绵羊毛囊特异性表达启动子片段的分离及表达模式鉴定

    公开(公告)号:CN103421782A

    公开(公告)日:2013-12-04

    申请号:CN201210489304.X

    申请日:2012-11-27

    Abstract: 本发明属于动物基因工程技术领域,具体涉及到绵羊毛囊特异性表达启动子片段的分离克隆及表达模式鉴定。从绵羊基因组中分离克隆并鉴定出一个具有毛囊组织表达特异性的启动子,其核苷酸序列如SEQ ID NO:10所示。利用克隆得到的启动子片段构建了sKAP11.1p-GFP真核表达载体,并在启动子后插入了ZsGreen1绿荧光报告基因。将构建好的载体利用原核显微注射的方法整合到转基因小鼠基因组中,在个体水平上验证了该启动子的在哺乳动物体中具有表达活性和且表现为毛囊组织特异性,该启动子可用于进行动物产毛及毛发性能改良。

    一种从绵羊毛囊组织中提取总RNA的方法

    公开(公告)号:CN103243085A

    公开(公告)日:2013-08-14

    申请号:CN201210023764.3

    申请日:2012-02-03

    Abstract: 本发明属于RNA制备技术领域,具体涉及一种从绵羊毛囊组织提取总RNA的方法。其特征包括,从野外现场采集绵羊毛囊,样品低温运输、保存和RNA提取步骤得到毛囊总RNA。本发明提取毛囊总RNA,不会被外源或内源RNA酶降解到最低限度,能最大限度地保持被提取的总RNA的纯度,以利于后续试验的利用。本发明操作简单方便,成本低,无需液氮和RNA样品保护液。本发明获得的毛囊组织总RNA纯度高、完整度好,可用于反转录cDNA、PCR、QPCR等下游操作及mRNA与microRNA的检测应用。

    与猪免疫性状相关的小RNA分子标记与应用

    公开(公告)号:CN101875973B

    公开(公告)日:2013-01-09

    申请号:CN201010139794.1

    申请日:2010-04-01

    Abstract: 本发明属于家畜分子标记制备技术领域,具体涉及一种作为猪标记辅助选择应用的与免疫性状相关的小RNA分子标记及应用。所述的分子标记由猪微小RNA miR-29c前体及侧翼序列克隆得到,它的核苷酸序列如序列表SEQ ID NO:1所示。在序列表SEQ ID NO:1所示序列的第289位碱基处有一个C289-T289的碱基突变,导致RFLP-NcoI多态性。本发明还公开了获得上述分子标记的制备方法和多态性检测方法的应用,为猪的标记辅助选择提供了一个新的分子标记。

    猪免疫力相关分子标记克隆及应用

    公开(公告)号:CN101487054A

    公开(公告)日:2009-07-22

    申请号:CN200910060794.X

    申请日:2009-02-19

    Abstract: 本发明属于家畜分子标记制备技术领域,具体涉及一种作为猪标记辅助选择应用的与猪免疫力相关的分子标记的制备与应用。所述的分子标记由猪Cav1基因克隆得到,它的cDNA序列如序列表SEQ ID NO:1所示。序列表SEQ ID NO:1的第387bp处有一个G387-C387的碱基突变,导致HaeIII-RFLP多态性;序列第474bp处有一个A474-G474的碱基突变,导致MbiI-RFLP多态性;序列第512bp处有一个G512-A512的碱基突变,导致AciI-RFLP多态性。本发明还公开了扩增Cav1基因部分编码区所用的引物以及用于分子标记的检测方法。本发明为猪的标记辅助选择提供了3个新的分子标记。

    一种与猪胴体直长有关的SNP标记及应用

    公开(公告)号:CN116769931A

    公开(公告)日:2023-09-19

    申请号:CN202310846406.0

    申请日:2023-07-11

    Abstract: 本申请公开了一种与大白猪胴体直长相关的SNP标记及应用,所述SNP标记为国际猪基因组11.1版本参考序列猪1号染色体HOXA5基因(Ensembl数据库,登录号为MARC0046138)rs81238314位点的多态性,该多态性表现为A或C。通过该SNP标记来确定所述大白猪胴体直长生长性状,从优到劣的基因型排序依次为:AA基因型、AC基因型、CC基因型。本申请提供的SNP标记与大白猪肌肉的胴体直长极显著相关,可以通过鉴定该SNP标记来筛选胴体直长优劣的大白猪品系,具有重要的经济效益、实用价值和社会价值。

    一种猪肌内脂肪SNP分子标记及其应用

    公开(公告)号:CN114107520A

    公开(公告)日:2022-03-01

    申请号:CN202111527912.0

    申请日:2021-12-14

    Abstract: 本申请公开了一种与猪肌内脂肪含量相关的SNP分子标记及其应用。该SNP分子标记的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示,其序列中第101位的核苷酸是C或T,导致肌内脂肪含量呈现多态性。本申请还以此建立了一种高效准确的分子标记辅助育种技术,将其应用于种猪提高肌内脂肪含量的遗传改良中,从而提高后代猪的肉质品质。

    产猪RNAPⅡ的单克隆抗体的杂交瘤细胞及应用

    公开(公告)号:CN112795542A

    公开(公告)日:2021-05-14

    申请号:CN202110167488.7

    申请日:2021-02-07

    Inventor: 曹建华 田小欢

    Abstract: 本发明属于生物医药技术领域,尤其涉及产猪RNAPⅡ的单克隆抗体的杂交瘤细胞及应用。本发明利用骨髓瘤细胞融合技术制备筛选产猪RNAPⅡ单克隆抗体的杂交瘤细胞。所获得的单克隆抗体具有效价较高、不存在批次之间的差异、特异性强、成本低廉等特点。与商业化鼠源单抗进行比较发现,本申请的单克隆抗体具有良好的ChIP效果;在ChIP‑seq实验中,与商业单抗具有高度相关(r=0.89),表明二者具有良好的一致性;在ChIP‑seq实验中富集曲线更加陡峭且集中,表明其RNAPII富集效果强于商业单抗。

    一种猪骨骼肌卫星细胞的培养基PM+及其应用

    公开(公告)号:CN106190962B

    公开(公告)日:2019-11-29

    申请号:CN201610602491.6

    申请日:2016-07-27

    Abstract: 本发明属于动物细胞培养技术领域,具体涉及一种猪骨骼肌卫星细胞的培养PM+及其应用。所述的猪骨骼肌卫星细胞培养的培养基PM+,按重量/体积计的成分如下所述:培养基PM+总体积为1L,添加胎牛血清(FBS)20%;细胞培养添加剂(GlutaMax)1%;非必需氨基酸(NEAA)1%;抗生素‑抗真菌剂(AA)1%;鸡胚培养物0.5%;庆大霉素50mg/L;碱性成纤维细胞生长因子终浓度为25μL/L,用RPMI 1640液体基础培养基补足至培养基PM+总体积的全量。本发明还公开了该培养基的应用。

    与猪背膘厚性状相关的分子标记

    公开(公告)号:CN104480109B

    公开(公告)日:2017-10-20

    申请号:CN201410852692.2

    申请日:2014-12-31

    Abstract: 本发明属于家畜分子标记制备技术领域,具体涉及与猪背膘厚性状相关SNP分子标记的制备与应用。所述的分子标记由HADH基因克隆得到,其核苷酸序列如序列表SEQ ID NO:1所示和附图4所示。在SEQ ID NO:1和附图4所示序列的第282位有一个C或T的碱基替换;第287位有一个G或A的碱基替换;第296位有一个C或A的碱基替换;第324位有一个G或C的碱基替换;第370位有一个C或T的碱基替换。本发明为猪的标记辅助选择提供了新的分子标记资源。

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