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公开(公告)号：CN104597178A
公开(公告)日：2015-05-06
申请号：CN201510018577.X
申请日：2015-01-14
Applicant: 华中农业大学
IPC: G01N30/60
Abstract: 本发明属于兽药残留分析技术领域，具体涉及一种3-甲基喹噁啉-2羧酸的免疫亲和柱及其制备方法。该免疫亲和柱由空柱管和琼脂糖凝胶组成，在所述的琼脂糖凝胶上偶联了保藏号为CCTCC NO：C201147的杂交瘤细胞MQCA GA/5B10分泌的3-甲基喹噁啉-2羧酸的单克隆抗体。本发明的免疫亲和柱能与3-甲基喹噁啉-2羧酸特异性结合，最大结合容量为240ngDMT。该免疫亲和柱主要用于动物性产品中的3-甲基喹噁啉-2羧酸的纯化，以便后期对样本中3-甲基喹噁啉-2羧酸含量进行高效液相色谱检测。
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公开(公告)号：CN104558186A
公开(公告)日：2015-04-29
申请号：CN201410830131.2
申请日：2014-12-26
Applicant: 华中农业大学
IPC: C07K16/44 , C12N5/20 , G01N33/577 , G01N33/531 , C12R1/91
Abstract: 本发明公开了一种能识别多种卡巴氧和喹赛多代谢产物的特异性单克隆抗体和一种用于检测卡巴氧和喹赛多代谢产物的酶联免疫方法及试剂盒,本发明的单克隆抗体是由保藏号为CCTCC NO:C201495的杂交瘤细胞株DCBX5B1所分泌的。与现有技术相比，本发明制备的单克隆抗体可以同时识别脱二氧卡巴氧、脱二氧喹赛多和N4-脱一氧喹赛多，而且具有较高的灵敏度和特异性。本发明建立的ELISA方法和试剂盒能同时检测卡巴氧和喹赛多代谢产物在肉类食物中的残留，具有检测效率和灵敏度高，精密度和准确度好等优点。
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公开(公告)号：CN103288962B
公开(公告)日：2014-12-17
申请号：CN201210049821.5
申请日：2012-02-29
Applicant: 华中农业大学
IPC: C07K16/44 , C12N5/20 , G01N33/577 , G01N33/543 , C12R1/91
Abstract: 本发明公开了一种呋喃西林残留标示物氨基脲单克隆抗体及制备方法和应用，杂交瘤细胞SEM/4G6，CCTCC，CCTCCNO:C201150。其步骤：A、将半抗原CPSEM与牛血清白蛋白偶联得到免疫原；B、将半抗原CPSEM与卵清蛋白偶联得到包被原；C、利用步骤A的免疫原制备得到保藏号为CCTCCNO:C201150杂交瘤细胞株SEM/4G6所分泌的单克隆抗体；D用步骤B的包被原包被固相载体；E、将待测样品用酸处理，加入苯甲醛超声衍生后，用乙酸乙酯萃取，取乙酸乙酯层氮气吹干、正己烷净化和样品稀释液重新溶解得到待测物；F、对待测物进行酶联免疫检测。试剂盒在动物可食性组织中呋喃西林残留检测中的应用。方法简便、快速、灵敏、准确，可用于开发能检测动物可食性组织中氨基脲残留的酶联免疫试剂盒。
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公开(公告)号：CN103421892B
公开(公告)日：2014-10-22
申请号：CN201310198811.2
申请日：2013-05-24
Applicant: 华中农业大学
CPC classification number: Y02A50/451
Abstract: 本发明属细菌耐药性分子检测领域。涉及一种鉴别空肠弯曲杆菌及其大环内酯类耐药突变的多重实时荧光PCR方法。设计了特异性的引物和MGB探针及其组合，不仅能够特异性鉴定空肠弯曲杆菌，而且可同时检测空肠弯曲杆菌23SrRNA基因第2074和2075位的核苷酸突变以及核糖体蛋白L4鞭毛基因rplD上第170和221位的核苷酸突变。首次在同一反应体系里，实现了对空肠弯曲杆菌的特异性鉴定和对多种大环内酯类耐药突变点的快速检测。本发明极大地缩短了临床空肠弯曲杆菌鉴定和耐药性检测的时间，为临床感染的治疗用药和空肠弯曲杆菌耐药性监测提供了新的手段。
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公开(公告)号：CN103897046A
公开(公告)日：2014-07-02
申请号：CN201310196144.4
申请日：2013-05-23
Applicant: 华中农业大学
IPC: C07K14/32 , G01N33/68 , G01N33/543
CPC classification number: C07K14/32 , G01N33/566 , G01N33/9446
Abstract: 本发明属于兽药残留分析领域，具体涉及一种β-内酰胺类抗生素残留检测的受体分析方法与试剂盒及应用。本发明的试剂盒含可同时检测15种β-内酰胺类药物残留的受体蛋白。本发明的受体蛋白BlaR-CTD是由大肠杆菌(Escherichia？coli)BlaRC所表达，包含受体蛋白BlaR-CTD的大肠杆菌保藏在中国典型培养物保藏中心，保藏号为CCTCC？NO：M2013173。本发明还公开了受体蛋白、酶标药物的制备方法和受体分析方法。本发明的试剂盒可同时检测青霉素类和头孢菌素类药物，拓宽了现有技术的检测对象，具有简便、快速、灵敏和准确等突出优点。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN102768279B
公开(公告)日：2014-06-25
申请号：CN201210177239.7
申请日：2012-05-31
Applicant: 华中农业大学
IPC: G01N33/577
Abstract: 本发明公开了一种胶体金试纸条，该试纸条由吸收垫、硝酸纤维素膜、金标垫、样品垫依次层叠粘贴在塑料衬板上构成，所述硝酸纤维素膜上设有检测线和质控线，所述金标垫包被有胶体金标记的能识别磺胺类药物的单克隆抗体，所述检测线包被有磺胺包被原，所述质控线包被有羊或兔抗鼠IgG。本发明还公开了一种胶体金试纸条的使用方法及其在磺胺类药物残留检测中的应用。本发明的胶体金试纸条可用于对牛奶、猪肉、鸡肉、牛肉、羊肉、鱼肉、虾肉、猪肝、鸡肝、鸡蛋和蜂蜜等组织样品进行磺胺类药物残留检测，能同时检测16种磺胺类药物，具有检测灵敏度高，特异性强，操作简便，快速准确和费用低廉的特点。
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公开(公告)号：CN103592167A
公开(公告)日：2014-02-19
申请号：CN201310578673.0
申请日：2013-11-18
Applicant: 华中农业大学
Abstract: 本发明属于兽药残留分析领域，具体涉及一种基于荧光素酶标记基因工程菌的氟喹诺酮类药物残留的检测方法和应用。本发明包含一种能同时检测11种氟喹诺酮类药物残留的荧光素酶标记基因工程菌的构建及应用。该工程菌为大肠杆菌(Escherichia coli)pK12，保藏号为CCTCC NO：M2013385，由含有recA启动子和荧光素酶报告基因luxCDABE的质粒pRecAlux3转化大肠杆菌K12所得。与现有技术相比，本发明构建的基因工程菌可以同时识别多种氟喹诺酮类药物，拓宽了现有技术的检测对象，具有简单、快速、灵敏、准确和半定量功能等突出优点。
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公开(公告)号：CN103424481A
公开(公告)日：2013-12-04
申请号：CN201310162769.9
申请日：2013-05-06
Applicant: 华中农业大学
IPC: G01N30/02
Abstract: 本发明属于兽药残留分析领域，具体涉及林可霉素、克林霉素和大观霉素的残留分析方法。林可胺类药物包括林可霉素、克林霉素，将上述药物与硅烷基化试剂进行衍生化反应，所得到的产物更容易气化。奔发明对反应的条件进行优化选择，结果表明，在75～85℃水浴中，林可霉素、克林霉素与硅烷基化试剂衍生化反应0.5～1.5h，室温冷却后，即可直接进行气相色谱质谱分析。最小检出量5μg/L，结果重现性良好，3个浓度，5次单独重复的变异系数小于17％。该方法各项指标均能满足该兽药残留量分析对检测水平的要求，灵敏度有较大的提高。
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公开(公告)号：CN103424478A
公开(公告)日：2013-12-04
申请号：CN201310159490.5
申请日：2013-05-03
Applicant: 华中农业大学
IPC: G01N30/02
Abstract: 本发明属于兽药残留分析领域，具体涉及一种吡利霉素的残留检测方法。采用仲胺基化合物氢取代衍生反应高效液相色谱柱前衍生化反应分析。在室温下，衍生化试剂氯甲酸-9-芴基甲酯的浓度为10-2mol/L，将0.1mol/L的硼酸缓冲液调至pH为9，该反应为即时反应，由于只有一个仲胺作为单一的反应位点，不需加反应终止剂即可达到衍生化的目的，衍生产物稳定。衍生产物经高效液相色谱检测，衍生产物的紫外检测波长为266nm时有最大紫外强度，最小检出量为5μg/L，在20～4000μg/L范围内对峰面积呈线性响应，结果重现性良好，3个浓度、15次重复的变异系数小于8％。
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公开(公告)号：CN103421857A
公开(公告)日：2013-12-04
申请号：CN201210246635.0
申请日：2012-07-17
Applicant: 华中农业大学
IPC: C12P17/18 , C07D493/10 , C12R1/77
CPC classification number: Y02P20/582
Abstract: 本发明属于生物毒素合成技术领域，与生物发酵技术领域有关。本发明以大米颗粒为原料，经接种镰刀菌复苏、产分生孢子、分生孢子接种大米产毒培养基培养，培养基甲醇液提取、饱和、萃取、柱层析、水解和结晶等工艺过程，制备出一种单端孢酶类毒素-3Ac-DON和DON毒素结晶。一次结晶后毒素经核磁和质谱结构鉴定准确无误，含量不低于94%。传统提取工艺相比，本发明的一步法柱层析即可分离纯化出3Ac-DON毒素，步骤简单快捷产量高，制备的毒素性质稳定纯度高，显著降低了毒素合成成本，合成的3Ac-DON毒素经一步水解可得到DON，整个过程操作避免了色素干扰，简单，省时省力。得到的两种毒素均可以广泛应用于毒理学、代谢实验等各种毒素领域。
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