检测松材线虫的方法、检测引物及其LAMP检测试剂盒

    公开(公告)号:CN103555840A

    公开(公告)日:2014-02-05

    申请号:CN201310538469.6

    申请日:2013-11-04

    CPC classification number: C12Q1/6844 C12Q2531/119

    Abstract: 本发明公开了一种检测松材线虫的方法、检测引物及其LAMP检测试剂盒。本发明提供一种检测松材线虫的方法,包括:(1)提取松树木材样品中松材线虫DNA;(2)建立LAMP反应体系,进行环介导等温扩增;(3)根据扩增产物荧光或浊度的变化,判定松树木材样品中是否存在松材线虫。本发明还提供了一种操作简便、成本低、稳定性强的从松树木材中提取松材线虫DNA的方法。本发明进一步提供了检测松材线虫的特异性强、灵敏度高的LAMP引物组。本发明还提供了松材线虫LAMP检测试剂盒,包括:LAMP引物组,反应缓冲液,DNA链置换酶和荧光染料/特异探针。本发明检测试剂盒具有特异性强、灵敏度高、检测方便快捷等优点。

    一种用于矫正树干木质部液流测定的装置

    公开(公告)号:CN102805011B

    公开(公告)日:2013-11-13

    申请号:CN201210279109.4

    申请日:2012-08-07

    Abstract: 本发明公开了一种用于矫正树干木质部液流测定的装置,包括:储水器,安装在树干木质部切口位置,在所述储水器上设置有与所述切口相通的用于储水的腔体;补水箱,用于向所述储水器自动补水,在所述补水箱内设置有用于测量水位变化的探头;数据采集器,用于接收所述探头采集的水位变化信息并进行记录;通过所述数据采集器连续记录所述补水箱内的水位变化的数据,从而自动连续观测树干木质部液流动态变化。本发明通过将储水器设置为密闭式结构,可以有效地减少其内水面的自由蒸发,从而提高了该装置测定的准确性;此外,通过在补水箱内增加水位测定探头及数据采集器可以实现数据收集的自动化和连续化。

    松材线虫的冷冻保存及解冻方法

    公开(公告)号:CN102428909B

    公开(公告)日:2013-08-28

    申请号:CN201110282637.0

    申请日:2011-09-22

    Abstract: 本发明公开了一种松材线虫的冷冻保存及解冻方法,属于线虫的冷冻保存领域。本发明方法包括以下步骤:(1)预处理松材线虫悬液;(2)预处理后的松材线虫悬液中加入冷冻保护剂,平衡处理;(3)平衡处理后的松材线虫悬液程序化降温后冷冻保存;(4)解冻复苏;所述的程序化降温的程序如下:以1℃/min的降温速率将松材线虫悬液从4℃降温至-6℃;再以20℃/min的降温速率降温至-40℃;以10℃/min的升温速率升温至-20℃;最后以1-0.5℃/min的速率将松材线虫悬液降温至-45℃后投入液氮中保存。本发明冷冻保存及解冻方法能显著提高松材线虫的存活率和繁殖能力,能适用于不同株系松材线虫的冷冻保存。

    一种用于PCR扩增的真菌DNA快速提取方法

    公开(公告)号:CN101696411B

    公开(公告)日:2012-01-11

    申请号:CN200910235594.3

    申请日:2009-09-29

    Abstract: 本发明公开了一种用于PCR扩增的真菌DNA快速提取方法,包括以下步骤:(1)培养真菌,得到真菌菌丝体;(2)将真菌菌丝体置于装有裂解液的离心管中;(3)将离心管交替冻融;(4)离心,取上清,加入95%乙醇,混匀,液氮速冻,离心,弃上清,将沉淀风干,即得。本发明方法操作简单,省时省力且减少了研磨过程中真菌DNA的损失,无需用苯酚和氯仿抽提,避免了有毒试剂的接触。本发明方法所提取DNA完整性好,纯度高,收率高,可直接用于PCR扩增反应,能够高效扩增出用于克隆和测序的目的产物。本发明方法提高了真菌DNA的提取效率,降低了真菌DNA提取的成本,可有效提高真菌的分子鉴定和检测效率。

    一种用昆虫卵建立细胞系的方法

    公开(公告)号:CN101423817A

    公开(公告)日:2009-05-06

    申请号:CN200810118629.0

    申请日:2008-08-20

    Abstract: 一种用昆虫卵建立细胞系的方法,步骤如下:1)将产下90~100小时的昆虫受精卵片用次氯酸钠溶液或甲醛溶液浸泡后再消毒;2)处理后的卵粒倒入昆虫细胞培养液中,逐一挤压卵粒释放出胚胎;3)将胚胎剪碎成组织块放入培养箱中培养;4)加入细胞培养液继续培养;5)定时更换培养液,直至增殖的细胞充满整培养瓶;6)吸出半量的细胞培养液,其中含有新增殖出的单个细胞,放入新培养瓶中并加入等量的新细胞培养液,继续放回培养箱中培养;7)周期重复步骤5)及6),细胞开始传代,细胞系建立成功;整过程在无菌下进行。所述的昆虫卵可以是鳞翅目昆虫卵;本发明方法由传统耗时1.5-2年缩减到1-3个月,优势非常明显,且重复性很强。

    双条杉天牛引诱剂和诱芯及其制备方法

    公开(公告)号:CN101061808A

    公开(公告)日:2007-10-31

    申请号:CN200610078036.7

    申请日:2006-04-30

    CPC classification number: A01N45/02 A01N65/06 A01N25/18

    Abstract: 本发明涉及一种双条杉天牛引诱剂,包括:柏木烯、罗汉柏烯、花侧柏烯、雪松醇或者柏木油和柏木烯、罗汉柏烯、花侧柏烯、雪松醇或者柏木烯、罗汉柏烯、花侧柏烯、雪松醇、α-蒎烯、β-蒎烯、3-蒈烯、柠檬烯和香叶烯;或者柏木油、α-蒎烯、β-蒎烯、3-蒈烯、柠檬烯和香叶烯;或者柏木油、甲基柏木酮、环氧柏木烷、乙酸柏木酯、甲基柏木醚,其中按1∶1的体积比进行混合均匀制成双条杉天牛引诱剂,再将其滴加到聚乙烯塑料小瓶中,制成诱芯,装入塑料袋中备用。该引诱剂具有高效、无毒、无污染、操作简便、重复使用、节省林木资源等优点。

    一种可扩展球式矩阵草原火险预测方法和装置

    公开(公告)号:CN112016762B

    公开(公告)日:2024-12-03

    申请号:CN202010951369.6

    申请日:2020-09-11

    Abstract: 本发明公开了一种可扩展球式矩阵草原火险预测方法和装置,包括如下步骤:步骤1:在火险待测草原周边选择有代表性的3类树种或灌木,将每种树种或灌木取木材部分,干燥后,制作为0.3cm、0.4cm、0.5cm直径的3个木球,为可燃物湿度球,每个径级制作3个;步骤2:将3类3个径级的可燃物湿度球以绝缘体连接成3×3的可燃物湿度球矩阵,相邻两组可燃物湿度球之间的距离大于3cm,并将不同直径的可燃物湿度球交错配置。本发明通过采集气象部门发布的未来1‑7天天气预报数据,弥补了通过气象因子间接预报的局限,可对未来1‑7天可燃物湿度球湿度进行预测,进而对未来1‑7天火险进行预测。

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