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公开(公告)号：CN118703667A
公开(公告)日：2024-09-27
申请号：CN202410750716.7
申请日：2024-06-12
Applicant: 云南农业大学
IPC: C12Q1/6895 , C12Q1/6858 , C12N15/11
Abstract: 本发明公开了一种检测与三七中人参皂苷Rg1含量相关的SNP分子标记的试剂盒在三七中人参皂苷Rg1含量性状育种中的应用，所述的SNP分子标记为SNP6‑117625901，位于Chr11染色体第117625901位碱基，其突变类型为C/T。本发明开发的KASP引物组合能准确区分人参皂苷Rg1含量高和低的三七，且能应用于三七分子辅助标记育种，缩短新品种培育周期，且检测成本较低、不受环境限制、检测结果准确性高、易重复。对于加快高人参皂苷Rg1含量三七育种的遗传改良进程，提高育种选择效率具有重要的理论和实践指导意义。
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公开(公告)号：CN116396876B
公开(公告)日：2024-06-21
申请号：CN202310174396.0
申请日：2023-02-28
Applicant: 云南农业大学
Abstract: 本发明涉及一种生产人参皂苷Rd的酿酒酵母工程菌及其构建方法，属于分子生物学和生物工程技术领域。所述的生产人参皂苷Rd的酿酒酵母工程菌是在产原人参二醇的起始菌株ZW04BY酿酒酵母中敲除β‑葡萄糖苷酶EGH1，过表达葡萄糖磷酸变位酶1、葡萄糖磷酸变位酶2和UDP‑葡萄糖焦磷酸化酶，糖基转移酶Pn1‑31、糖基转移酶PnUGT53、糖基转移酶PnUGT50和原人参二醇合成酶PPDS。本发明获得的酿酒酵母工程菌能够利用葡萄糖发酵生产人参皂苷Rd，产量为56.68±16.21mg/L；酵母生长繁殖较快，仅需发酵罐就可以生产，为人工细胞高效合成人参皂苷Rd奠定了基础。
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公开(公告)号：CN116064267B
公开(公告)日：2024-06-21
申请号：CN202211438823.3
申请日：2022-11-17
Applicant: 云南农业大学
Abstract: 本发明涉及一种生产人参皂苷Rg3的酿酒酵母工程菌及其构建方法，属于分子生物学和生物工程技术领域。本发明将糖基转移酶PnUGT50和糖基转移酶PnUGT31进行酵母密码子优化，分别在组合型启动子和G418抗性标签的作用下，插入ZW04BY酵母基因组的δ序列多拷贝位点，获得生产人参皂苷Rg3的酿酒酵母工程菌。本发明通过在起始菌株ZW04BY酿酒酵母中异源过表达人参皂苷Rg3通路合成的2个关键酶实现了人参皂苷Rg3在酿酒酵母中的生产，使其产量达到254.07±56.49mg/L，本发明的方法为人工细胞高效合成人参皂苷Rg3奠定了基础。
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公开(公告)号：CN118165972A
公开(公告)日：2024-06-11
申请号：CN202410031792.2
申请日：2024-01-09
Applicant: 云南农业大学
IPC: C12N9/90 , C12N15/61 , C12N15/81 , C12N1/19 , C12P33/00 , A61K38/52 , A61K31/575 , A61P9/00 , A61P9/10 , A61P5/00 , A61P25/00 , A61P35/00 , A61P3/10 , C12R1/865
Abstract: 本发明公开了氧化鲨烯环化酶NiOSC4和其编码产物达玛烯二醇‑Ⅱ的应用，属于合成生物学和天然药物技术领域。本发明从葫芦科植物棒锤瓜（Neoalsomitra integrifoliola）出发，克隆并功能鉴定了一个合成达玛烯二醇‑Ⅱ的三萜合酶NiOSC4编码基因，其核苷酸序列如Seq ID No.2所示，对其进行基因克隆后与表达载体pYES2连接，构建成为能够在大肠杆菌中表达的重组质粒，再将重组质粒转化至酿酒酵母中构建成为工程细胞，实现了酿酒酵母异源高效合成化合物达玛烯二醇‑Ⅱ，本发明构建的该基因工程细胞安全稳定，生产周期短，显示出其在应用开发中的重大价值。本发明提供的NiOSC4产物达玛烯二醇‑Ⅱ可用于制备抗心脑血管疾病、内分泌系统疾病、中枢神经系统疾病、抗癌、抗糖尿病的药物。
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公开(公告)号：CN117866932A
公开(公告)日：2024-04-12
申请号：CN202410031795.6
申请日：2024-01-09
Applicant: 云南农业大学
IPC: C12N9/90 , C12N15/61 , C12N15/81 , C12N1/19 , C12P33/00 , A61K38/52 , A61K31/575 , A61P37/08 , A61P17/00 , A61P35/00 , C12R1/865
Abstract: 本发明公开了氧化鲨烯环化酶NiOSC6和其编码产物葫芦二烯醇的应用，属于合成生物学和天然药物技术领域。本发明从葫芦科植物棒锤瓜（Neoalsomitra integrifoliola）出发，克隆并功能鉴定了一个合成葫芦二烯醇的三萜合酶NiOSC6编码基因，其核苷酸序列如Seq ID No.2所示，对其进行基因克隆后与表达载体pYES2连接，构建成为能够在大肠杆菌中表达的重组质粒，再将重组质粒转化至酿酒酵母中构建成为工程细胞，实现了酿酒酵母异源高效合成化合物葫芦二烯醇，本发明构建的该基因工程细胞安全稳定，生产周期短，显示出其在应用开发中的重大价值。本发明提供的NiOSC6产物葫芦二烯醇在制备抗过敏、保湿、促进皮肤细胞生长、抑制黑色素细胞增长、抗肿瘤的药物中的应用。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN117844830A
公开(公告)日：2024-04-09
申请号：CN202410119212.5
申请日：2024-01-29
Applicant: 云南农业大学 , 云南云科特色植物提取实验室有限公司
Inventor： 张广辉 , 黄春丽 , 杨生超 , 郝冰 , 陈庚 , 舒彦宇 , 李志远 , 冯孝林 , 和四梅 , 卢迎春 , 马骁 , 马飞飞 , 郭振宇 , 马迪娜 , 张建丽 , 贺雪颖 , 刘勤勤
Abstract: 本发明提供了一种雪胆细胞色素氧化酶HcCYP87D19基因，所述基因的序列如SEQNO：1所示。本发明构建了共转染雪胆细胞色素氧化酶HcCYP87D19和HcCYP81Q58的转基因酵母工程菌，该菌能够高产多种葫芦素中间体，包括11‑Carbonyl‑cucurbita‑5,23‑diene‑3β,16a,20,25‑tetrol(6)、11‑Carbonyl‑cucurbita‑5,23‑diene‑3β,16α,20,25‑tetrol(6b)、11‑Carbonyl‑cucurbita‑5,23‑diene‑16α,20,25‑triol‑3‑one(6a)、11‑Carbonyl‑cucurbita‑5,24‑diene‑16α,20,23‑triol‑3‑one(6c)，为葫芦素生产提供了来源。
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公开(公告)号：CN117821490A
公开(公告)日：2024-04-05
申请号：CN202311746115.0
申请日：2023-12-19
Applicant: 云南农业大学
IPC: C12N15/81 , C12N9/04 , C12N9/02 , C12N9/10 , C12N15/53 , C12N15/54 , C12N15/61 , C12P33/02 , C12N9/90 , C12R1/865
Abstract: 本发明公开了一种编码细胞色素P450酶的多功能基因CYP87D20构建基因工程菌DNHc87‑03的方法，该基因工程菌能催化葫芦二烯醇的C11氧化和C20位羟化生成葫芦素中间体11‑carbonyl‑Cuol和11‑carbonyl‑20β‑hydroxy‑Cuol；一种短链脱氢酶synHcSDR3构建的基因工程菌DNHc87‑S‑01能在11‑carbonyl‑Cuol和11‑carbonyl‑20β‑hydroxy‑Cuol的C3位进行脱氢反应形成酮基分别生成为11‑Carbonyl‑Cucurbita‑5,24‑dien‑3‑one和11‑Carbonyl‑20β‑hydroxy‑Cucurbita‑5,24‑dien‑3‑one，它们是合成葫芦素C/B/D/E/I等的重要中间体，采用酵母同源重组组装构建酿酒酵母底盘细胞生产目标化合物，极大地推动了对葫芦素生物合成分子机理的认知，也将为雪胆甲素和葫芦素的全合成奠定基础。
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公开(公告)号：CN117757814A
公开(公告)日：2024-03-26
申请号：CN202311424792.0
申请日：2023-10-31
Applicant: 云南农业大学
Abstract: 本发明公开了一种调控灯盏花叶数吲哚‑3‑丙酮酸单氧酶EbYUC2基因，所述调控灯盏花叶数吲哚‑3‑丙酮酸单氧酶EbYUC2基因的核酸序列如SEQ ID NO：1所示。本发明的优点是：克隆EbYUC2全长序列并构建EbYUC2植物双元表达载体分别进行拟南芥和灯盏花遗传转化。发现转基因植株中，叶数与EbYUC2、TAA1基因表达都显著增加了。同样，在转基因植物中内源生长素的含量，尤其是吲哚‑3‑乙酸，也显著增加。这些结果表明，EbYUC2可能通过调节生长素的生物合成来控制叶片数，从而为揭示控制灯盏花叶片数和开花时间的分子机理奠定了基础。
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公开(公告)号：CN117587045A
公开(公告)日：2024-02-23
申请号：CN202410062171.0
申请日：2024-01-16
Applicant: 云南农业大学
Abstract: 本发明公开了一种藜芦胆固醇22(R)‑羟化酶VnCYP90B27基因及在制备22(R)‑羟基胆固醇的应用。该藜芦胆固醇22(R)‑羟化酶VnCYP90B27基因具有如SEQ ID No.1所示的核苷酸序列，能够表达该藜芦胆固醇22（R)‑羟化酶VnCYP90B27的转基因工程菌。以胆固醇为底物，在由所述的藜芦胆固醇22（R)‑羟化酶VnCYP90B27基因编码得到的22(R)羟化酶的催化下，在胆固醇的C‑22位上进行羟基化反应，生成22(R)‑羟基胆固醇。该基因在构建22(R)‑羟基胆固醇的生物合成途径中具有重要作用。
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公开(公告)号：CN117417949A
公开(公告)日：2024-01-19
申请号：CN202311356007.2
申请日：2023-10-19
Applicant: 云南农业大学 , 云南云科特色植物提取实验室有限公司
Inventor： 张广辉 , 李志远 , 杨生超 , 郝冰 , 陈庚 , 舒彦宇 , 冯孝林 , 马迪娜 , 和四梅 , 卢迎春 , 马骁 , 马飞飞 , 郭振宇 , 黄春丽 , 贺雪颖 , 张建丽
Abstract: 本发明提供了一种雪胆细胞色素氧化酶HcCYP81Q58基因，所述基因的序列如SEQ NO：1所示。本发明构建了雪胆细胞色素氧化酶HcCYP81Q58转基因酵母工程菌，该菌能够高产多种葫芦素中间体，包括11‑Carbonyl‑cucurbita‑5,23‑diene‑3β,20,25‑triol、11‑Carbonyl‑cucurbita‑5,24‑diene‑3β,20,23‑triol、11‑Carbonyl‑cucurbita‑5,23‑diene‑20,25‑diol‑3β‑one和11‑Carbonyl‑cucurbita‑5,24‑diene‑20,23‑diol‑3β‑one，为葫芦素生产提供了来源。
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