)日：2021-08-31

申请号：CN202110084102.6

申请日：2021-01-21

Applicant: 华南农业大学

Inventor： 张桂红 ,  黄钊 ,  王衡 ,  龚浪 ,  许志颖

IPC: C12Q1/70 ,  C12Q1/6851 ,  C12N15/11

Abstract: 本发明公开了一种鉴别非洲猪瘟病毒野毒株和基因缺失株的三重荧光定量PCR检测引物及试剂盒。本发明提供了一组检测非洲猪瘟病毒野毒株和基因缺失株的特异性引物和探针，通过RT‑qPCR方法同时检测非洲猪瘟病毒野毒株B646L基因和缺失株的EGFP、mCherry基因，能够鉴别样本是非洲猪瘟病毒野毒株还是基因缺失株。该检测方法灵敏度高，特异性强，B646L、EGFP和mCherry基因阳性标准质粒最低检测浓度分别为5.94×10‑9ng/μL、9.67×10‑9ng/μL、5.85×10‑9ng/μL。该方法检测范围广泛，能检测出多种非洲猪瘟病毒基因缺失株，且检测过程快速，高效，适合进行大批量检测，为鉴别非洲猪瘟病毒野毒株与基因缺失毒株提供了新手段，可用于生产实践中对非洲猪瘟病毒野毒株和基因缺失株的快速鉴定。

公开(公告)号：CN113122511A

公开(公告)日：2021-07-16

申请号：CN202110394476.8

申请日：2021-04-13

Applicant: 金宇保灵生物药品有限公司 ,  华南农业大学 ,  中国农业科学院上海兽医研究所

Inventor： 宋庆庆 ,  叶正琴 ,  陈鸿军 ,  王衡 ,  狄栋栋 ,  武瑾贤 ,  龚浪 ,  屠颉 ,  谢振华 ,  陈坚 ,  刘建奇 ,  徐丽媛 ,  赵丽霞 ,  刘英楠 ,  张翀宇

IPC: C12N7/00 ,  C12N7/04 ,  C12N15/85 ,  C12N15/34 ,  A61K39/12 ,  A61P31/20 ,  C12R1/93

Abstract: 本发明公开一种基因缺失的减毒非洲猪瘟病毒毒株及其构建方法和应用，属于生物疫苗制品技术领域。本发明通过同源重组方法构建的基因缺失的减毒非洲猪瘟病毒毒株是在II型非洲猪瘟病毒基因组的基础上同时缺失了CD2v，MGF(12L,13L,14L)和I177L基因片段的基因缺失毒株，其相对于亲本毒株明显减毒，且不会影响基因缺失病毒株的稳定复制和免疫原性。将其接种实验猪后不会出现实验猪体温明显升高、关节肿胀、发病或死亡现象，也无病毒血症发生，表现出良好的安全性和良好的免疫攻毒保护效果。因此本发明提供的基因缺失的减毒非洲猪瘟病毒毒株可以作为一种具有良好安全性和免疫保护效果的候选疫苗株。

公开(公告)号：CN112646934A

公开(公告)日：2021-04-13

申请号：CN202110084102.6

申请日：2021-01-21

Applicant: 华南农业大学

Inventor： 张桂红 ,  黄钊 ,  王衡 ,  龚浪 ,  许志颖

IPC: C12Q1/70 ,  C12Q1/6851 ,  C12N15/11

Abstract: 本发明公开了一种鉴别非洲猪瘟病毒野毒株和基因缺失株的三重荧光定量PCR检测引物及试剂盒。本发明提供了一组检测非洲猪瘟病毒野毒株和基因缺失株的特异性引物和探针，通过RT‑qPCR方法同时检测非洲猪瘟病毒野毒株B646L基因和缺失株的EGFP、mCherry基因，能够鉴别样本是非洲猪瘟病毒野毒株还是基因缺失株。该检测方法灵敏度高，特异性强，B646L、EGFP和mCherry基因阳性标准质粒最低检测浓度分别为5.94×10‑9ng/μL、9.67×10‑9ng/μL、5.85×10‑9ng/μL。该方法检测范围广泛，能检测出多种非洲猪瘟病毒基因缺失株，且检测过程快速，高效，适合进行大批量检测，为鉴别非洲猪瘟病毒野毒株与基因缺失毒株提供了新手段，可用于生产实践中对非洲猪瘟病毒野毒株和基因缺失株的快速鉴定。

公开(公告)号：CN114592090B

公开(公告)日：2024-01-30

申请号：CN202210190570.6

申请日：2022-02-28

Applicant: 华南农业大学

Inventor： 张桂红 ,  高琦 ,  冯永智 ,  龚浪 ,  王衡 ,  郑泽中 ,  蔡孟楷

IPC: C12Q1/70 ,  C12Q1/6851 ,  C12N15/11 ,  C12R1/93

Abstract: 本发明公开了一种鉴别基因Ⅰ型和Ⅱ型非洲猪瘟病毒的双重荧光定量PCR检测引物和探针及试剂盒，所述双重荧光定量PCR检测引物核苷酸序列如SEQ ID NO:1～2和4～5所示。并进一步建立了检测方法和检测试剂盒。该方法特异性强，与其他病毒无交叉反应；灵敏度高，最低检测拷2贝数分别为1.07×10 copies/μL和3.13×104copies/μL；重复性好，Ct值变异系数均小于2％；应用该方法与OIE推荐的荧光定量PCR方法检测结果一致。本发明建立的双重荧光定量PCR为鉴别基因I型和II型ASFV提供了快速检测方法，有利于完善中国针对ASF制定的高效防控措施。(56)对比文件Thi Bich Ngoc Trinh 等.Development ofa novel real-time PCR assay targeting p54gene for rapid detection of African swinefever virus (ASFV) strains circulating inVietnam《.VetMed Sci.》.2021,第7卷(第6期),第2268-2272页.Carmina Gallardo 等. Enhanceddiscrimination of African swine fevervirus isolates through nucleotidesequencing of the p54, p72, and pB602L(CVR) genes《.Virus Genes》.2009,第38卷(第1期),摘要，第86页右栏第2段至第92页左栏第1段.

公开(公告)号：CN113797184B

公开(公告)日：2023-06-27

申请号：CN202110832036.6

申请日：2021-07-22

Applicant: 华南农业大学

Inventor： 王衡 ,  郭彦辰 ,  张桂红 ,  龚浪 ,  陈洋 ,  孙彦阔 ,  郑泽中 ,  罗依琢

IPC: A61K31/085 ,  A61K36/70 ,  A61P31/20

Abstract: 本发明公开了丹叶大黄素在制备防治非洲猪瘟病毒的药物中的应用，本发明公开了丹叶大黄素具有显著的抗非洲猪瘟病毒的作用。其最大无毒剂量为40μM，对于非洲猪瘟病毒的感染和增殖能够有效抑制，能够作为防治非洲猪瘟的药物，在非洲猪瘟的防治方面具有很好的应用前景。

公开(公告)号：CN110964849A

公开(公告)日：2020-04-07

申请号：CN201911154632.2

申请日：2019-11-22

Applicant: 华南农业大学

Inventor： 周沛 ,  张桂红 ,  郝香琪 ,  王衡 ,  龚浪 ,  亓文宝 ,  符雪滢

IPC: C12Q1/70 ,  C12Q1/6806 ,  C12N15/11 ,  C12R1/93

Abstract: 本发明涉及病毒分析检测领域，具体涉及一种消除非洲猪瘟病毒检测假阳性的方法，是在提取待测样品DNA进行病毒粒子DNA检测之前，加入DNase I与待测样品共孵育。本发明利用Dnase I对样品进行预处理，有效区分了游离ASFV核酸和ASFV粒子，避免了实际检测中出现假阳性的现象，提高了检测的准确性。另外，本发明改善了PCR和qPCR的引物，进一步提高了对ASFV粒子的检测限。最后，本发明得到的PCR和qPCR试剂盒，能够快速采样检测，特异性灵敏，价格低廉，具有良好的应用前景。