一种分离纯化汉逊酵母表达的重组乙肝表面抗原的方法

    公开(公告)号:CN100543031C

    公开(公告)日:2009-09-23

    申请号:CN200610011217.8

    申请日:2006-01-18

    Abstract: 本发明涉及一种分离纯化汉逊酵母表达的重组乙肝表面抗原的方法,其集成了细胞破碎、层析和膜分离等技术,具体包括:将常规工艺发酵培养得到的汉逊酵母表达的重组乙肝表面抗原培养液破碎至细胞破碎率达到50~90%;离心除去细胞碎片,调节pH值和电导率后进行阴离子交换层析,收集活性回收率大于20%以上的洗脱液;合并洗脱液,再次分别调节电导率和pH值后进行疏水层析;采用超滤膜将样品浓缩;最后使用凝胶过滤柱进行凝胶过滤,得到纯度大于99%以上的汉逊酵母表达的重组乙肝表面抗原。该方法纯化活性回收率高,且纯度可达到99%以上,操作步骤少,操作周期短,成本相对较低,易于放大到工业化规模生产,具有较大的实际应用价值。

    一种利用离子液体制备多糖微球的方法

    公开(公告)号:CN106496597A

    公开(公告)日:2017-03-15

    申请号:CN201611046063.6

    申请日:2016-11-22

    Abstract: 本发明属于生物技术领域,具体涉及一种利用离子液体制备多糖微球的方法。本发明的方法,包括以下步骤:(1)溶解多糖制成多糖溶液作为水相,使用疏水性离子液体溶解油溶性乳化剂作为油相;其中,所述油相与水相的体积比为1:1-10:1,所述多糖水溶液浓度为0.1wt%-20wt%,所述油溶性乳化剂质量为水相体积的0.1%-2%g/mL;(2)将水相倒入油相,乳化形成油包水型乳滴;固化油包水型乳滴,制得多糖微球。本发明以离子液体代替有机溶剂,较好的避免了常规制备方法中需要使用大量挥发性有机溶剂的弊端,具有绿色环保的优势,制备出的微球具有良好的形貌和粒径等性质,可在生物技术及相关领域用作分离介质、细胞微载体等。

    一种分离纯化汉逊酵母表达的重组乙肝表面抗原的方法

    公开(公告)号:CN101003564A

    公开(公告)日:2007-07-25

    申请号:CN200610011217.8

    申请日:2006-01-18

    Abstract: 本发明涉及一种分离纯化汉逊酵母表达的重组乙肝表面抗原的方法,其集成了细胞破碎、层析和膜分离等技术,具体包括:将常规工艺发酵培养得到的汉逊酵母表达的重组乙肝表面抗原培养液破碎至细胞破碎率达到50~90%;离心除去细胞碎片,调节pH值和电导率后进行阴离子交换层析,收集活性回收率大于20%以上的洗脱液;合并洗脱液,再次分别调节电导率和pH值后进行疏水层析;采用超滤膜将样品浓缩;最后使用凝胶过滤柱进行凝胶过滤,得到纯度大于99%以上的汉逊酵母表达的重组乙肝表面抗原。该方法纯化活性回收率高,且纯度可达到99%以上,操作步骤少,操作周期短,成本相对较低,易于放大到工业化规模生产,具有较大的实际应用价值。

    一种琼脂糖疏水层析介质及其在纯化酵母表达HBsAg中的应用

    公开(公告)号:CN100486688C

    公开(公告)日:2009-05-13

    申请号:CN200610001813.8

    申请日:2006-01-20

    Abstract: 本发明涉及一种琼脂糖疏水层析介质,结构式如式I所示,是以琼脂糖凝胶为基质,经环氧活化后与丁硫醇偶联,制得的以硫原子为基原子、以丁基为配基、配基密度为60~1250μmol/g干胶的琼脂糖疏水层析介质;-O-R-S(CH2)3CH3式I其中:代表琼脂糖凝胶,为选自琼脂糖6FF、琼脂糖4FF、琼脂糖CL-6B、琼脂糖CL-4B、琼脂糖6B和琼脂糖4B中的一种。该琼脂糖疏水层析介质可用于纯化酵母表达HBsAg。与现有技术相比,本发明的优点在于:介质机械强度高、通透性好,介质配基密度可控,分离效果良好。该介质的制备工艺简单,易于放大。

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