一种高效作物防病增产菌的选育与生产工艺

    公开(公告)号:CN1074803A

    公开(公告)日:1993-08-04

    申请号:CN92112764.2

    申请日:1992-11-13

    Applicant: 北京大学

    Abstract: 高效作物防病增产菌TG26为枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)。菌种筛选工艺中,采用从双子叶植物丝瓜、大豆、蕃茄,单子叶植物玉米、水稻、小麦等根围10cmm土壤、地上茎、叶片、果实或穗表皮取样。分离时首先经75—100℃煮沸,选取芽孢杆菌。选择生长快、抑菌活性强和抗菌谱广的菌株。经检测TG26菌株能分泌大量的抗菌蛋白,其菌剂对多种植物病原真菌和细菌都有很强的抑菌活性。对目前已经测定的三种植物病害都有防治作用。浸根处理对西瓜枯萎病和烟草青枯病苗期防效都达100%。对小麦赤霉病、西瓜枯萎病和烟草青枯病的田间防效分别为76.4%、73.1%和79.6%,并有明显的增产作用。

    一种PCR方法
    12.
    发明授权

    公开(公告)号:CN100513577C

    公开(公告)日:2009-07-15

    申请号:CN200510080550.X

    申请日:2005-07-04

    Applicant: 北京大学

    Abstract: 本发明公开了一种具有较高特异性,并且操作简单的PCR方法。该PCR方法,通过模板变性、SiteFinder在低温下与基因组模板退火、单方向延伸,将SiteFinder序列引入基因组序列之中;通过2轮PCR指数倍扩增目标DNA分子,而非目标分子因茎环结构的抑制作用而无法完成指数扩增,从而达到选择性扩增目标分子的目的;通过限制性内切酶识别位点选择性地克隆目标分子;最后,通过已知序列上GSP2下游的GSP3特异性的筛选目标分子。本发明的PCR方法与现有PCR方法相比,具有简单快速、特异性高、通用性强、重复性好、一次扩增片段较长且成本低廉等优点,广泛适用于分子生物学研究中多种目的染色体步查,如转基因动、植物及微生物中外源基因插入位点的鉴定、基因未知区段新基因的分离等。

    一种PCR方法
    14.
    发明公开

    公开(公告)号:CN1521263A

    公开(公告)日:2004-08-18

    申请号:CN03101874.2

    申请日:2003-01-28

    Applicant: 北京大学

    Abstract: 本发明提供了一种PCR方法。目的是提供一种高特异性、高成功率的PCR方法。本发明的技术方案是将基因组DNA加Poly d(T)n尾、产生3’突出末端、进行单向PCR反应与T-linker特异性连接、进行扩增反应。称为T-linker PCR。本发明T-linker PCR与现有PCR方法相比,具有简单快速、特异性高、通用性强、重复性好、一次扩增片段较长且成本低廉等优点。T-linker PCR广泛适用于分子生物学研究中多种目的的染色体步查,如转基因动、植物及微生物中外源基因插入位点的鉴定、基因未知区段新基因的分离等。

    一种用基因工程方法培养的抗病香料烟草

    公开(公告)号:CN1059704C

    公开(公告)日:2000-12-20

    申请号:CN95102130.3

    申请日:1995-03-09

    Applicant: 北京大学

    Inventor: 陈章良 孙宝俊

    Abstract: 一种用基因工程方法培养的抗病香料烟草是从感染烟草花叶病毒的叶片中提取TMV经CsCl梯度提纯,提取TMV RNA,逆转录成cDNA,对一个cDNA克隆plcs72的序列测定进一步由cDNA库中获得含外壳蛋白基因(coat protein genc,简写cp gene)片段并转入Ti质粒,获得特制Ti质粒,用特制Ti质粒浸染烟草叶片,用这些叶片进行组织培养,育成完全的基因工程抗TMV工程植株,经大田中试,化验评吸,确定为有生产前途的抗病毒基因工程香料烟草。

    马铃薯葡萄糖琼脂干燥培养基的制造方法

    公开(公告)号:CN1077493A

    公开(公告)日:1993-10-20

    申请号:CN93104723.4

    申请日:1993-05-10

    Applicant: 北京大学

    Abstract: 本发明涉及用于培养真菌类微生物的马铃薯葡萄糖琼脂干燥培养基的制造方法。马铃薯经匀浆、浸提、液化、糖化、胰酶消化、煮沸过滤、浓缩及喷雾干燥等生产工艺得到马铃薯营养提取粉,配以适量的葡萄糖和琼脂粉,就可制成PDA干燥培养基。本发明从马铃薯中提取的营养物质数量是常规方法的5—7倍。本发明生产的PDA干燥培养基具有使用方便、营养丰富、更宜于微生物生长发育、节省原料、便于贮运、适合工业化生产等优点。

    利用家蚕高效表达天花粉蛋白及其他有用蛋白的方法

    公开(公告)号:CN1062001A

    公开(公告)日:1992-06-17

    申请号:CN91110465.8

    申请日:1991-11-12

    Applicant: 北京大学

    Abstract: 本发明通过基因工程技术,从家蚕核多角体病毒HB分离株中克隆了含多角体蛋白基因的片段,利用PCR定点突变法,构建了新型高效家蚕核多角体病毒转移载体质粒。该质粒的5′及3′端同源序列区小于普通转移载体质粒,适合于基因工程的操作。多角体蛋白基因启动子的结构完整,有利于高效表达。3′端引入了三套TAA终止密码,可以有效地终止外源基因的翻译。中间的多聚克隆位点适合于外源基因的插入。天花粉蛋白基因被插入到该质粒,并由些构建了含天花粉蛋白基因的重组家蚕核型多角体病毒,并在家蚕活体内表达了该基因。

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