高灵敏可抛式多组分化学发光成像免疫传感器

    公开(公告)号:CN103575896A

    公开(公告)日:2014-02-12

    申请号:CN201210249219.6

    申请日:2012-07-19

    CPC classification number: G01N33/54346 G01N21/763 G01N33/6803

    Abstract: 本发明涉及一种高灵敏可抛式多组分化学发光成像免疫传感器。利用丝网印刷技术,在硅烷化载玻片上构建4×12阵列,通过在阵列点上包被不同捕获抗体,构建可抛式多组分免疫传感阵列。通过在金纳米粒子表面同时固定生物素化的捕捉DNA和多重G-四链体序列重复的信号DNA,利用G-四链体信号DNA与血红素结合形成DNA酶,制备多层DNA酶功能化金纳米粒子探针。基于夹心免疫分析,在传感阵列上形成夹心免疫复合物,通过生物素-亲和素反应,多层DNA酶功能化的金纳米粒子探针标记至不同免疫复合物上。利用DNA酶的过氧化物酶特性,催化化学发光底物H2O2-鲁米诺间的反应,获得灵敏化学发光信号,实现多种蛋白质的高灵敏图像免疫分析。该免疫传感器具有设计简单、成本低、灵敏度高、通量高、重现性好等优点,具有一定的临床应用价值。

    一种毒品检测芯片的制备方法

    公开(公告)号:CN101738428A

    公开(公告)日:2010-06-16

    申请号:CN200810177334.0

    申请日:2008-11-17

    Abstract: 本发明涉及一种一次性现场快速检验毒品芯片的制备方法,包括芯片底板的制备,芯片分离管道的准备,芯片的整合和裂缝的成型。本发明还涉及微流控芯片上毒品分离和检测的方法。本发明首次在芯片上实现包括吗啡类、氯胺酮、苯丙胺类和大麻类四大类毒品的全面分离和紫外检测,并且在芯片集合了毛细管裂缝进样的高分离效率和微流控芯片的快速分离,具有分离效率高,分析速度快,加工工艺简单,制作成本低廉等优点,适用于公安、法医现场快速检验和鉴定毒品的摄入。

    微气泡加快免疫反应的化学发光免疫检测系统

    公开(公告)号:CN101545901A

    公开(公告)日:2009-09-30

    申请号:CN200810024425.0

    申请日:2008-03-24

    Abstract: 一种微气泡加快免疫反应的化学发光免疫检测系统。该系统包括溶液传输系统、微气泡温育装置、免疫传感器、化学发光检测器和计算机。传输系统由蠕动泵(P1,P2)、微量注射泵(P3)、连接管和八通注射阀(V)组成;免疫传感器由充满抗体修饰的羧基活化树脂微珠的无色透明玻璃管制成,并置于化学发光检测器光窗上方。将待测样品和酶标抗体加入温育管后,通入氮气产生微气泡,加快免疫反应,减少预温育时间,并用微量注射泵将温育复合物注入免疫传感器,形成夹心免疫复合物。用蠕动泵(P1)通入冲洗液,洗净未结合的过量抗体后,由蠕动泵(P2)注入一体积的辣根过氧化物酶的化学发光底物,尔后蠕动泵(P1)通入载流将底物区带载入免疫传感器,产生化学发光信号,由信号强度检测样品浓度。检测完成后由蠕动泵(P1)通入再生液,可再生免疫传感器进行下一个分析流程。该检测系统成本低、快速、灵敏度高、重现性和精密度好,适合于环境监测、临床诊断、和食品安全等领域。

    有机磷杀虫剂浓度的测定方法

    公开(公告)号:CN100348971C

    公开(公告)日:2007-11-14

    申请号:CN200510038059.0

    申请日:2005-03-10

    Applicant: 南京大学

    Abstract: 本发明公开了一种有机磷杀虫剂浓度的测定方法,该方法主要包括生物传感器的制备、测试得到胆碱的氧化电流值I0、得到有机磷对酶活性的抑制分数I%,再根据抑制分数I%与有机磷杀虫剂浓度之间的线性关系进行同种、不同浓度的有机磷杀虫剂的检测。利用电化学技术简便、易行、价廉的特点,结合流动注射快速、高灵敏度,试剂低消耗的特点,实现了有机磷杀虫剂快速灵敏稳定的检测,具有分析时间短,测定成本低,检测速度和效率高的优点。

    肿瘤细胞表面抗原的原位电化学免疫测定方法

    公开(公告)号:CN1312480C

    公开(公告)日:2007-04-25

    申请号:CN200410064732.3

    申请日:2004-09-24

    Applicant: 南京大学

    Inventor: 鞠熀先 杜丹

    Abstract: 本发明建立了一种肿瘤细胞表面分化抗原的原位电化学免疫检测新方法。通过化学修饰技术成功地将肿瘤细胞固定在金胶-壳聚糖膜仿生界面。本发明利用电化学技术简便、易行、价廉的特点,结合免疫分析高选择性、高灵敏度方法,通过固定化肿瘤细胞表面结合的酶对底物的催化反应产生具有电化学活性的分子,实现了肿瘤细胞膜表面抗原的原位安培检测。该方法将制备和检测集于一电极表面,细胞所需量及其它试剂的耗量少,温育时间短,测定成本低,检测速度和效率高。由于电化学仪器操作简单、成本较低、分析速度快,可望实现临床肿瘤细胞表面各种抗原表达水平的快速测定,为肿瘤疾病的诊断与治疗提供了新途径。

    底物区带分辨化学发光多组分免疫分析方法及检测系统

    公开(公告)号:CN1908663A

    公开(公告)日:2007-02-07

    申请号:CN200610041334.9

    申请日:2006-08-16

    Applicant: 南京大学

    Inventor: 鞠熀先 付志锋

    Abstract: 一种基于底物区带分辨化学发光的多组分免疫分析新方法与检测系统,包括溶液传输系统、免疫反应器、化学发光检测器和计算机;其中传输系统由多通道蠕动泵(6)、连接管(7)和多位选向阀(8)组成。该方法是在免疫反应器中固定多种组分的包被抗体,往免疫反应器中通入样品和酶标抗体后,如两组分分别用辣根过氧化物酶和碱性磷酸酶标记,形成两种夹心免疫复合物。洗净未结合的过量抗体后,依次通入辣根过氧化物酶的化学发光底物区带、冲洗缓冲液区带和碱性磷酸酶的化学发光底物区带,由信号强度确定组分浓度。检测完成后可再生反应器进入下一分析流程。该方法速度快、成本低、重现性好、灵敏度高,适合于环境监测、临床诊断、食品安全等领域。

    恶性肿瘤电化学筛查与早期诊断仪

    公开(公告)号:CN1866018A

    公开(公告)日:2006-11-22

    申请号:CN200610040051.2

    申请日:2006-04-30

    Applicant: 南京大学

    Inventor: 鞠熀先

    CPC classification number: G01N33/5438 G01N27/30 G01N33/57484

    Abstract: 本发明公开了一种恶性肿瘤电化学筛查与早期诊断仪,该仪器的免疫测定芯片(1)通过接口与时间分辨多通道恒电位仪(2)相连接,时间分辨多通道恒电位仪(2)通过接口和数据处理与显示系统(3)相连接;其中免疫测定芯片(1)包括固定有不同抗原分子功能化膜的八个工作电极和Ag导线(a)、Ag/AgCl参比电极(b)、碳对电极(c)、绝缘膜(d);利用电极表面固定的抗原分子与样品中的抗原分子竞争温育溶液中的酶标抗体,使部分酶标抗体连接到电极表面,获得催化电流,间接获得溶液中待测的8种抗原的含量;通过软件处理,以直观易读的图像颜色,显示测定结果。本诊断仪成本低,智能化,检测快,在肿瘤的筛查和监测方面具有广阔的应用前景。

    抗凝血类杀鼠药免疫原的合成方法

    公开(公告)号:CN1233657C

    公开(公告)日:2005-12-28

    申请号:CN200310106386.6

    申请日:2003-11-21

    Abstract: 本发明公开了一种能快速准确地检测出中毒者尿液中抗凝血类杀鼠药成份的抗凝血类杀鼠药免疫原的合成方法,它以4-羟基香豆素为半抗原,利用酯化反应进行化学修饰得到香豆素-琥珀酸酯,通过混合酸酐法的氯甲酸异丁酯法进行偶联,通过葡聚糖G50凝胶柱纯化,冻干,合成出的抗凝血类杀鼠药免疫原特异性强的抗凝血类杀鼠药免疫原的结合物,该免疫原可以用于免疫动物,进一步制备出用于检测用的抗凝血类杀鼠药的单克隆抗体。本发明广泛适用于临床,生物化学,环境分析等各个领域中。

    有机磷杀虫剂浓度的测定方法

    公开(公告)号:CN1673732A

    公开(公告)日:2005-09-28

    申请号:CN200510038059.0

    申请日:2005-03-10

    Applicant: 南京大学

    Abstract: 本发明公开了一种有机磷杀虫剂浓度的测定方法,该方法主要包括生物传感器的制备、测试得到胆碱的氧化电流值I0、得到有机磷对酶活性的抑制分数I%,再根据抑制分数I%与有机磷杀虫剂浓度之间的线性关系进行同种、不同浓度的有机磷杀虫剂的检测。利用电化学技术简便、易行、价廉的特点,结合流动注射快速、高灵敏度,试剂低消耗的特点,实现了有机磷杀虫剂快速灵敏稳定的检测,具有分析时间短,测定成本低,检测速度和效率高的优点。

    肿瘤标志物的电化学免疫测定方法及微体积免疫测定芯片

    公开(公告)号:CN1614405A

    公开(公告)日:2005-05-11

    申请号:CN200410041175.3

    申请日:2004-07-05

    Inventor: 戴宗 严枫 鞠熀先

    Abstract: 肿瘤标志物的芯片电化学免疫测定方法:(1)通过化学修饰将电子传递媒介体固定在环形碳电极内表面,将该媒介体修饰的环形电极的内腔直接作为微反应池。参比电极和对电极置于反应池上方,反应池底部固定的抗原分子功能化膜;(2)当溶液中只存在适量辣根过氧化酶标记肿瘤标志物抗体时,温育后酶标抗体与反应池底部固定的抗原分子功能化膜上的抗原分子发生免疫反应使其连接在反应池底部。(3)当待测抗原溶液中含有HRP标记抗体和时,游离的免疫结合物可接触到反应室内壁固定的电子媒介体,从而可以在工作电极上获得催化H2O2氧化的催化电流,该催化电流与溶液中待测抗原含量成正比。本发明公开了相配合的微体积免疫测定芯片。

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