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公开(公告)号：CN100386438C
公开(公告)日：2008-05-07
申请号：CN200510085474.1
申请日：2005-07-21
Abstract: 本专利采用基因枪转化法对草地早熟禾胚性愈伤组织进行轰击，建立了一套完整、高效的遗传转化体系。适合于草地早熟禾的基因枪转化参数为：Ca(NO3)2+PEG4000包被质粒DNA；使用1μm金粉作为质粒DNA的载体；处理1(打枪高度6cm、轰击1次、无渗透处理)与处理5(打枪高度6cm、轰击2次、有渗透处理)进行轰击，转化效果最好。适合于转化愈伤筛选的抗生素浓度为100mg/L。运用此转化体系，成功将三种与干旱、盐胁迫有关的功能基因转入草地早熟禾愈伤组织中，获得了转基因植株。转化频率高达3.92%。
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公开(公告)号：CN101139604A
公开(公告)日：2008-03-12
申请号：CN200610126822.X
申请日：2006-09-06
Applicant: 北京林业大学
IPC: C12N15/29 , C12N15/82 , C07K14/415
Abstract: 本发明从优良草坪草种结缕草中克隆了GA20氧化酶基因及构建了其植物表达载体。通过简并PCR和RACE的方法，从我国野生的结缕草中克隆出了GA20氧化酶基因，该基因全长1311bp，编码区长1109bp，编码区在96－1205bp之间，编码369个氨基酸。其与大麦、小麦和水稻等有65％的同源性。在GenBank上的登录号为：DQ645453。同时以pC1303为基础，分别构建了GA20氧化酶的正义和反义表达载体，该载体含GUS报告基因和潮霉素标记基因，可用于坪草的基因工程育种，以培育矮化型转基因草坪草。
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公开(公告)号：CN101045935A
公开(公告)日：2007-10-03
申请号：CN200710064240.8
申请日：2007-03-07
Abstract: 本发明提供了结缕草高频基因枪转化方法，建立了一套完整、高效的遗传转化体系。本发明基因枪法转化的具体参数是：选用直径为1μm的金粉、每枪250μg金粉+0.5μg DNA、5cm的轰击距离、轰击3次的基因枪转化参数，选择诱导4个月、继代培养25d左右的胚性愈伤组织进行基因枪轰击，靶材料在轰击前4h至轰击后12h间，培养于含有0.2M的甘露醇及0.2M的山梨醇高渗培养基上。本发明还进一步将可综合提高植物抗旱、耐寒、耐盐性的DREB1A基因转入日本结缕草胚性愈伤组织中，获得了转基因植株。并且确立了结缕草转化子的潮霉素筛选方案。
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公开(公告)号：CN100336444C
公开(公告)日：2007-09-12
申请号：CN200510085473.7
申请日：2005-07-21
IPC: A01H4/00
Abstract: 本专利对草地早熟禾Baron、Mardona、Midnight品种进行了组织培养研究，表明选择成熟种子作为外植体诱导愈伤组织，消毒时运用磁力搅拌消毒，蒸馏水洗净后直接接种为宜；选择易碎、干燥的胚性愈伤进行继代培养，在8个月内能够保持其再生能力；再生2个月的组培苗，移栽到花盆中能够100%成活，在田间生长健壮；运用正交设计与单因素实验设计的方法，建立了三种草地早熟禾品种的高频再生体系，胚性愈伤诱导率高达31.67%，愈伤组织分化率高达56.67%。运用其中Baron品种的再生体系进行基因枪转化，获得了转DREB1A、BADH-CMO、CMO基因的转化植株。
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公开(公告)号：CN101024844A
公开(公告)日：2007-08-29
申请号：CN200710063586.6
申请日：2007-02-05
Abstract: 本发明提供了高羊茅高频基因枪转化的方法。本发明选择胚性愈伤组织作为转化受体进行基因枪转化，采用CaCl2+Sperm(亚精胺)包被质粒DNA，使用直径为1μm的金粉作为质粒DNA的载体、轰击高度6cm，轰击2次。并且本发明还提供了基于基因枪法制备转基因高羊茅的方法。本发明方法周期短，转化频率高达6％。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN1732758A
公开(公告)日：2006-02-15
申请号：CN200510085471.8
申请日：2005-07-21
Abstract: 本发明一种建立多年生黑麦草高频再生体系的方法，是为遗传转化工作提供良好的受体材料。主要步骤包括：种子的消毒，以成熟胚为外植体在愈伤诱导培养基上诱导胚性愈伤组织，继代培养后转入再生培养基中分化出再生小苗，而后转入生根培养基中壮苗生根，获得完整植株后移栽。本发明选用了取材简便且不受季节限制的最佳外植体，消毒方式安全有效。通过调控愈伤诱导、分化和生根培养基中各激素和添加物的浓度，有效提高了胚性愈伤诱导率，且在继代培养过程中始终保持愈伤的胚性结构；再生率和生根率很高，移栽成活率为100％。
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公开(公告)号：CN1544626A
公开(公告)日：2004-11-10
申请号：CN200310115343.4
申请日：2003-11-20
Applicant: 北京林业大学
Abstract: 本发明提供了一种利用转基因技术提高林木抗旱性的方法，包括将来源于拟南芥的DREB2A基因向植物表达载体pBin438的构建，用得到的嵌合体通过叶圆盘法转化目的植物组培苗叶片，经诱导愈伤和分化筛选得到转基因植株。用本方法建立的转基因技术平台进行杨树、槐树等植物的转基因工作，通过抗生素抗性筛选得到转基因植株。并对转基因植株进行PCR、Southern及Northern分析，证明外源基因已经整合到抗旱转基因植株中。通过TTC法从生理水平上测定植物根系耐旱性活力。进而通过组织培养技术与田间中试进一步选育优良抗性转基因林木新品种。
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公开(公告)号：CN101024844B
公开(公告)日：2010-08-18
申请号：CN200710063586.6
申请日：2007-02-05
Abstract: 本发明提供了高羊茅高频基因枪转化的方法。本发明选择胚性愈伤组织作为转化受体进行基因枪转化，采用CaCl2+Sperm(亚精胺)包被质粒DNA，使用直径为1μm的金粉作为质粒DNA的载体、轰击高度6cm，轰击2次。并且本发明还提供了基于基因枪法制备转基因高羊茅的方法。本发明方法周期短，转化频率高(达6％)。
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公开(公告)号：CN101381723A
公开(公告)日：2009-03-11
申请号：CN200810000775.3
申请日：2008-01-16
Abstract: 本发明涉及结缕草中胁迫诱导型启动子Rd29A的克隆和功能鉴定，其主要步骤包括：以结缕草为植物材料，提取植物总DNA，利用生物软件设计一对特异引物，经过PCR扩增方法获得了Rd29A启动子序列，并以pBI121为基础，分别构建了pBIG(35S－GFP)和pBIRG(Rd29A－GFP)两个植物真核表达载体，采用基因枪法对洋葱表皮细胞进行转化，检测Rd29A启动子在受体细胞中调控GFP基因表达的活性。本发明能筛选出适用于草坪草转基因的诱导型启动子Rd29A，Rd29A启动子是一个受干旱、盐碱和低温等逆境诱导表达的特异性启动子，也是植物抗逆性基因工程中理想的逆境诱导型启动子，对于逆境条件下草坪草的生长发育有重要意义。
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公开(公告)号：CN101015281A
公开(公告)日：2007-08-15
申请号：CN200710064241.2
申请日：2007-03-07
Abstract: 本发明提供了日本结缕草植株再生方法。该方法将外植体经预处理后，接种愈伤组织诱导培养基，从而得到愈伤组织，挑选胚性愈伤组织接种继代培养基进行继代培养，或者接种再生培养基分化成再生植株，其中愈伤组织诱导培养基含有2，4－D 3－6mg/l、6－BA或KT 0.05－0.2mg/l及CuSO42－3.5mg/l。按照本发明的方法，外植体的愈伤诱导率可达90％，胚性愈伤率可达30％，愈伤组织再生率可达45％。再生植株在有很强的分蘖、生根能力。植株经壮苗、炼苗后移栽入土壤中，成活率达87.5％以上。移栽的植株在田间能够正常扩繁生长。
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