公开(公告)号：CN103642761B

公开(公告)日：2016-08-24

申请号：CN201310667523.7

申请日：2013-12-10

Applicant: 北京交通大学

Inventor： 何金生 ,  付远辉 ,  焦月盈 ,  洪涛

IPC: C12N7/04 ,  C12N15/45 ,  C12N15/861 ,  C07K16/10 ,  A61K39/155 ,  A61P31/14 ,  G01N33/569

Abstract: 本发明涉及呼吸道合胞病毒样颗粒，建立了一种新的制备呼吸道合胞病毒样颗粒的方法，并用于动物免疫。本发明按照哺乳动物细胞密码子偏性，对M、F、G基因进行密码子优化，分别克隆到穿梭载体中，获得重组腺病毒质粒，转染，获得重组腺病毒FGAd?Msyn，FGAd?Fsyn、FGAd?Gsyn；将重组腺病毒感染Vero细胞，获得病毒样颗粒；采用蔗糖密度梯度离心的方法进行病毒样颗粒纯化；并用于动物免疫。本发明采用腺病毒载体制备病毒样颗粒，建立了一种新的病毒样颗粒制备方法，并通过密码子优化，提高蛋白表达量，提高病毒样颗粒的产量，获得较好的免疫效果，并且相对安全。

公开(公告)号：CN102731659B

公开(公告)日：2014-05-07

申请号：CN201210187669.7

申请日：2012-06-07

Applicant: 北京交通大学

Inventor： 张莹 ,  何金生 ,  宋琳琳 ,  洪涛

IPC: C07K19/00 ,  C07K16/18 ,  C07K1/16 ,  C12N15/62 ,  C12N15/70 ,  G01N33/68 ,  G01N33/543

Abstract: 本发明公开了一种6×His-C99重组蛋白及其制备方法和应用，根据本发明实施例的6×His-C99重组蛋白，在体外的稳定性强于Aβ42，用于抗体检测的稳定性好，在碱性包被液的条件下，6×His-C99重组蛋白呈现的抗原表位稳定，克服了Aβ42容易聚集，抗原表位具有多变性，导致检测结果不稳定的难题；另外，6×His-C99作为检测抗原，其用量低于Aβ42多肽做检测抗原的情形，6×His-C99的成本低，应用更经济，具有大规模应用的可能。

公开(公告)号：CN103642761A

公开(公告)日：2014-03-19

申请号：CN201310667523.7

申请日：2013-12-10

Applicant: 北京交通大学

Inventor： 何金生 ,  付远辉 ,  焦月盈 ,  洪涛

IPC: C12N7/04 ,  C12N15/45 ,  C12N15/861 ,  C07K16/10 ,  A61K39/155 ,  A61P31/14 ,  G01N33/569

Abstract: 本发明涉及呼吸道合胞病毒样颗粒，建立了一种新的制备呼吸道合胞病毒样颗粒的方法，并用于动物免疫。本发明按照哺乳动物细胞密码子偏性，对M、F、G基因进行密码子优化，分别克隆到穿梭载体中，获得重组腺病毒质粒，转染，获得重组腺病毒FGAd-Msyn，FGAd-Fsyn、FGAd-Gsyn；将重组腺病毒感染Vero细胞，获得病毒样颗粒；采用蔗糖密度梯度离心的方法进行病毒样颗粒纯化；并用于动物免疫。本发明采用腺病毒载体制备病毒样颗粒，建立了一种新的病毒样颗粒制备方法，并通过密码子优化，提高蛋白表达量，提高病毒样颗粒的产量，获得较好的免疫效果，并且相对安全。

公开(公告)号：CN102731659A

公开(公告)日：2012-10-17

申请号：CN201210187669.7

申请日：2012-06-07

Applicant: 北京交通大学

Inventor： 张莹 ,  何金生 ,  宋琳琳 ,  洪涛

IPC: C07K19/00 ,  C07K16/18 ,  C07K1/16 ,  C12N15/62 ,  C12N15/70 ,  G01N33/68 ,  G01N33/543

Abstract: 本发明公开了一种6×His-C99重组蛋白及其制备方法和应用，根据本发明实施例的6×His-C99重组蛋白，在体外的稳定性强于Aβ42，用于抗体检测的稳定性好，在碱性包被液的条件下，6×His-C99重组蛋白呈现的抗原表位稳定，克服了Aβ42容易聚集，抗原表位具有多变性，导致检测结果不稳定的难题；另外，6×His-C99作为检测抗原，其用量低于Aβ42多肽做检测抗原的情形，6×His-C99的成本低，应用更经济，具有大规模应用的可能。

公开(公告)号：CN102604959A

公开(公告)日：2012-07-25

申请号：CN201210041609.4

申请日：2012-02-21

Applicant: 北京交通大学

Inventor： 彭向雷 ,  管小亭 ,  何金生 ,  郑妍鹏 ,  张莹 ,  周淑杰

IPC: C12N15/12 ,  C07K14/47 ,  C12N15/63 ,  C12N15/85 ,  C12N15/861 ,  C12N5/10 ,  C12Q1/68 ,  A01K67/027

Abstract: 本发明公开了属于分子病理学领域技术领域的一种阿尔茨海默病致病基因及其应用，其cDNA核苷酸序列如SEQ ID NO：1所示。本发明还涉及含有所述阿尔茨海默病致病基因的重组载体、含有该重组载体的重组细胞、阿尔茨海默病致病基因的编码蛋白以及阿尔茨海默病致病基因的外显子。本发明所述阿尔茨海默病致病基因的外显子，对该基因的检测可能用于AD患者的基因分子诊断，或利于明确AD患者亲属的发病风险预测。本发明可以对AD的发病机理提供重要线索，含有所述阿尔茨海默病致病基因的外显子载体可用于制备AD细胞或动物模型。

公开(公告)号：CN101555477A

公开(公告)日：2009-10-14

申请号：CN200910082076.2

申请日：2009-04-22

Applicant: 北京交通大学

Inventor： 何金生 ,  王鑫 ,  张莹 ,  洪涛

IPC: C12N15/13 ,  C07K16/18 ,  G01N33/577 ,  A61K39/395 ,  A61P25/28 ,  C12P21/08

Abstract: 本发明涉及抗人淀粉样蛋白单克隆抗体的重链和轻链可变区基因及其编码的多肽。本发明还涉及所述基因和多肽在制备诊断阿尔茨海默病试剂和药物的用途。本发明从培养的寡聚体高亲和性单抗A8杂交瘤细胞中克隆了抗体轻链、重链可变区基因。所得基因可以正确编码小鼠抗体可变区。基于上述已经克隆到的A8抗体轻链、重链可变区基因，可采用基因重组的方法构建和表达多种小分子的嵌合抗体、单链抗体以及Fab等基因工程抗体，以期用于阿尔茨海默病的诊断和治疗。

公开(公告)号：CN101531717A

公开(公告)日：2009-09-16

申请号：CN200910082077.7

申请日：2009-04-22

Applicant: 北京交通大学

Inventor： 何金生 ,  张莹 ,  王鑫 ,  洪涛

IPC: C07K16/18 ,  G01N33/577 ,  A61K39/395 ,  A61P25/28

Abstract: 本发明提供了一种抗阿尔茨海默病单克隆抗体，能够特异性识别和结合Aβ寡聚体，可用于制备阿尔茨海默病的诊断试剂和治疗药物。

公开(公告)号：CN116769025A

公开(公告)日：2023-09-19

申请号：CN202310726310.0

申请日：2023-06-19

Applicant: 北京交通大学

Inventor： 张莹 ,  何金生 ,  闫子迪 ,  洪涛

IPC: C07K16/18 ,  C12N15/13 ,  C12N5/20 ,  G01N33/68 ,  G01N33/577 ,  A61K39/395 ,  A61P25/28

Abstract: 本发明提供一种用于人体液淀粉样蛋白定量检测的单抗组合物及应用，属于基因工程技术领域。所述单抗组物合含有捕获抗体AB7G和检测抗体AB11A2，用于制备人体液淀粉样蛋白定量检测的试剂盒，此两种抗体分别是培养的杂交瘤细胞AB7G和AB11A2分泌的单克隆抗体。这两株杂交瘤细胞均保藏在中国典型培养物保藏中心。所述试剂盒特异性识别Aβ42寡聚体，检测的线性范围在3.9～125pg/mL，最低检测限是7.8pg/mL。试剂盒组装方式的核心技术为，单抗AB7G固定在酶标板上做捕获抗体，单抗AB11A2标记后1:2000稀释做检测抗体。同时涉及单克隆抗体AB7G和AB11A2的重链和轻链可变区基因及其编码的多肽。本发明还涉及所述抗体在制备诊断阿尔茨海默病试剂和药物的用途。

公开(公告)号：CN116622645A

公开(公告)日：2023-08-22

申请号：CN202310806673.5

申请日：2023-07-03

Applicant: 北京交通大学

Inventor： 张莹 ,  闫子迪 ,  何金生 ,  洪涛

IPC: C12N5/20 ,  C07K16/18 ,  C12N15/13 ,  C12N5/10 ,  G01N33/68 ,  G01N33/577 ,  A61K39/395 ,  A61P25/28 ,  C12R1/91

Abstract: 本发明提供了一种特异性识别人微管相关蛋白的单克隆抗体及其应用，属于基因工程技术领域。本发明的杂交瘤细胞株能够分泌较高活性的特异性识别人微管相关蛋白的单克隆抗体，该单克隆抗体效价高，可以用于AD早期诊断与治疗研究；所述单克隆抗体作为捕获抗体，制备的人tau蛋白定量检测试剂盒，线性范围在7.8～500pg/mL，可用于脑脊液和血液样品中tau蛋白含量的检测。

公开(公告)号：CN112226444B

公开(公告)日：2022-11-04

申请号：CN202010863762.X

申请日：2020-08-25

Applicant: 北京交通大学

Inventor： 何金生 ,  付远辉 ,  刘美琴 ,  彭向雷 ,  郑妍鹏 ,  黄蕾

IPC: C12N15/45 ,  C12N15/861 ,  A61K39/155 ,  A61P31/14

Abstract: 本发明提供了一种呼吸道合胞病毒全长融合前融合糖蛋白核苷酸序列、重组腺病毒载体及其应用产品。该全长融合前融合糖蛋白核苷酸序列包括S155C、S190F、V207L和S290C四个突变位点，保留了融合糖蛋白的跨膜区及胞内区，其序列表如序列1所示。还提供了一种含有全长融合前融合糖蛋白核苷酸序列的猩猩复制缺陷型重组腺病毒载体pChAd63或人复制缺陷型重组腺病毒载体pAd26，腺病毒载体出发毒株为猩猩腺病毒63型或人腺病毒26型，缺失了腺病毒E1和E3区、且E4orf6替换为人5型腺病毒E4orf6。以及应用重组腺病毒的产品。本发明的重组腺病毒载体免疫动物后，能在短时间内诱导机体产生强烈的细胞免疫和体液免疫反应，产生的抗体对融合前F识别能力较强，具有较好的免疫效果和免疫保护作用。