一种鞘磷脂酶D突变体及其应用

    公开(公告)号:CN112662645A

    公开(公告)日:2021-04-16

    申请号:CN202110067084.0

    申请日:2021-01-19

    Abstract: 本发明属于酶的基因工程技术领域,本发明公开了一种鞘磷脂酶D突变体及其应用,所述的鞘磷脂酶D突变体是以来自Loxoscelesarizonica的鞘磷脂酶D(Laz‑SMD)(氨基酸序列SEQ ID NO:1)的亲本序列基础上突变第78位的半胱氨酸或第84位的半胱氨酸。本发明改造获得的Laz‑SMD突变体水解溶血磷脂底物改变了原有反应只产环状磷脂酸(cPA)的特点,转而只反应产生溶血磷脂酸,本发明提供了一种利用Laz‑SMD水解溶血磷脂生产溶血磷脂酸的方法,进一步提升了该酶在药物领域的利用价值。

    一种酶法甘油解甘油三酯制备偏甘油酯的方法

    公开(公告)号:CN111909972A

    公开(公告)日:2020-11-10

    申请号:CN202010742951.1

    申请日:2020-07-29

    Abstract: 本发明公开了一种酶法甘油解甘油三酯制备偏甘油酯的方法,包括以下步骤:(1)制备固定化脂肪酶MAS1-IM;(2)酶催化甘油解反应制备偏甘油酯,按质量份计,无溶剂体系情况下:将1~10份植物油,1~4份的甘油,与0.2~2.5份固定化脂肪酶MAS1-IM混合,在40~70℃的温度下反应4~8小时,得到产物混合物;或者,有溶剂体系情况下:取将1~10份植物油,1~4份的甘油,13~39份有机相试剂,与0.2~2.5份固定化脂肪酶MAS1-IM混合,在40~70℃的温度下反应2~6小时,得到产物混合物;(3)产物混合物经分离得到偏甘油酯。本发明工艺简单,反应速率快,生成物含量高,不存在副反应。

    T1脂肪酶突变体和应用
    154.
    发明授权

    公开(公告)号:CN107916257B

    公开(公告)日:2020-07-28

    申请号:CN201810017359.8

    申请日:2018-01-09

    Abstract: 本发明公开了T1脂肪酶突变体和应用,所述突变体是对序列SEQ ID NO:1中氨基酸取代位置至少发生如下任意一种突变:(1)采用“原始氨基酸‑位置‑替换的氨基酸”表示脂肪酶突变体中单点突变的氨基酸L359S、I362E或V364N;(2)采用氨基酸序列片段置换方式发生突变,将野生型T1的288‑291位氨基酸残基Asn‑Ala‑Phe‑Ser置换成Glu‑Phe‑Thr‑Lys。突变体水解甘油酯的活性有不同程度的提高,分别是野生型T1的6、6、4、6、3、5倍,而突变体的最适反应温度及pH并没有明显变化。本发明所得突变体,更适合生物化工行业的应用,尤其适应用于难熔油脂的改性。

    一种高酸价油脂的酶法脱酸方法

    公开(公告)号:CN106566658B

    公开(公告)日:2020-06-19

    申请号:CN201610885856.0

    申请日:2016-10-10

    Abstract: 本发明公开了一种高酸价油脂的酶法脱酸方法,属于生物化工领域。该方法包括如下步骤:(1)将高酸价油脂与甘油混合,以偏甘油酯脂肪酶Lipase SMG1的突变体为催化剂,使甘油与高酸价油脂中的游离脂肪酸进行酯化反应;所述突变体的氨基酸序列如SEQ NO.1所示;(2)分离反应产物,回收油相,即获得酶法脱酸油脂。本发明利用甘油为脂肪酸的酰基受体,游离脂肪酸的去除率可以达到90%以上,中性油脂没有副反应发生,而且反应产物易分离纯化。

    一种脂肪酸的合成方法
    157.
    发明公开

    公开(公告)号:CN110835637A

    公开(公告)日:2020-02-25

    申请号:CN201911158953.X

    申请日:2019-11-22

    Abstract: 本发明公开了一种脂肪酸的合成方法,将油脂、水、甘油三酯脂肪酶、甘油二酯脂肪酶和单甘油酯脂肪酶混合进行水解反应。水解过程中使用甘油二酯脂肪酶突变体和单甘油酯脂肪酶突变体来促进甘油三酯脂肪酶水解油脂,可以显著提高合成脂肪酸的速率和纯度。当三种酶一起使用时脂肪酸的合成速率和纯度高于任何一种酶单独使用时,水解率达95%以上。本发明是一种快速、高效、绿色、便于工业化生产的合成方法。

    一种固定化脂肪酶及其制备方法和在催化合成甘油酯型PUFA中的应用

    公开(公告)号:CN105886492B

    公开(公告)日:2020-02-18

    申请号:CN201610397164.1

    申请日:2016-06-06

    Abstract: 本发明公开了一种固定化脂肪酶及其制备方法和在催化合成甘油酯型PUFA中的应用,所述脂肪酶为来源于放线菌(Streptomyces)的脂肪酶MAS1,固定化载体为XAD1180树脂。其制备方法,包括以下几个步骤:(1)将XAD1180树脂依次用乙醇、酸和碱浸泡,以去除树脂大孔中的气泡和残留物;(2)在pH 6.0‑9.0的磷酸盐缓冲液中,将MAS1脂肪酶与处理好的XAD1180树脂按25~150mg/g树脂比例混合静置,即制得固定化脂肪酶。本发明使用的固定化脂肪酶,相对于游离脂肪酶具有更佳稳定性,可重复性,节约了生产成本;同时酯化效率到达99.31%,而PUFA甘油三酯含量达到92.26%。

    一种利用高温酯酶去除废纸浆中胶黏物的方法

    公开(公告)号:CN106223096B

    公开(公告)日:2019-07-12

    申请号:CN201610594944.5

    申请日:2016-07-26

    CPC classification number: Y02W30/648

    Abstract: 本发明公开了一种利用高温酯酶去除废纸浆中胶黏物的方法,所述的酯酶为来源于宏基因组文库的酯酶EstE1,PDB ID:2C7B。具体包括如下步骤:向废纸浆中加入0.1U~1.0U/g(相对于绝干浆质量)的酯酶,处理时间45~120min,温度40~80℃,pH为5.0~9.0,搅拌速度100~150rpm。最后根据TAPPIT‑277标准法检测废纸浆中胶黏物含量。结果证实胶黏物去除率达到54.1%~66.5%,即使在高温环境下仍具有较好的去除效果。本发明利用高温酯酶EST1对废纸浆中的胶黏物进行高效降解,操作过程简便且无需额外机械设备,胶黏物去除效果明显,生产成本低、无污染。

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