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公开(公告)号:CN105861445B
公开(公告)日:2019-08-06
申请号:CN201610219276.8
申请日:2016-04-08
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明提供一株抗K亚群禽白血病病毒(ALV‑K)的细胞系及其应用。将ALV‑K env基因插入表达载体,将构建的转移载体在鸡胚成纤维细胞系DF‑1中表达,通过Zeocin药物筛选获得有Zeocin抗性、稳定表达ALV‑K env基因的鸡胚成纤维细胞系DF‑1/K,该细胞系保藏编号为CCTCC No.C201610。对DF‑1/K细胞系进行检测和抗病毒感染分析,发现DF‑1细胞系中表达的ALV‑K env蛋白对ALV‑K病毒具有超感染抗性,能抵抗滴度为104TCID50的病毒感染复制量,本发明的DF‑1/K细胞系可用于不同亚群禽白血病病毒感染的鉴别诊断,临床诊断价值显著,应用前景广阔。
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公开(公告)号:CN108680741A
公开(公告)日:2018-10-19
申请号:CN201810265000.2
申请日:2018-03-28
Applicant: 华南农业大学
IPC: G01N33/558 , G01N33/569
CPC classification number: G01N33/558 , G01N33/56983
Abstract: 本发明属于生物技术领域,涉及一种鸡传染性支气管炎病毒5b ELISA抗体检测试剂盒及其应用。该试剂盒包括由重组表达的IBV非结构蛋白5b包被的ELISA反应板,此外还含有稀释的IgG酶标抗体溶液、封闭液、洗涤液、样品稀释液、阳性对照样品、阴性对照样品、显色液和终止液。本发明以非结构蛋白5b作为包被抗原,成本低。本试剂盒的使用具有方便快捷、敏感性高、特异性好等优点,为IBV抗体监测、流行病学调查以及将来对IBV的疾病净化提供了一种新的有效的检测手段。
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公开(公告)号:CN107033245A
公开(公告)日:2017-08-11
申请号:CN201710265356.1
申请日:2017-04-21
Applicant: 华南农业大学
IPC: C07K16/40 , C07K16/06 , C12N15/57 , C12N15/70 , C12N9/64 , A61K39/395 , A61P31/04 , A61P31/12 , G01N33/573
CPC classification number: C07K16/40 , C07K16/065 , C07K2317/33 , C07K2317/35 , C12N9/6478 , G01N33/573 , G01N2333/96472
Abstract: 本发明提供了一种鸡caspase‑1多克隆抗体的制备方法,所述制备方法是以caspase‑1重组蛋白作为抗原免疫动物而获得所述鸡caspase‑1多克隆抗体。本发明以鸡caspase‑1为研究目标,通过基因扩增,重组载体的构建、表达、纯化与鉴定,通过制备的鸡caspase‑1多克隆抗体,能特异性识别目的蛋白,从而可以深入研究鸡caspase‑1基因家族的毒理学意义以及caspase‑1基因在病毒介导的天然免疫反应机制中的扮演的角色,为新型疫苗的研究和药物的研制提供新的靶标。同时,本发明构建的原核表达载体表达重组蛋白效率高,分离纯化方法简单,成本低,周期短。
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公开(公告)号:CN106520779A
公开(公告)日:2017-03-22
申请号:CN201610984478.1
申请日:2016-11-09
Applicant: 华南农业大学
CPC classification number: C07K14/55 , C12N15/85 , C12N2800/106 , C12N2800/22
Abstract: 本发明提供了一种通过密码子优化鸡IL-2基因提高鸡的IL-2蛋白表达效率的方法,将鸡的IL-2基因根据鸡的密码子的偏嗜性进行优化,得到的优化后的基因optiCKIL-2;将优化基因optiCKIL-2连接至真核表达载体pCAGGS构建重组质粒pCAGGoptiCKIL-2。所述通过密码子优化鸡IL-2基因提高鸡的IL-2蛋白表达效率的方法,根据鸡的密码子偏嗜性进行优化后,提高鸡IL-2的蛋白表达效率,为鸡IL-2构建DNA疫苗或作为佐剂奠定基础。
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公开(公告)号:CN106039303A
公开(公告)日:2016-10-26
申请号:CN201610457461.0
申请日:2016-06-20
Applicant: 华南农业大学
IPC: A61K39/145 , A61P31/16
CPC classification number: A61K39/12 , A61K2039/53 , C12N2760/16134
Abstract: 本发明涉及DNA疫苗技术领域,具体地,涉及一种H5亚型禽流感DNA疫苗及其制备方法,所述H5亚型禽流感DNA疫苗由H5亚型禽流感病毒HA基因和真核表达载体组成。所述的H5亚型禽流感DNA疫苗能够预防H5亚型禽流感,减少感染,对养殖业与人类健康具有十分重要的意义。
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公开(公告)号:CN105861444A
公开(公告)日:2016-08-17
申请号:CN201610219254.1
申请日:2016-04-08
Applicant: 华南农业大学
IPC: C12N5/10 , G01N33/569 , C07K16/10 , A61K39/21 , A61P31/14 , C12Q1/70 , C12Q1/68 , C12N15/11 , C12R1/93
CPC classification number: C12N5/0603 , A61K39/00 , C07K16/1036 , C12N2510/00 , C12Q1/702 , G01N33/56983 , G01N2469/20
Abstract: 本发明提供一株抗B亚群禽白血病病毒(ALV?B)的细胞系及其应用。将ALV?B env基因插入表达载体,将构建的转移载体在鸡胚成纤维细胞系DF?1中表达,通过Zeocin药物筛选获得有Zeocin抗性、稳定表达ALV?B env基因的鸡胚成纤维细胞系DF?1/B,该细胞系保藏编号为CCTCC No.C201609。对DF?1/B细胞系进行检测和抗病毒感染分析,发现DF?1细胞系中表达的ALV?B env蛋白对ALV?B病毒具有超感染抗性,能抵抗滴度为104TCID50的病毒感染复制量,本发明的DF?1/B细胞系可用于不同亚群禽白血病病毒感染的鉴别诊断,临床诊断价值显著,应用前景广阔。
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公开(公告)号:CN105062921A
公开(公告)日:2015-11-18
申请号:CN201510494491.4
申请日:2015-08-12
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明公开一种高效抑制禽致病性沙门氏菌的唾液乳杆菌及其应用。本发明的唾液乳杆菌,是从健康鸡群中分离得到,命名为Lactobacillus salivarius SCL87,其保藏编号为CCTCC NO:M2015338。该菌株具有耐酸、耐胆盐、耐胰蛋白酶及良好的黏附能力,其分泌上清液对禽类沙门氏菌具有很强的抑制作用,能有效的竞争抑制禽类沙门氏菌的生长,并且能防治禽类沙门氏菌病,促进禽类生长。本发明菌株可应用于制备防治禽类沙门氏菌感染的制剂,或者应用于制备改善禽类肠道菌群生态平衡、促进禽类生长的制剂。
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公开(公告)号:CN103243173A
公开(公告)日:2013-08-14
申请号:CN201310079067.4
申请日:2013-03-12
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明公开了一种用于检测火鸡出血性肠炎病毒的LAMP引物。该LAMP引物由一对外围引物和一对内引物组成,其核苷酸序列如SEQ NO.1~4所示。该引物特异性强,能严格识别靶核苷酸序列上的6个独立区域,从而避免反应混合物中存在的非靶序列的影响;扩增模板量低至10拷贝,灵敏性高。本发明的LAMP不需通过温度循环变化来扩增,反应在30~60min就能将几个拷贝的靶基因高效扩增,反应时间短;而且设备简单,检测结果可肉眼直接观察,易于判定。
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公开(公告)号:CN102839189A
公开(公告)日:2012-12-26
申请号:CN201210248633.5
申请日:2012-07-18
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明公开了一种利用pCold-sumo表达载体高效表达PCV 2 Cap蛋白的方法,该方法包括以下步骤:抽提PCV 2病毒的DNA,扩增得到PCV 2去核定位信号肽的Cap蛋白的基因片段;将扩增片段连接到pCold-SUMO质粒中,构建重组质粒pCold-SUMO-dCap;将重组质粒转化大肠杆菌ArcticExpress Escherichia coli,然后低温诱导表达,表达产物经纯化后得到可溶性的sumo-dCap融合蛋白。本发明的方法能成功克服PCV 2 Cap蛋白在大肠埃希菌中不表达或是表达量极低的难题;本发明方法所表达的Cap蛋白主要以可溶性形式存在、纯化方法简单可行、纯化效果很好、具有很好的免疫学反应原性,可以应用于流行病学诊断方法的建立及疫苗的研究。
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公开(公告)号:CN101220374B
公开(公告)日:2012-02-01
申请号:CN200710062631.6
申请日:2007-01-11
Applicant: 华南农业大学
IPC: C12N15/863 , A61K48/00 , A61K31/7088
Abstract: 本发明提供了一种鸡痘病毒双基因表达载体,其具有SEQ IDNO.1所示的核苷酸序列,包括启动子P7.5、LacZ基因、位于LacZ基因上的多克隆位点、稀有酶切位点Not1、鸡痘病毒DNA同源臂F11L1和F11L2、AmpR抗性标记基因、复制起点(ori)。本发明构建的双基因表达载体,最大限度地减少了载体长度,从而可以容纳更大的外源基因;增加了可用酶切位点数量,方便克隆不同的外源基因;对插入位点Not1处的启动子不作限定,可以自由选择与外源基因搭配的启动子,从而提高了表达效率,并且,采用反式表达的方法,从而提高了外源基因的表达效率。
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