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公开(公告)号：CN102986648A
公开(公告)日：2013-03-27
申请号：CN201210424884.4
申请日：2012-10-30
Applicant: 中国林业科学研究院森林生态环境与保护研究所
IPC: A01N1/02
Abstract: 本发明公开了松材线虫(Bursaphelenchus xylophilus)的玻璃化冷冻保存及解冻复苏方法，该方法包括以下步骤：(1)将松材线虫悬液与冷冻保护剂混合均匀得到混合物；将混合物进行平衡处理；(2)平衡处理后的混合物在液氮中冷冻保存；(3)解冻、复苏；其中，所述的冷冻保护剂是二甲基亚砜和卵黄。本发明对玻璃化冷冻保存方法中的各工艺参数进行了优化，筛选到了最适宜于松材线虫玻璃化冷冻保存的保护剂的种类、浓度以及包括预处理、平衡和解冻复苏在内的最适宜的处理方式。采用本发明方法冷冻保存松材线虫，冷冻后的松材线虫存活率高、冻后繁殖率高，能适用于松材线虫不同株系的冷冻保存。
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公开(公告)号：CN102919279A
公开(公告)日：2013-02-13
申请号：CN201210425997.6
申请日：2012-10-30
Applicant: 中国林业科学研究院森林生态环境与保护研究所
Abstract: 本发明公开了一种防治根结线虫的复合微生物制剂及其制备方法。所述复合微生物制剂包括：淡紫拟青霉孢子粉或发酵液、增效剂和载体；其中，所述的增效剂选自植物生长激素、诱抗剂或具有杀线效果的无机盐中的任意一种或多种。本发明从植物生长激素、诱抗剂或无机盐中筛选出能够增加淡紫拟青霉防效且不影响淡紫拟青霉孢子萌发和菌丝生长的增效剂，将所筛选到的增效剂和载体加入到淡紫拟青霉孢子粉或发酵液中制备得到防治根结线虫的复合微生物制剂。本发明复合微生物制剂对根结线虫具有良好的防治效果，还能够提高植物的抗病力并能显著促进植物根系生长。
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公开(公告)号：CN102428909A
公开(公告)日：2012-05-02
申请号：CN201110282637.0
申请日：2011-09-22
Applicant: 中国林业科学研究院森林生态环境与保护研究所
IPC: A01N1/02
Abstract: 本发明公开了一种松材线虫的冷冻保存及解冻方法，属于线虫的冷冻保存领域。本发明方法包括以下步骤：（1）预处理松材线虫悬液；（2）预处理后的松材线虫悬液中加入冷冻保护剂，平衡处理；（3）平衡处理后的松材线虫悬液程序化降温后冷冻保存；（4）解冻复苏；所述的程序化降温的程序如下：以1℃/min的降温速率将松材线虫悬液从4℃降温至-6℃；再以20℃/min的降温速率降温至-40℃;以10℃/min的升温速率升温至-20℃；最后以1-0.5℃/min的速率将松材线虫悬液降温至-45℃后投入液氮中保存。本发明冷冻保存及解冻方法能显著提高松材线虫的存活率和繁殖能力，能适用于不同株系松材线虫的冷冻保存。
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公开(公告)号：CN114058720A
公开(公告)日：2022-02-18
申请号：CN202111371801.5
申请日：2021-11-18
Applicant: 中国林业科学研究院森林生态环境与保护研究所
Abstract: 本发明公开了一种用于Lonsdalea属L.quercina和L.populi快速检测的特异性引物探针组、试剂盒、检测方法及其应用。采用本发明的引物探针组、试剂盒、方法能够有效检测Lonsdalea属的L.quercina/L.populi，该检测技术的灵敏度是普通PCR的1000倍，而富集法比非富集法检测成功率高10倍以上。本发明试剂盒和检测方法准确性高、灵敏度高，其能够快速简单地判断样品中是否存在欧美杨细菌性溃疡病菌和栎类细菌性溃疡病菌，同时本发明试剂盒可以同时检测2种病原菌，且分别利用了两对特异性引物及探针提高了2种病原菌的鉴定能力和准确性，为欧美杨溃疡病田间调查，苗木检疫、病害监测提供有效手段。
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公开(公告)号：CN106399490B
公开(公告)日：2019-12-27
申请号：CN201610801184.0
申请日：2016-09-04
Applicant: 中国林业科学研究院森林生态环境与保护研究所
IPC: C12Q1/689 , C12Q1/6844 , C12Q1/04 , C12N15/11
Abstract: 本发明公开了检测植原体的LAMP引物组及其试剂盒和应用。本发明首先针对16SrI组植原体16S基因和tuf基因保守序列的6个区域分别设计6组和2组引物，最终得到特异性强的由SEQ ID No.2、SEQ ID No.3和SEQ ID No.4、SEQ ID No.5所示的核苷酸序列组成LAMP引物组。本发明进一步公开了用所述引物组制备得到的泡桐丛枝、苦楝丛枝、桑萎缩、莴苣黄化和长春花绿变植原体的试剂盒并建立了检测方法，具有稳定性好、特异性强、灵敏度高等优点，可应用于泡桐丛枝、苦楝丛枝、桑萎缩、莴苣黄化和长春花绿变植原体的检测。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN104025904A
公开(公告)日：2014-09-10
申请号：CN201410227831.2
申请日：2014-05-27
Applicant: 中国林业科学研究院森林生态环境与保护研究所
IPC: A01G1/04
Abstract: 本发明公开了一种松茸菌丝的培养方法及专用装置，属于松茸菌丝的人工培养领域。所述专用装置包括：罐体(1)、罐盖(2)、搅拌棒(3)、搅拌叶(4)、出气口(5)、接种口(6)、两个外部循环接口(7)和(8)、取样口(9)、入气口(11)；其中罐体(1)的上部和中部呈球型，下部呈缓坡型罐脖，整个罐体(1)呈气球形。本发明进一步公开了用所述的专用装置大量培养松茸菌丝的方法。本发明松茸菌丝专用培养罐解决了松茸菌丝培养生长缓慢、难以大量生产等问题，具有体积小、成本低、能耗低、操作简便、效率高等优点，在松茸野外人工促繁和功能性代谢产物的深度利用等方面具有重要的应用潜力。
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公开(公告)号：CN102286421A
公开(公告)日：2011-12-21
申请号：CN201110274968.X
申请日：2011-09-16
Applicant: 中国林业科学研究院森林生态环境与保护研究所
Abstract: 本发明公开了一种淡紫拟青霉的液体发酵培养方法，包括：制备淡紫拟青霉孢子悬浮液；制备淡紫拟青霉的液体发酵培养基；向液体发酵培养基中接种淡紫拟青霉孢子悬浮液，发酵培养；所述液体发酵培养基的组成成分包括碳源和氮源；所述的碳源选自葡萄糖、蔗糖、麦芽糖、可溶性淀粉或玉米粉中的任一种或多种；所述的氮源选自硝酸钠、硫酸铵、蛋白胨或黄豆粉中的任一种或多种。本发明对淡紫拟青霉的发酵培养的各工艺参数，包括培养基的组成成分和用量、培养基的初始pH值、孢子悬液的接种量、发酵培养的温度和转速等进行了筛选和优化，获得了最适宜产孢的各工艺参数。本发明发酵培养方法孢子产量高、生产成本相对较低，适用于规模化生产淡紫拟青霉菌剂。
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公开(公告)号：CN101696411A
公开(公告)日：2010-04-21
申请号：CN200910235594.3
申请日：2009-09-29
Applicant: 中国林业科学研究院森林生态环境与保护研究所
Abstract: 本发明公开了一种用于PCR扩增的真菌DNA快速提取方法，包括以下步骤：(1)培养真菌，得到真菌菌丝体；(2)将真菌菌丝体置于装有裂解液的离心管中；(3)将离心管交替冻融；(4)离心，取上清，加入95％乙醇，混匀，液氮速冻，离心，弃上清，将沉淀风干，即得。本发明方法操作简单，省时省力且减少了研磨过程中真菌DNA的损失，无需用苯酚和氯仿抽提，避免了有毒试剂的接触。本发明方法所提取DNA完整性好，纯度高，收率高，可直接用于PCR扩增反应，能够高效扩增出用于克隆和测序的目的产物。本发明方法提高了真菌DNA的提取效率，降低了真菌DNA提取的成本，可有效提高真菌的分子鉴定和检测效率。
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公开(公告)号：CN114058720B
公开(公告)日：2023-07-21
申请号：CN202111371801.5
申请日：2021-11-18
Applicant: 中国林业科学研究院森林生态环境与保护研究所
Abstract: 本发明公开了一种用于Lonsdalea属L.quercina和L.populi快速检测的特异性引物探针组、试剂盒、检测方法及其应用。采用本发明的引物探针组、试剂盒、方法能够有效检测Lonsdalea属的L.quercina/L.populi，该检测技术的灵敏度是普通PCR的1000倍，而富集法比非富集法检测成功率高10倍以上。本发明试剂盒和检测方法准确性高、灵敏度高，其能够快速简单地判断样品中是否存在欧美杨细菌性溃疡病菌和栎类细菌性溃疡病菌，同时本发明试剂盒可以同时检测2种病原菌，且分别利用了两对特异性引物及探针提高了2种病原菌的鉴定能力和准确性，为欧美杨溃疡病田间调查，苗木检疫、病害监测提供有效手段。
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公开(公告)号：CN106554923B
公开(公告)日：2020-01-10
申请号：CN201610885793.9
申请日：2016-10-10
Applicant: 中国林业科学研究院森林生态环境与保护研究所
Abstract: 本发明公开了厚垣普可尼亚菌航天诱变菌株及其应用。本发明将厚垣普可尼亚菌株搭载神舟8号飞船进行航天诱变，以未搭载的原始菌株为对照，将初步筛选得到的厚垣普可尼亚菌航天诱变菌株进行了包括菌落生长速度、菌丝干重、产孢量和致病力等生物学检测并测定了耐盐性以及对苯菌灵的抗性，最终筛选得到一株耐盐性好以及对根结线虫卵的致病能力强的突变株Pc‑m‑130，其具有较强的抗逆性，能在盐碱土壤中稳定地长期存活。本发明进一步提供了含有所述航天诱变菌株的生防制剂及其在防治根结线虫中的应用。
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