H5亚型禽流感病毒环介导等温扩增检测的试剂盒及其应用

    公开(公告)号:CN101215610A

    公开(公告)日:2008-07-09

    申请号:CN200710302588.6

    申请日:2007-12-27

    Applicant: 扬州大学

    Abstract: H5亚型禽流感病毒环介导等温扩增检测的试剂盒及其应用,属于生物技术领域,特别涉及H5亚型禽流感病毒的检测技术领域。由反应液A和反应液B组成,将2μl待检RNA溶液加入装有反应液A的反应管中,放置于60~65℃恒温水浴箱中,经90min后在上述反应管中再加入1μl反应液B,用肉眼观察颜色变化,如颜色变为绿色,则样品为H5亚型禽流感病毒;如果颜色为黄色,则待检样品不是H5亚型禽流感病毒。本试剂盒可提供简便、快速的H5亚型禽流感病毒检测。

    一种空肠弯曲菌、结肠弯曲菌检验的方法

    公开(公告)号:CN101182568A

    公开(公告)日:2008-05-21

    申请号:CN200710191236.8

    申请日:2007-12-07

    Applicant: 扬州大学

    CPC classification number: Y02A50/451

    Abstract: 一种空肠弯曲菌、结肠弯曲菌检验的方法,涉及细菌鉴定技术,特别是鉴定空肠弯曲菌、结肠弯曲菌的检测方法。先将待检测样品用PBS预处理;再用含抗生素、生长促进剂和鸡血清浓度为10%的布氏肉汤进行选择性增菌;经一次性PCR扩增弯曲菌、空肠弯曲菌和结肠弯曲菌基因片段后;进行选择性培养基分离,最后特异性生化鉴定。本发明能形成大量的基因复制片段,方便比较,一次就能鉴定是否为空肠弯曲菌、结肠弯曲菌,较经典方法的细菌分离、鉴定方法快速、准确。

    新城疫粘膜DNA疫苗及其构建方法

    公开(公告)号:CN100352513C

    公开(公告)日:2007-12-05

    申请号:CN200410064940.3

    申请日:2004-10-10

    Applicant: 扬州大学

    Abstract: 新城疫粘膜DNA疫苗及其构建方法,涉及一种新城疫疫苗以及构建的方法,先通过反转录-聚合酶链式RT-PCR反应,扩增出新城疫病毒融合蛋白F基因;再将F基因与质粒pVAX1进行连接反应,构建DNA疫苗pVAX1-F;最后将质粒pVAX1-F转化进减毒鼠伤寒沙门氏菌SL7207中,最终获得DNA长度为4647bp的新城疫病毒DNA疫苗。本发明采用以减毒鼠伤寒沙门氏菌运送新城疫病毒DNA疫苗,构建新城疫新型粘膜疫苗SL7207(pVAX1-F)。通过口服方式(饮水或拌料)对家禽(鸡、鹅、鸽等)直接进行免疫,较传统的新城疫弱毒疫苗安全,且较传统的新城疫油乳剂灭活疫苗使用方便,可克服母源抗体干扰以及油乳剂灭活疫苗不能产生粘膜免疫应答的缺陷,并能提供对新城疫病毒强毒攻击的保护。

    新城疫新型粘膜疫苗及其构建方法

    公开(公告)号:CN1616108A

    公开(公告)日:2005-05-18

    申请号:CN200410064940.3

    申请日:2004-10-10

    Applicant: 扬州大学

    Abstract: 新城疫新型粘膜疫苗及其构建方法,涉及一种新城疫疫苗以及构建的方法,先通过反转录—聚合酶链式RT-PCR反应,扩增出新城疫病毒融合蛋白F基因;再将F基因与质粒pVAX1进行连接反应,构建DNA疫苗pVAX1-F;最后将质粒pVAX1-F转化进减毒鼠伤寒沙门氏菌SL7207中,最终获得DNA长度为4647bp的新城疫病毒DNA疫苗。本发明采用以减毒鼠伤寒沙门氏菌运送新城疫病毒DNA疫苗,构建新城疫新型粘膜疫苗SL7207(pVAX1-F)。通过口服方式(饮水或拌料)对家禽(鸡、鹅、鸽等)直接进行免疫,较传统的新城疫弱毒疫苗安全,且较传统的新城疫油乳剂灭活疫苗使用方便,可克服母源抗体干扰以及油乳剂灭活疫苗不能产生粘膜免疫应答的缺陷,并能提供对新城疫病毒强毒攻击的保护。

    非抗性筛选DNA疫苗载体及其构建方法

    公开(公告)号:CN1546669A

    公开(公告)日:2004-11-17

    申请号:CN200310112640.3

    申请日:2003-12-10

    Applicant: 扬州大学

    Abstract: 本发明涉及一种DNA疫苗载体以及构建的方法,将扩增的鼠伤寒沙门氏菌asd用pVUII和PagI双酶切;用pVUII和PagI双酶切质粒pVAX1,去除卡那霉素抗性基因;然后将asd基因与去除卡那霉素抗性基因的载体进行连接,构成长度为3114bp的新型非抗性筛选DNA疫苗载体。本发明采用染色体-质粒平衡致死系统代替抗生素抗性基因来作为DNA疫苗扩增的选择性标记,构建新型非抗性筛选DNA疫苗载体,从而避免了抗生素抗性基因的潜在性危险问题。

    一种用于检测副溶血弧菌的sgRNA及其在RPA-CRISPR/Cas12b检测中的应用

    公开(公告)号:CN119372347A

    公开(公告)日:2025-01-28

    申请号:CN202411758706.4

    申请日:2024-12-03

    Applicant: 扬州大学

    Abstract: 本发明公开了一种用于检测副溶血弧菌的sgRNA及其在RPA‑CRISPR/Cas12b检测中的应用,所述sgRNA包含如SEQ ID NO.1所示的副溶血弧菌靶标序列。本发明的RPA‑CRISPR/Cas12b检测方法为先对待测样本进行RPA扩增,所用引物的核苷酸序列如SEQ ID NO.2~3所示;再用上述的sgRNA对RPA扩增产物进行CRISPR/Cas12b检测,CRISPR/Cas12b检测结束后在485nm激发光下肉眼读取荧光信号,如有荧光信号则待测样本中含有副溶血弧菌,如没有荧光信号则待测样本中不含副溶血弧菌。本发明的检测方法最低检测限为菌浓度100CFU/mL,特异性强,使用范围广,不受场地环境、操作人员专业技术的限制,操作简单,可用于实际水产品样品中副溶血弧菌的快速检测,且结果准确。

    一株副溶血弧菌噬菌体YZUP22及其应用

    公开(公告)号:CN118460482A

    公开(公告)日:2024-08-09

    申请号:CN202410668095.8

    申请日:2024-05-28

    Applicant: 扬州大学

    Abstract: 本发明公开了一株副溶血弧菌噬菌体YZUP22及其应用,该噬菌体YZUP22保藏日期为2024年4月30日,保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(CGMCC),保藏编号为CGMCC NO.45974。本发明噬菌体YZUP22具有较宽的裂解谱和高效的裂解能力,可针对性地有效灭杀25种序列分型副溶血弧菌,可应用于大部分副溶血弧菌的防控;且毒副作用小,安全性高,可有效地杀水产养殖中的副溶血弧菌;噬菌体YZUP22在40~60℃、0~9%盐浓度、pH4~11条件下,可保持较高的活性,能够在酸碱性、低盐和高盐及高温的极端环境中保持杀菌活性,扩宽了噬菌体在副溶血弧菌防控中的应用范围。

    一种用于检测牛羊布鲁氏菌感染ELIspot试剂盒

    公开(公告)号:CN118443936A

    公开(公告)日:2024-08-06

    申请号:CN202410668098.1

    申请日:2024-05-28

    Applicant: 扬州大学

    Abstract: 本发明公开了一种用于检测牛羊布鲁氏菌感染的ELISpot试剂盒及其在牛羊布鲁氏菌感染领域的应用。所述检测试剂盒中包括:支持介质、捕获抗体、检测抗体、阴性对照和阳性对照、特异性刺激剂,特异性刺激剂为布鲁氏菌纯蛋白变应原Br‑PPA。本发明试剂盒中所采用的由杂交瘤细胞株分泌的单克隆抗体具有效价高、特异性好、与天然抗原亲和力强的优势;与布鲁氏菌试管凝集试验(SAT)、虎红平板凝集试验(RBT)、酶联免疫吸附试验(ELISA)等方法相比,能够更早地检测出牛羊布鲁氏菌感染,检测结果更为客观、准确,能更真实的反应机体细胞免疫状态,以改进现行布鲁氏菌感染的抗体检测方法中存在的准确率低、周期长、假阳性等缺点。

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