公开(公告)号：CN113999938A

公开(公告)日：2022-02-01

申请号：CN202111434978.5

申请日：2021-11-29

Applicant: 中国计量科学研究院

Inventor： 董莲华 ,  王霞 ,  戴新华 ,  牛春艳 ,  张永卓 ,  杨佳怡

IPC: C12Q1/70 ,  C12Q1/686 ,  C12N15/11

Abstract: 本发明提供了一种用于检测具有传染性的活新冠病毒(SARS‑CoV‑2)的数字PCR方法及检测试剂盒，包括：用于检测SARS‑CoV‑2包膜蛋白E基因亚基因组(E‑sgRNA)和核衣壳蛋白N基因亚基因组(N‑sgRNA)的两对引物(引物1和引物2；引物3和引物4)和两条探针。本发明采用数字PCR(dPCR)技术针对新冠病毒的亚基因组进行检测，可以有效地判断出样本中是否含有传染性的新冠病毒即活病毒，可以第一时间对感染新冠病毒的病人进行确诊，还可以直接判断出该病人体内感染的病毒是否为具有传染性的活病毒，无需再取样进行病毒的体外分离和培养。从而做到对传染型和非传染型病人的精确分型和分流，减少大量医疗资源的浪费。

公开(公告)号：CN114657235B

公开(公告)日：2023-09-01

申请号：CN202210372220.1

申请日：2022-04-11

Applicant: 中国计量科学研究院

Inventor： 牛春艳 ,  戴新华 ,  董莲华 ,  王霞 ,  高运华

IPC: C12Q1/6851 ,  C12Q1/70 ,  C12N15/11 ,  G01N30/86 ,  G01N21/33 ,  C12R1/93

Abstract: 本发明提供了一种用于评估逆转录效率的方法。对所建立的或所使用的逆转录‑PCR定量方法的逆转录效率，提出一套基于同位素稀释质谱法的高准确度逆转录效率评估方案。首先通过逆转录数字PCR对目的基因的RNA进行拷贝数浓度的测定，再进一步通过同位素稀释质谱法来测定该目的基因的RNA拷贝数浓度，计算获得的两种RNA拷贝数浓度的比值，从而获得相应的逆转录体系的逆转录效率。通过对逆转录效率准确评估，修正逆转录PCR结果，从而获得目标RNA分子的准确含量，满足不同领域对RNA分子准确定值的需求。