同时检测单增李斯特菌和伊氏李斯特菌的双重PCR方法

    公开(公告)号:CN107988330A

    公开(公告)日:2018-05-04

    申请号:CN201711305271.8

    申请日:2017-12-11

    Abstract: 本发明公开了同时检测单增李斯特菌和伊氏利斯特菌的双重PCR方法。属于食源性致病菌检测技术领域。本发明针对新发掘的单增李斯特菌特异性基因LMOf2365_0970和伊氏利斯特菌特异性基因AX25_00730设计引物和探针,该检测方法能够有效地检测出食品中的单增李斯特菌和伊氏利斯特菌,对两种目标菌的检测限为N×102CFU/mL,荧光定量PCR检测时间小于40min,具有检测灵敏度高、特异性好、抗干扰能力强的特点,可实现对食品中单增李斯特菌和伊氏利斯特菌快速定性和准确定量检测,达到快速筛查污染食品样本的目的。

    鉴定单增李斯特菌1/2c血清型的NASBA检测方法

    公开(公告)号:CN107723348A

    公开(公告)日:2018-02-23

    申请号:CN201711229374.0

    申请日:2017-11-29

    CPC classification number: C12Q1/6865 C12Q1/689 C12Q2531/143 C12Q2563/107

    Abstract: 本发明公开了一种鉴定单增李斯特菌1/2c血清型的NASBA检测引物及方法,属于生物技术领域。正向引物序列为5’-GAAATACATTTTGGTCTAG-3’,反向引物序列为5’-aattctaatacgactcactatagggATTACTGGGAATAACTTGA-3’,单增李斯特菌1/2c血清型检测用分子信标探针序列为5’-JOE-CGATCGAGGAAATGCTTATGCAGATATTACGATCG-DABCYL-3’,检测方法包括下列步骤:单增李斯特菌RNA提取,实时NASBA反应,定性分析。本发明构建的引物和分子信标对单增李斯特菌1/2c血清型菌株的鉴定具有高度的特异性和灵敏度,所述的检测方法操作步骤简单,检测时间短,可进行实时定性分析,并且可对活菌和死菌有效区分。

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