一株抗K亚群禽白血病病毒的细胞系及其应用

    公开(公告)号:CN105861445B

    公开(公告)日:2019-08-06

    申请号:CN201610219276.8

    申请日:2016-04-08

    Abstract: 本发明提供一株抗K亚群禽白血病病毒(ALV‑K)的细胞系及其应用。将ALV‑K env基因插入表达载体,将构建的转移载体在鸡胚成纤维细胞系DF‑1中表达,通过Zeocin药物筛选获得有Zeocin抗性、稳定表达ALV‑K env基因的鸡胚成纤维细胞系DF‑1/K,该细胞系保藏编号为CCTCC No.C201610。对DF‑1/K细胞系进行检测和抗病毒感染分析,发现DF‑1细胞系中表达的ALV‑K env蛋白对ALV‑K病毒具有超感染抗性,能抵抗滴度为104TCID50的病毒感染复制量,本发明的DF‑1/K细胞系可用于不同亚群禽白血病病毒感染的鉴别诊断,临床诊断价值显著,应用前景广阔。

    鸡传染性支气管炎病毒5b ELISA抗体检测试剂盒及其应用

    公开(公告)号:CN108680741A

    公开(公告)日:2018-10-19

    申请号:CN201810265000.2

    申请日:2018-03-28

    CPC classification number: G01N33/558 G01N33/56983

    Abstract: 本发明属于生物技术领域,涉及一种鸡传染性支气管炎病毒5b ELISA抗体检测试剂盒及其应用。该试剂盒包括由重组表达的IBV非结构蛋白5b包被的ELISA反应板,此外还含有稀释的IgG酶标抗体溶液、封闭液、洗涤液、样品稀释液、阳性对照样品、阴性对照样品、显色液和终止液。本发明以非结构蛋白5b作为包被抗原,成本低。本试剂盒的使用具有方便快捷、敏感性高、特异性好等优点,为IBV抗体监测、流行病学调查以及将来对IBV的疾病净化提供了一种新的有效的检测手段。

    用于检测火鸡出血性肠炎病毒的LAMP引物

    公开(公告)号:CN103243173A

    公开(公告)日:2013-08-14

    申请号:CN201310079067.4

    申请日:2013-03-12

    Abstract: 本发明公开了一种用于检测火鸡出血性肠炎病毒的LAMP引物。该LAMP引物由一对外围引物和一对内引物组成,其核苷酸序列如SEQ NO.1~4所示。该引物特异性强,能严格识别靶核苷酸序列上的6个独立区域,从而避免反应混合物中存在的非靶序列的影响;扩增模板量低至10拷贝,灵敏性高。本发明的LAMP不需通过温度循环变化来扩增,反应在30~60min就能将几个拷贝的靶基因高效扩增,反应时间短;而且设备简单,检测结果可肉眼直接观察,易于判定。

    利用pCold-sumo表达载体高效表达PCV2Cap蛋白的方法

    公开(公告)号:CN102839189A

    公开(公告)日:2012-12-26

    申请号:CN201210248633.5

    申请日:2012-07-18

    Abstract: 本发明公开了一种利用pCold-sumo表达载体高效表达PCV 2 Cap蛋白的方法,该方法包括以下步骤:抽提PCV 2病毒的DNA,扩增得到PCV 2去核定位信号肽的Cap蛋白的基因片段;将扩增片段连接到pCold-SUMO质粒中,构建重组质粒pCold-SUMO-dCap;将重组质粒转化大肠杆菌ArcticExpress Escherichia coli,然后低温诱导表达,表达产物经纯化后得到可溶性的sumo-dCap融合蛋白。本发明的方法能成功克服PCV 2 Cap蛋白在大肠埃希菌中不表达或是表达量极低的难题;本发明方法所表达的Cap蛋白主要以可溶性形式存在、纯化方法简单可行、纯化效果很好、具有很好的免疫学反应原性,可以应用于流行病学诊断方法的建立及疫苗的研究。

    鸡痘病毒双基因表达载体(PG7.5N)

    公开(公告)号:CN101220374B

    公开(公告)日:2012-02-01

    申请号:CN200710062631.6

    申请日:2007-01-11

    Abstract: 本发明提供了一种鸡痘病毒双基因表达载体,其具有SEQ IDNO.1所示的核苷酸序列,包括启动子P7.5、LacZ基因、位于LacZ基因上的多克隆位点、稀有酶切位点Not1、鸡痘病毒DNA同源臂F11L1和F11L2、AmpR抗性标记基因、复制起点(ori)。本发明构建的双基因表达载体,最大限度地减少了载体长度,从而可以容纳更大的外源基因;增加了可用酶切位点数量,方便克隆不同的外源基因;对插入位点Not1处的启动子不作限定,可以自由选择与外源基因搭配的启动子,从而提高了表达效率,并且,采用反式表达的方法,从而提高了外源基因的表达效率。

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