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公开(公告)号：CN104357483B
公开(公告)日：2017-04-05
申请号：CN201410613163.7
申请日：2014-11-04
Applicant: 东北农业大学
IPC: C12N15/877
Abstract: 本发明公开了一种提高猪细胞重编程能力的方法及应用，属于细胞移植和胚胎发育技术领域。本发明所提供的方法是在获取并培养猪卵母细胞和猪胎儿成纤维细胞后，进行体细胞核移植，最后进行iPS诱导并进行碱性磷酸酶染色。方法中利用小分子药物GSK126进行了处理，其使用方式有以下三种：1)猪胎儿成纤维细胞在核移植前利用小分子药物GSK126进行处理；2)在猪胎儿成纤维细胞体细胞核移植后，利用小分子药物GSK126处理融合胚胎；3)用于iPS诱导的猪胎儿成纤维细胞，在培养成熟后接种前利用小分子药物GSK126进行处理。本发明所提供的方法可以显著提高克隆胚胎的发育率和iPS诱导效率，提高幅度分别达到44.7％和111.3％。
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公开(公告)号：CN102851279A
公开(公告)日：2013-01-02
申请号：CN201210134764.0
申请日：2012-05-04
Applicant: 东北农业大学
IPC: C12N15/11 , C12N15/63 , A01K67/027
CPC classification number: C12N15/907 , A01K67/0275 , A01K2217/07 , A01K2227/108 , C07H21/04 , C12N15/79 , C12N15/85 , C12N15/8509
Abstract: 本发明公布了一种猪ROSA26特异性整合位点及其应用，其核苷酸序列如SEQ ID NO.2所述，通过其衍生的打靶载体系列如SEQ ID NO.1所示。本发明采用的ROSA26特异性位点在猪或高等哺乳动物基因组中不会受到免疫介导的排斥和表观遗传修饰，能介导外源基因稳定高效的表达。提供的ROSA26特异性位点打靶载体可以高效特异的实现打靶。
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公开(公告)号：CN101921808A
公开(公告)日：2010-12-22
申请号：CN201010256337.0
申请日：2010-08-18
Applicant: 东北农业大学
IPC: C12N15/877
Abstract: 本发明公开了一种提高猪体细胞核移植效率的方法，属于繁殖或授精方法领域。通过用小分子药物Calyculin A处理供体细胞，诱使供体核染色质凝聚、甲基化升高和乙酰化降低，体细胞核表观遗传修饰的“归零”，然后进行核移植，构建重构胚，通过优化条件，选择最佳浓度10nM，及处理时间30min，使猪克隆胚胎体外发育囊胚率提高了9.7％，囊胚细胞数增加了23.78个，为提高克隆动物的生产效率奠定了基础。
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Patent Agency Ranking
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公开(公告)号：CN103468707A
公开(公告)日：2013-12-25
申请号：CN201310409329.9
申请日：2013-09-10
Applicant: 东北农业大学
Abstract: 本发明公开了一种猪印迹基因Grb10及其应用，属于分子遗传学领域。通过PCR、序列比较发现该猪Grb10基因第17外显子157位和215位碱基的SNP位点，进一步应用该位点鉴定Grb10基因的印迹状态。本发明所公开的猪印迹基因Grb10，丰富了猪印迹基因的数量，为探索印迹基因在不同物种间的保守性、调控机制以及在猪生长发育过程中的功能作用提供信息，可用于以猪作为动物模型研究人类Grb10基因异常疾病。
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公开(公告)号：CN102851279B
公开(公告)日：2013-10-16
申请号：CN201210134764.0
申请日：2012-05-04
Applicant: 东北农业大学
IPC: C12N15/11 , C12N15/63 , A01K67/027
CPC classification number: C12N15/907 , A01K67/0275 , A01K2217/07 , A01K2227/108 , C07H21/04 , C12N15/79 , C12N15/85 , C12N15/8509
Abstract: 本发明公布了一种猪ROSA26特异性整合位点及其应用，其核苷酸序列如SEQ ID NO.2所述，通过其衍生的打靶载体系列如SEQ ID NO.1所示。本发明采用的ROSA26特异性位点在猪或高等哺乳动物基因组中不会受到免疫介导的排斥和表观遗传修饰，能介导外源基因稳定高效的表达。提供的ROSA26特异性位点打靶载体可以高效特异的实现打靶。
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公开(公告)号：CN101921808B
公开(公告)日：2012-05-30
申请号：CN201010256337.0
申请日：2010-08-18
Applicant: 东北农业大学
IPC: C12N15/877
Abstract: 本发明公开了一种提高猪体细胞核移植效率的方法，属于繁殖或授精方法领域。通过用小分子药物Calyculin A处理供体细胞，诱使供体核染色质凝聚、甲基化升高和乙酰化降低，体细胞核表观遗传修饰的“归零”，然后进行核移植，构建重构胚，通过优化条件，选择最佳浓度10nM，及处理时间30min，使猪克隆胚胎体外发育囊胚率提高了9.7％，囊胚细胞数增加了23.78个，为提高克隆动物的生产效率奠定了基础。
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公开(公告)号：CN101886075B
公开(公告)日：2011-12-21
申请号：CN201010215527.8
申请日：2010-07-02
Applicant: 东北农业大学
IPC: C12N15/113 , C12N15/09
Abstract: 本发明公布了猪ROSA26启动子序列及其应用，根据鼠，牛，人中ROSA26位点的序列比对得到保守序列，根据保守序列设计引物扩增得到猪内源ROSA26启动子；得到的ROSA26启动子用于外源基因的GFP的表达，GFP蛋白在猪中得到广泛稳定的表达，可解决转基因猪外源基因表达的不稳定性以及位置效应的不可预知性，为工业化生产提供了可能。
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