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公开(公告)号：CN102747078A
公开(公告)日：2012-10-24
申请号：CN201210229358.2
申请日：2012-07-03
Applicant: 北京市农林科学院
Abstract: 本发明公开了一对用于快速检测葡萄溃疡病菌Neofusicoccum parvum菌种的引物及其应用。该对引物，它们的核苷酸序列分别为序列表中序列1和序列表中序列2，能够在葡萄溃疡病菌Neofusicoccum parvum特异性的扩增出370bp的产物，对Neofusicoccum parvum菌种基因组DNA的灵敏度可达10pg。这表明该引物对可以用于田间葡萄病样中Neofusicoccum parvum菌种的快速可靠的检测和鉴定，克服传统鉴定方法步骤繁琐、鉴定周期长等问题。
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公开(公告)号：CN102373199A
公开(公告)日：2012-03-14
申请号：CN201110350171.3
申请日：2011-11-08
Applicant: 北京市农林科学院
Abstract: 本发明公开了一对辅助鉴定野油菜黄单胞菌野油菜致病变种四号生理小种的引物及其应用。该对引物，它们的核苷酸序列分别为序列表中序列1和序列表中序列2。可以利用本发明的引物对野油菜黄单胞菌野油菜致病变种菌株进行生理小种鉴定缩短鉴定时间，从而较快地鉴定出野油菜黄单胞菌野油菜致病变种四号生理小种，利用本发明引物进行鉴定生理小种的方法克服了传统生理小种鉴定方法鉴别寄主法中易受环境因素和鉴别寄主生长期长的干扰而导致鉴定效率低等问题。
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公开(公告)号：CN101375691A
公开(公告)日：2009-03-04
申请号：CN200810223439.5
申请日：2008-09-27
Applicant: 北京市农林科学院
Abstract: 本发明公开了一种花脸蘑提取物以及它的制备方法与应用。该方法：(1)是将花脸蘑子实体粉与pH值为6－9的磷酸缓冲液混合，在0－4℃浸提，离心取上清液得到花脸蘑粗提物；(2)上清液加入硫酸铵至饱和度为50％，在0－4℃放置8－16小时后离心；(3)上清液加入硫酸铵至饱和度为70％，在0－4℃放置8－16小时后离心。(4)用蒸馏水溶解沉淀得到花脸蘑抗TMV的蛋白。本发明的花脸蘑提取物属于天然提取物，对人类和环境均无害，属于环境友好型。且本发明的花脸蘑提取物的纯化方法简单，步骤精略，容易操作。
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公开(公告)号：CN101375689A
公开(公告)日：2009-03-04
申请号：CN200810223438.0
申请日：2008-09-27
Applicant: 北京市农林科学院
Abstract: 本发明公开了一种黑平菇提取物及其制备方法与应用。该方法：(1)是将黑平菇菌丝粉与pH值为6－9的磷酸缓冲液混合，在2－6℃浸提，离心取上清液得到黑平菇提取物溶液；(2)上清液加入硫酸铵至饱和度为40％，在2－6℃放置8－16小时后离心；(3)上清液加入硫酸铵至饱和度为70％，在0－4℃放置8－16小时后离心。(4)用蒸馏水溶解沉淀得到黑平菇抗TMV的蛋白。本发明的黑平菇提纯物属于天然提取物，对人类和环境均无害。本发明黑平菇提纯物的制备方法，简单容易操作，并且利用黑平菇菌丝为原材料，通过液体培养可获得大量菌丝，使成本大大降低。
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公开(公告)号：CN102747078B
公开(公告)日：2013-10-23
申请号：CN201210229358.2
申请日：2012-07-03
Applicant: 北京市农林科学院
Abstract: 本发明公开了一对用于快速检测葡萄溃疡病菌Neofusicoccum parvum菌种的引物及其应用。该对引物，它们的核苷酸序列分别为序列表中序列1和序列表中序列2，能够在葡萄溃疡病菌Neofusicoccum parvum特异性的扩增出370bp的产物，对Neofusicoccum parvum菌种基因组DNA的灵敏度可达10pg。这表明该引物对可以用于田间葡萄病样中Neofusicoccum parvum菌种的快速可靠的检测和鉴定，克服传统鉴定方法步骤繁琐、鉴定周期长等问题。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN103320376A
公开(公告)日：2013-09-25
申请号：CN201310259691.2
申请日：2013-06-26
Applicant: 北京市农林科学院
Abstract: 本发明提供了一种用于葡萄白粉病菌单孢分离的方法。该方法，首先诱导采集的白粉病样重新产生分生孢子，将新产生的单个或单串的分生孢子用针灸针转移到1%次氯酸钠处理过的无菌的对葡萄白粉病菌敏感的葡萄叶片上，记号笔标记接种点，在22℃，12h光周期地培养箱中培养10-14d，在接种点处形成的菌落即为分离到的葡萄白粉病菌的纯培养。该方法简便易行，并且能够以较高的成功率分离得到葡萄白粉病菌单孢的纯培养，解决了传统真菌分离方法不适用于葡萄白粉病菌单孢分离的问题。
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公开(公告)号：CN102172172B
公开(公告)日：2012-05-30
申请号：CN201110046585.7
申请日：2008-12-30
Applicant: 北京市农林科学院
IPC: A01G1/04
Abstract: 本发明公开了一种裂褶菌的培养方法，包括将裂褶菌母种活化、一级菌种制备，然后在液体发酵培养基中在24～28℃、200～260rpm/min条件下进行发酵培养4～6天，得发酵混合液；再将发酵混合液抽滤、收集裂褶菌菌丝，烘干、粉碎等步骤。利用本发明方法发酵培养的裂褶菌产量高，每升发酵菌液可获得400～480g菌丝体湿重或54～60g菌丝体干重，与现有技术相比，产量有了很大的提高。
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公开(公告)号：CN101665531B
公开(公告)日：2012-05-23
申请号：CN200910093039.1
申请日：2009-09-25
Applicant: 北京市农林科学院
Abstract: 本发明公开了一种花脸蘑蛋白LsAPII，其N端氨基酸序列为：DGEYVNDLEGTISVDA；其制备方法为将花脸蘑子实体粉末在磷酸缓冲液中浸泡，离心，取上清液；然后分别加入硫酸铵至饱和度为50％和70％，在0～6℃下放置6～16h，分别离心，收取上清液或沉淀；再用磷酸缓冲液溶解，透析、超滤管超滤、阴离子交换柱分离和0.3mol/L氯化钠溶液洗脱，即得花脸蘑蛋白LsAPII。本发明LsAPII对烟草花叶病毒抑制效果好；其次确定LsAPII为单一蛋白，为其遗传工程应用提供了基础；还有LsAPII为天然提取物，对人类和环境均无害；另外LsAPII制备方法简单，原料易得，成本较低。
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公开(公告)号：CN101665530B
公开(公告)日：2012-01-04
申请号：CN200910093038.7
申请日：2009-09-25
Applicant: 北京市农林科学院
Abstract: 本发明公开了一种黑平菇蛋白PoAP及其制备方法，首先将黑平菇菌丝干粉在磷酸缓冲液中浸提1～3小时，离心，收集上清液；然后分别向所得上清液中加入硫酸铵至饱和度为40％和70％，2～6℃放置6～12小时，离心，收集沉淀；用磷酸缓冲液溶解沉淀，接着用重蒸馏水进行透析；再经阴离子交换柱分离，用0.5M NaCl洗脱，收集洗脱峰；然后经30KD超滤管超滤，5000rpm离心超虑40min，所得溶液中的物质即为黑平菇蛋白。本发明黑平菇蛋白PoAP为单一蛋白，可进行遗传工程应用；其次，对烟草花叶病毒抑制效果好；且为天然提取物，对人类和环境均无害；另外，黑平菇蛋白制备方法简单，原料易得，成本较低。
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公开(公告)号：CN102265830A
公开(公告)日：2011-12-07
申请号：CN201110160947.5
申请日：2011-06-15
Applicant: 北京市农林科学院
Abstract: 本发明公开了属于生物农药领域的一种裂褶菌多糖提取物及其制备方法，按照比例将裂褶菌菌丝粉加入到热水中，在100℃水浴中浸提8～10小时，用纱布过滤，所得滤渣在按照相同方法再浸提一次，合并两次滤液，真空浓缩，再与5倍体积的95％乙醇混合，于4℃下静置过夜，离心，将沉淀用乙醇洗涤2次，60℃烘干即可。本发明还公开了裂褶菌多糖提取物在防治烟草花叶病毒病上的用途。本发明裂褶菌多糖提取物对烟草花叶病毒防治效果好，对烟草花叶病毒的抑制率可达到70％以上，为烟草花叶病毒病的防治提供了一种新的途径；其次，本发明为天然提取物，对人类和环境无害；此外，本发明制备方法简单，成本低。
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