基于邻位触击效应的均相化学发光免疫分析方法

    公开(公告)号:CN104165999A

    公开(公告)日:2014-11-26

    申请号:CN201410190726.6

    申请日:2014-05-07

    CPC classification number: C12Q1/6804 C12Q2521/301 C12Q2525/301 C12Q2563/107

    Abstract: 本发明涉及一种基于邻位触击效应的均相化学发光免疫分析方法。该方法的检测溶液包括DNA1-抗体1偶联物、DNA2-抗体2偶联物、辅助DNA3、辅助DNA4、分子信标DNA5和限制性内切酶。目标蛋白质存在时,DNA1-抗体1与DNA2-抗体2形成夹心免疫复合物,使得分别与DNA1、DNA2杂交的DNA3、DNA4相互靠近,形成邻位触击复合物,与DNA5杂交打开其发卡结构,染料Cy5远离猝灭剂产生化学发光。复合物与DNA5形成的双链还能被内切酶识别,将DNA5剪切后打开新的DNA5,如此循环可在位放大发光,实现对目标蛋白质的高灵敏定量分析。该发明实现了蛋白质快速、一步化检测,操作简单、普适性高。

    高灵敏可抛式多组分化学发光成像免疫传感器

    公开(公告)号:CN103575896A

    公开(公告)日:2014-02-12

    申请号:CN201210249219.6

    申请日:2012-07-19

    CPC classification number: G01N33/54346 G01N21/763 G01N33/6803

    Abstract: 本发明涉及一种高灵敏可抛式多组分化学发光成像免疫传感器。利用丝网印刷技术,在硅烷化载玻片上构建4×12阵列,通过在阵列点上包被不同捕获抗体,构建可抛式多组分免疫传感阵列。通过在金纳米粒子表面同时固定生物素化的捕捉DNA和多重G-四链体序列重复的信号DNA,利用G-四链体信号DNA与血红素结合形成DNA酶,制备多层DNA酶功能化金纳米粒子探针。基于夹心免疫分析,在传感阵列上形成夹心免疫复合物,通过生物素-亲和素反应,多层DNA酶功能化的金纳米粒子探针标记至不同免疫复合物上。利用DNA酶的过氧化物酶特性,催化化学发光底物H2O2-鲁米诺间的反应,获得灵敏化学发光信号,实现多种蛋白质的高灵敏图像免疫分析。该免疫传感器具有设计简单、成本低、灵敏度高、通量高、重现性好等优点,具有一定的临床应用价值。

    基于邻位触击效应的均相化学发光免疫分析方法

    公开(公告)号:CN104165999B

    公开(公告)日:2018-08-07

    申请号:CN201410190726.6

    申请日:2014-05-07

    Abstract: 本发明涉及种基于邻位触击效应的均相化学发光免疫分析方法。该方法的检测溶液包括DNA1‑抗体1偶联物、DNA2‑抗体2偶联物、辅助DNA3、辅助DNA4、分子信标DNA5和限制性内切酶。目标蛋白质存在时,DNA1‑抗体1与DNA2‑抗体2形成夹心免疫复合物,使得分别与DNA1、DNA2杂交的DNA3、DNA4相互靠近,形成邻位触击复合物,与DNA5杂交打开其发卡结构,染料Cy5远离猝灭剂产生化学发光。复合物与DNA5形成的双链还能被内切酶识别,将DNA5剪切后打开新的DNA5,如此循环可在位放大发光,实现对目标蛋白质的高灵敏定量分析。该发明实现了蛋白质快速、步化检测,操作简单、普适性高。

    高灵敏可抛式多组分化学发光成像免疫传感器

    公开(公告)号:CN103575896B

    公开(公告)日:2015-09-23

    申请号:CN201210249219.6

    申请日:2012-07-19

    Abstract: 本发明涉及一种高灵敏可抛式多组分化学发光成像免疫传感器。利用丝网印刷技术,在硅烷化载玻片上构建4×12阵列,通过在阵列点上包被不同捕获抗体,构建可抛式多组分免疫传感阵列。通过在金纳米粒子表面同时固定生物素化的捕捉DNA和多重G-四链体序列重复的信号DNA,利用G-四链体信号DNA与血红素结合形成DNA酶,制备多层DNA酶功能化金纳米粒子探针。基于夹心免疫分析,在传感阵列上形成夹心免疫复合物,通过生物素-亲和素反应,多层DNA酶功能化的金纳米粒子探针标记至不同免疫复合物上。利用DNA酶的过氧化物酶特性,催化化学发光底物H2O2-鲁米诺间的反应,获得灵敏化学发光信号,实现多种蛋白质的高灵敏图像免疫分析。该免疫传感器具有设计简单、成本低、灵敏度高、通量高、重现性好等优点,具有一定的临床应用价值。

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