产生四环素单一组分的基因工程菌株的构建方法

    公开(公告)号:CN103233034A

    公开(公告)日:2013-08-07

    申请号:CN201310143216.9

    申请日:2013-04-23

    Abstract: 本发明涉及一种生物医药技术领域的产生四环素单一组分的基因工程菌株的构建方法,包括如下步骤:对金霉素产生菌中参与金霉素合成氯化相关基因进行了基因中断,进而得到只产生四环素的基因工程菌株。本发明通过构建同源交换质粒,转入金霉素产生菌,进行DNA同源重组,将金霉素合成过程中负责氯代步骤的氯化酶基因ctcP用壮观霉素抗性基因替代,从而中断氯代步骤,得到只产四环素的基因工程菌,该菌株能够用于工业生产,且具有显著的效果:第一,该基因工程改造所得到的菌株ZT04仅生产四环素单一组分,其产量高达18.9g/L;其次,与当前发酵工艺相比在发酵过程中,不用添加溴化钾作为抑制剂,节约了生产成本,简化了工艺流程,避免了溴化钾工业污染。

    用于四霉素生物合成的蛋白系统及编码其的基因簇

    公开(公告)号:CN102516374A

    公开(公告)日:2012-06-27

    申请号:CN201110365125.0

    申请日:2011-11-17

    Abstract: 本发明涉及一种生物技术领域的用于四霉素生物合成的蛋白系统及编码其的基因簇,所述用于四霉素生物合成的蛋白系统括:由SEQ ID NO.2-SEQ ID NO.21所示的氨基酸组成的蛋白质;或在SEQ ID NO.2-SEQ ID NO.21所示的氨基酸序列中经取代、缺失或添加一个或几个氨基酸且具有同等活性的由(a)衍生的蛋白质;本发明还涉及编码所述蛋白质系统的四霉素生物合成基因簇以及该生物合成基因簇在生产四霉素中的用途。本发明提供的用于四霉素生物合成的蛋白系统及编码其的基因簇,能够实现生物合成四霉素,用于医药,工业,农业等诸多领域。

    透明颤菌血红蛋白vgbS核苷酸序列及其质粒和制备方法

    公开(公告)号:CN101805742A

    公开(公告)日:2010-08-18

    申请号:CN201010148837.2

    申请日:2010-04-17

    Abstract: 一种生物工程技术领域的透明颤菌血红蛋白vgbS核苷酸序列及其质粒和制备方法,通过在作为宿主细胞的链霉菌的vgb核苷酸序列的两端分别引入NdeI和EcoRI的酶切位点获得。并另外通过将NdeI和EcoRI将pJTU4405上的vgbS核苷酸序列切下,插入载体pIB139的对应位点,产生质粒pJTU4406。本发明涉及的vgbS核苷酸序列所表达产生蛋白的氨基酸序列与天然透明颤菌血红蛋白的完全一致,可提高链霉菌对氧的利用效率、促进菌体生长速度和提高抗生素产量。

    产生四环素单一组分的基因工程菌株的构建方法

    公开(公告)号:CN103233034B

    公开(公告)日:2016-05-04

    申请号:CN201310143216.9

    申请日:2013-04-23

    Abstract: 本发明涉及一种生物医药技术领域的产生四环素单一组分的基因工程菌株的构建方法,包括如下步骤:对金霉素产生菌中参与金霉素合成氯化相关基因进行了基因中断,进而得到只产生四环素的基因工程菌株。本发明通过构建同源交换质粒,转入金霉素产生菌,进行DNA同源重组,将金霉素合成过程中负责氯代步骤的氯化酶基因ctcP用壮观霉素抗性基因替代,从而中断氯代步骤,得到只产四环素的基因工程菌,该菌株能够用于工业生产,且具有显著的效果:第一,该基因工程改造所得到的菌株ZT04仅生产四环素单一组分,其产量高达18.9g/L;其次,与当前发酵工艺相比在发酵过程中,不用添加溴化钾作为抑制剂,节约了生产成本,简化了工艺流程,避免了溴化钾工业污染。

    磷硫酰化DNA的酶促合成方法

    公开(公告)号:CN102899316A

    公开(公告)日:2013-01-30

    申请号:CN201210091733.1

    申请日:2012-03-31

    Abstract: 本发明涉及一种生物医药技术领域的磷硫酰化DNA的酶促合成方法,该方法包括以下步骤:以DNA和L-半胱氨酸为底物,加入DNA磷硫酰化修饰酶蛋白或者含有DNA磷硫酰化修饰酶蛋白的全细胞裂解液,在合适条件下发生磷硫酰化修饰酶促反应,获得磷硫酰化修饰的DNA。本发明提供的磷硫酰化DNA的酶促合成方法,能够实现对不同长度和不同来源的DNA进行可控的修饰,并且具有序列特异性和空间构象特异性,可用于分子生物学研究、基因治疗、基因疫苗等诸多领域。

    定向积累杀念菌素单一组份FR-008-III的基因工程菌株

    公开(公告)号:CN101260380A

    公开(公告)日:2008-09-10

    申请号:CN200810035827.0

    申请日:2008-04-10

    Abstract: 本发明涉及的是一种生物医药技术领域的定向积累杀念菌素单一组份FR-008-III(Candicidin D)的基因工程菌株。在染色体上引入基因突变,从而导致杀念菌素生物合成途径中的位于聚酮合酶FscF上的功能域KR21和位于聚酮合酶FscE上的功能域DH18的催化活性位点均发生了突变,KR21突变为:第1526位酪氨酸(Y)突变为苯丙氨酸(F);DH18突变为:第3084位组氨酸(H)突变为酪氨酸(Y)以及第3083位天冬氨酸(D)突变为缬氨酸(V)。本发明定向生产杀念菌素单一组份FR-008-III,其产量是野生型菌株该组份产量的120-130%,而FR-008-III是杀念菌素3个主要组分中最具药用价值的成份。通过该工程菌可以大规模生产高纯度的杀念菌素有效组份。

    链霉菌线性质粒中抗砷基因簇

    公开(公告)号:CN1793368A

    公开(公告)日:2006-06-28

    申请号:CN200510030980.0

    申请日:2005-11-03

    Abstract: 一种基因技术领域的链霉菌线性质粒中抗砷基因簇。本发明整个线性质粒上抗砷基因簇共6个基因及其DNA序列,具体为:砷抗性基因:sasB和sasC 2个基因,砷抗性调节基因:sasR和sasR22个基因,黄素单加氧酶基因:sasO基因,硫氧还蛋白还原酶基因:sasT基因;DNA序列为序列1。本发明提供一种链霉菌FR-008线性质粒上抗砷基因簇,所提供的基因及其蛋白质,抗体可用于环境保护,工业应用上构建新的工程菌。

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