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公开(公告)号:CN107034232A
公开(公告)日:2017-08-11
申请号:CN201710265057.8
申请日:2017-04-21
Applicant: 华南农业大学
CPC classification number: C12N15/85 , C07K14/47 , C12N15/65 , C12N2510/02
Abstract: 本发明公开了一种自噬相关基因ATG16L1增强新城疫病毒复制的方法和应用,属于基因表达生物技术领域。本发明所述高效复制新城疫病毒载体为将自噬相关基因ATG16L1构建到真核表达载体pEGFP‑N1中,获得重组鸡ATG16L1的真核表达载体pEGFP‑N1‑gaATG16L1质粒。本发明成功构建重组鸡ATG16L1的真核表达质粒,不仅可以保证在显微镜下能清晰明确看到转染效果,而且ATG16L1能够加强新城疫病毒在细胞上的繁殖效率。实现了新城疫病毒的高效复制。
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公开(公告)号:CN106939042A
公开(公告)日:2017-07-11
申请号:CN201710045372.X
申请日:2017-01-19
Applicant: 华南农业大学 , 北京利昂盛生物技术有限公司
Abstract: 本发明提供一种猪α干扰素及其应用,依据大肠杆菌原核表达系统密码子的偏嗜性,选择高表达密码子设计合成一种猪α干扰素,其氨基酸序列序列如SEQ ID NO.1所示,编码其的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示。本发明制备猪α干扰素的方法简单,成本低,易于工业化生产,猪α干扰素表达量高,包涵体处理过程中变性彻底,复性蛋白得率高,本发明制得的猪α干扰素效价高,能够抑制100TCID50的水泡性口炎病毒,比活性高达108,具有较好的生物学活性功能,可用于制备预防和治疗猪的病毒感染类疾病和增强免疫功能的药物,具备广阔的市场应用前景。
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公开(公告)号:CN106399322A
公开(公告)日:2017-02-15
申请号:CN201610743783.1
申请日:2016-08-27
Applicant: 华南农业大学 , 北京利昂盛生物技术有限公司
Abstract: 本发明公开了一种鸡β干扰素优化基因及重组鸡β干扰素的生产工艺,包括以下步骤:S1、根据大肠杆菌密码子的偏好性对NCBI中已发表的鸡β干扰素基因进行密码子优化,人工合成优化后鸡β干扰素基因;S2、设计引物:根据密码子优化后的干扰素基因,设计1对引物;S3、重组表达质粒的构建;S4、重组表达质粒的转化和鉴定;S5、重组表达质粒在大肠杆菌中的诱导表达;S6、表达产物的提取与蛋白复性纯化:S61、包涵体的提取与处理;S62、包涵体变性;S63、变性液复性;S64、镍柱亲和纯化。本发明通过原核表达的方式表达并纯化出了重组鸡β干扰素蛋白,并通过细胞病变抑制法测出了该干扰素的具有抑制水泡口炎病毒繁殖的活性,活性单位达到2.73×106UI/mg。
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公开(公告)号:CN105861445A
公开(公告)日:2016-08-17
申请号:CN201610219276.8
申请日:2016-04-08
Applicant: 华南农业大学
IPC: C12N5/10 , G01N33/569 , C07K16/10 , A61K39/21 , A61P31/14 , C12Q1/70 , C12Q1/68 , C12N15/11 , C12R1/93
CPC classification number: C12N5/0603 , A61K39/00 , C07K16/1036 , C12N2510/00 , C12Q1/702 , G01N33/56983 , G01N2469/20
Abstract: 本发明提供一株抗K亚群禽白血病病毒(ALV?K)的细胞系及其应用。将ALV?K env基因插入表达载体,将构建的转移载体在鸡胚成纤维细胞系DF?1中表达,通过Zeocin药物筛选获得有Zeocin抗性、稳定表达ALV?K env基因的鸡胚成纤维细胞系DF?1/K,该细胞系保藏编号为CCTCC No.C201610。对DF?1/K细胞系进行检测和抗病毒感染分析,发现DF?1细胞系中表达的ALV?K env蛋白对ALV?K病毒具有超感染抗性,能抵抗滴度为104TCID50的病毒感染复制量,本发明的DF?1/K细胞系可用于不同亚群禽白血病病毒感染的鉴别诊断,临床诊断价值显著,应用前景广阔。
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公开(公告)号:CN105062922A
公开(公告)日:2015-11-18
申请号:CN201510494494.8
申请日:2015-08-12
Applicant: 华南农业大学
IPC: C12N1/20 , A61K35/747 , A61P31/04 , C12R1/225
Abstract: 本发明公开一种高效抑制禽源致病性大肠杆菌的乳酸杆菌及其应用。本发明的乳酸杆菌,是从健康鸡群中分离得到,命名为Lactobacillus ingluviei SCGZ-9,其保藏编号为CCTCC NO:M 2015337。Lactobacillus ingluviei SCGZ-9具有良好的耐酸和耐胆盐能力,可以有效黏附在肠道细胞,并抑制禽源致病性大肠杆菌对细胞的黏附。其分泌的上清液能够抑制禽源致病性大肠杆菌的生长繁殖。因此,该菌株可应用于制备预防和/或治疗禽源致病性大肠杆菌病的制剂,或是制备改善禽类肠道菌群生态平衡的制剂。
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公开(公告)号:CN102735853B
公开(公告)日:2014-06-04
申请号:CN201210186169.1
申请日:2012-06-07
Applicant: 广州市华南农大生物药品有限公司 , 华南农业大学
IPC: G01N33/86
Abstract: 本发明公开了一种猪流感灭活疫苗的效价测定方法,包括如下步骤:使用猪流感灭活疫苗免疫猪,免疫后21~28日后采血分离血清;去除血清中的非特异性成分,得到待检血清;将猪流感灭活抗原稀释,配制浓度为4HA单位猪流感抗原稀释液;将待检血清作倍比稀释,依次加入4HA单位猪流感抗原稀释液、1%红细胞,进行血凝抑制实验,以完全抑制4HA单位猪流感抗原的血清最高稀释度为HI效价。该方法大大缩短了测定时间,操作误差小,可控性强,批间差异小,同时也减少了用动物攻毒保护试验来检验效力时常常因为实验动物级别不同,检测结果常有的误差。
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公开(公告)号:CN103243173B
公开(公告)日:2014-05-28
申请号:CN201310079067.4
申请日:2013-03-12
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明公开了一种用于检测火鸡出血性肠炎病毒的LAMP引物。该LAMP引物由一对外围引物和一对内引物组成,其核苷酸序列如SEQ?NO.1~4所示。该引物特异性强,能严格识别靶核苷酸序列上的6个独立区域,从而避免反应混合物中存在的非靶序列的影响;扩增模板量低至10拷贝,灵敏性高。本发明的LAMP不需通过温度循环变化来扩增,反应在30~60min就能将几个拷贝的靶基因高效扩增,反应时间短;而且设备简单,检测结果可肉眼直接观察,易于判定。
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公开(公告)号:CN103740863A
公开(公告)日:2014-04-23
申请号:CN201410015168.X
申请日:2014-01-13
Applicant: 华南农业大学 , 广州迪澳生物科技有限公司
CPC classification number: C12Q1/70 , C12Q1/6844 , C12Q2531/119
Abstract: 本发明公开了一种检测禽流感病毒H7N9亚型的RT-LAMP试剂盒,该试剂盒包含6对引物,其核苷酸序列分别如SEQ?ID?No.1-12所示。本发明的试剂盒可快速、特异、灵敏地检测禽流感H7N9亚型病毒,利用浊度仪实时判断反应的进行,或在反应结束后弹入SYBR?Green?I,通过颜色反应来判断检测结果。检测HA基因的引物最低检测限为48fg/μl的H7N9?RNA;检测NA基因的引物最低检测限为4.8pg/μl的H7N9?RNA。本发明试剂盒使用方法简单、成本低廉,反应结果易于观察,特异性好,非常适用于疾病监测、现场应急以及临床标本的检测,适合大范围推广应用。
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公开(公告)号:CN102735853A
公开(公告)日:2012-10-17
申请号:CN201210186169.1
申请日:2012-06-07
Applicant: 广州市华南农大生物药品有限公司 , 华南农业大学
IPC: G01N33/86
Abstract: 本发明公开了一种猪流感灭活疫苗的效价测定方法,包括如下步骤:使用猪流感灭活疫苗免疫猪,免疫后21~28日后采血分离血清;去除血清中的非特异性成分,得到待检血清;将猪流感灭活抗原稀释,配制浓度为4HA单位猪流感抗原稀释液;将待检血清作倍比稀释,依次加入4HA单位猪流感抗原稀释液、1%红细胞,进行血凝抑制实验,以完全抑制4HA单位猪流感抗原的血清最高稀释度为HI效价。该方法大大缩短了测定时间,操作误差小,可控性强,批间差异小,同时也减少了用动物攻毒保护试验来检验效力时常常因为实验动物级别不同,检测结果常有的误差。
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公开(公告)号:CN102329784A
公开(公告)日:2012-01-25
申请号:CN201110277819.9
申请日:2011-09-19
Applicant: 华南农业大学
IPC: C12N7/04 , C12N15/85 , A61K39/12 , A61P31/14 , G01N33/543
CPC classification number: Y02A50/39
Abstract: 本发明公开了一种日本乙型脑炎病毒样颗粒(Virus Likeparticles,VLPs)及其制备方法和应用。该病毒样颗粒是由日本乙型脑炎病毒(Japanese Encephalitis Virus,JEV)的PrM/E基因和核苷酸序列如SEQIDNO:1的JEVRNA复制子组装而成。该病毒样颗粒的制备方法是将RT-PCR扩增的JEVPrM/E基因连接到Tet-onadvance表达系统的质粒pTRE-Tight中,形成重组载体,Xfect法转染HelaTet-onadvanced细胞,经HygB筛选鉴定后,有限稀释法获得可调控的稳定表达PrM/E基因的Hela细胞系,诱导可表达PrM/E蛋白,可包装出常规的病毒样颗粒;用JEV复制子RNA载体转染该Hela细胞系,可包装出具有“一过性感染”能力的病毒样颗粒。本发明的日本乙型脑炎病毒样颗粒可以用于制备疫苗或作为检测试剂,具有良好的免疫原性和反应性,安全可靠。
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