一种蛋白质烷基化修饰剂PEG修饰能力的检测方法及其应用

    公开(公告)号:CN103558213B

    公开(公告)日:2016-03-30

    申请号:CN201310471944.2

    申请日:2013-10-11

    Abstract: 本发明公开了一种蛋白质烷基化修饰剂PEG修饰能力的检测方法及其应用。本发明方法设置GSH经修饰剂修饰与GSH不经修饰两组,分别用5,5-二硫代对二硝基苯甲酸(DTNB)为显色剂,利用分光光度计测定在波长412nm下两组反应体系的吸光值,根据两组吸光值的差异来检测蛋白质氨基PEG化修饰剂的修饰能力。本发明进行修饰剂修饰能力的检测,既能实现定性检测又能实现定量检测,整个测定过程在60min内可完成,具有快速、简便、可靠的有益效果。

    一种修饰性谷胱甘肽过氧化物酶及其制备方法

    公开(公告)号:CN101831413A

    公开(公告)日:2010-09-15

    申请号:CN201010179067.8

    申请日:2010-05-14

    Abstract: 本发明属于生物技术领域,涉及一种修饰性谷胱甘肽过氧化物酶及其制备方法。该修饰性谷胱甘肽过氧化物酶是将单链单甲氧基聚乙二醇(mPEG1)通过游离氯原子与谷胱甘肽过氧化物酶的氨基反应,将mPEG1连接到谷胱甘肽过氧化物酶上。通过采用活化的单链单甲氧基聚乙二醇作为修饰剂,与谷胱甘肽过氧化物酶在4-37℃、pH?7.0-10.0反应,其中单链单甲氧基聚乙二醇与谷胱甘肽过氧化物酶的质量比为20-100∶1,反应15-60min后,按修饰剂与终止剂谷胱甘肽(GSH)为1∶1的比例加入GSH终止反应,然后用3万超滤膜超滤去除终止剂,获得所述的修饰性谷胱甘肽过氧化物酶。该修饰性谷胱甘肽过氧化物酶其氨基修饰率控制在40-45%,酶活力保持率超过100%。

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