公开(公告)号：CN101423817B

公开(公告)日：2011-02-09

申请号：CN200810118629.0

申请日：2008-08-20

Applicant: 中国林业科学研究院森林生态环境与保护研究所

Inventor： 张永安 ,  温发园 ,  王玉珠 ,  曲良建 ,  王文欢

IPC: C12N5/06

Abstract: 一种用昆虫卵建立细胞系的方法，步骤如下：1)将产下90～100小时的昆虫受精卵片用次氯酸钠溶液或甲醛溶液浸泡后再消毒；2)处理后的卵粒倒入昆虫细胞培养液中，逐一挤压卵粒释放出胚胎；3)将胚胎剪碎成组织块放入培养箱中培养；4)加入细胞培养液继续培养；5)定时更换培养液，直至增殖的细胞充满整培养瓶；6)吸出半量的细胞培养液，其中含有新增殖出的单个细胞，放入新培养瓶中并加入等量的新细胞培养液，继续放回培养箱中培养；7)周期重复步骤5)及6)，细胞开始传代，细胞系建立成功；整过程在无菌下进行。所述的昆虫卵可以是鳞翅目昆虫卵；本发明方法由传统耗时1.5-2年缩减到1-3个月，优势非常明显，且重复性很强。

公开(公告)号：CN101423816A

公开(公告)日：2009-05-06

申请号：CN200810118628.6

申请日：2008-08-20

Applicant: 中国林业科学研究院森林生态环境与保护研究所

Inventor： 张永安 ,  温发园 ,  曲良建 ,  王玉珠 ,  王文欢

IPC: C12N5/06 ,  C12R1/91

Abstract: 本发明公开了一种可悬浮的杨扇舟蛾胚胎细胞系及其构建方法，该细胞系名称为Clan I，CGMCC No.2579。构建方法如下：1)将产下72－96小时的杨扇舟蛾受精卵片用次氯酸钠溶液或甲醛溶液浸泡后再消毒洗；2)将处理后的卵粒倒入昆虫细胞培养液中，逐一挤压卵粒释放出胚胎；3)将胚胎剪碎成组织块放入培养箱中培养；4)加入细胞培养液继续培养；5)定时更换培养液，直至增殖的细胞充满了整个培养瓶；6)吸出半量的细胞培养液，其中含有新增殖出的单个细胞，放入新培养瓶中并加入等量的新细胞培养液，继续放回培养箱中培养；7)周期重复步骤5)及步骤6)，细胞开始传代，细胞系建立成功；整个过程都是在无菌条件下进行的。

公开(公告)号：CN101423817A

公开(公告)日：2009-05-06

申请号：CN200810118629.0

申请日：2008-08-20

Applicant: 中国林业科学研究院森林生态环境与保护研究所

Inventor： 张永安 ,  温发园 ,  王玉珠 ,  曲良建 ,  王文欢

IPC: C12N5/06

Abstract: 一种用昆虫卵建立细胞系的方法，步骤如下：1)将产下90～100小时的昆虫受精卵片用次氯酸钠溶液或甲醛溶液浸泡后再消毒；2)处理后的卵粒倒入昆虫细胞培养液中，逐一挤压卵粒释放出胚胎；3)将胚胎剪碎成组织块放入培养箱中培养；4)加入细胞培养液继续培养；5)定时更换培养液，直至增殖的细胞充满整培养瓶；6)吸出半量的细胞培养液，其中含有新增殖出的单个细胞，放入新培养瓶中并加入等量的新细胞培养液，继续放回培养箱中培养；7)周期重复步骤5)及6)，细胞开始传代，细胞系建立成功；整过程在无菌下进行。所述的昆虫卵可以是鳞翅目昆虫卵；本发明方法由传统耗时1.5－2年缩减到1－3个月，优势非常明显，且重复性很强。