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公开(公告)号：CN104498475A
公开(公告)日：2015-04-08
申请号：CN201410695615.0
申请日：2014-11-26
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明属于生物技术领域，提供一种菊花抗旱性关联分子标记的获得方法，用于菊花抗旱性优良基因的定位和克隆及菊花新品种的培育。该获得方法包括a.抗旱性鉴定；b.菊花品种群体结构分析；c.菊花品种亲缘关系分析；d、与菊花抗旱性紧密关联的分子标记的确定。本方法同时运用SRAP、SCoT和EST-SSR三种分子标记技术，原理各不相同且各有针对，得到的染色条带多态性好，重复性高，可以覆盖整个基因组且条带数量非常丰富，有利于获得与抗旱性紧密相关的分子标记。共获得菊花抗旱性关联分子标记8个，实现优良抗旱品种提早选择，定向选择和准确选择，可以减少工作量，大大提高菊花抗旱基因型的选择效率，从而加快育种进程。
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公开(公告)号：CN104313155A
公开(公告)日：2015-01-28
申请号：CN201410581350.1
申请日：2014-10-27
Applicant: 南京农业大学
IPC: C12Q1/68
CPC classification number: C12Q1/6827 , C12Q1/6895 , C12Q2600/13 , C12Q2600/156
Abstract: 本发明属于生物技术领域，提供一种托桂型菊花花器特性QTL分子标记筛选方法，该种方法可用于托桂型菊花花器性状优良基因的定位和克隆及托桂型菊花新品种的培育。包括：1.试验材料及其表型数据的获得；2.菊花连锁图谱构建；3.结合表型数据和分子遗传图谱，进行托桂型菊花花器性状的QTL分析；4.托桂型菊花花器性状关联分子标记的确定。本发明以托桂型秋菊品种“QX-053”为母本和非托桂型秋菊品种“南农惊艳”为父本杂交获得的160株F1分离群体为试材，获得了多个与托桂型菊花花器性状显著关联的分子标记。托桂型菊花花器性状关联分子标记的获得，可用于托桂型菊花花器性状的优良基因的精细定位和克隆，大大提高选择效率，从而加快托桂型菊花育种进程。
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公开(公告)号：CN103882054A
公开(公告)日：2014-06-25
申请号：CN201410131935.3
申请日：2014-04-02
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明提供一种通过农杆菌注射渗透法将外源基因转入菊花或近缘种进行瞬时表达的方法，该外源基因为GUS基因，由携带35s启动子及终止子，小于10kb的过量表达载体质粒携带。主要步骤包括（1）植株的获得（2）植物表达载体pORER1-2×35s:gus的构建（3）侵染液制备（4）菊花叶片的制备（5）叶片转化（6）叶片转化后培养（7）阳性转化叶片检测。本发明通过选择合适的外植体、以农杆菌菌株作为易感菌株，通过利福平和卡那霉素选择侵染菌体；同时，以P19与农杆菌混合培养制成侵染液，P19能有效抑制植物对外源导入载体表达的沉默效应，提高表达量，并且合理优化共培养条件，使该方法转化时间缩短至45天左右，转化效率达到60%以上。本发明方法为更有效地筛选和分析菊花基因功能、蛋白质定位及进一步获得稳定转化子提供了可能。
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公开(公告)号：CN103828710A
公开(公告)日：2014-06-04
申请号：CN201410100386.3
申请日：2014-03-18
Applicant: 南京农业大学
IPC: A01H1/02
Abstract: 本发明为一种高效率菊花杂交育种的方法，属于生物技术育种领域，本发明选择杂交后代种子，经75%乙醇消毒1min及5%次氯酸钠消毒50min后，播种于含15g·L-1蔗糖的MS培养基上，并结合组织培养技术，进一步扩繁和继代培养，获得大量的无菌苗。本方法切实提高了杂交种子发芽率和成苗率，并且对于部分存在杂交不亲和性的菊花品种，可将由少量的杂交后代种子获得的无菌苗于当年进行继代扩繁，以获得较大群体的株系，从而缩短育种周期，并进一步丰富了菊花育种手段。
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公开(公告)号：CN102660557B
公开(公告)日：2013-09-25
申请号：CN201210171527.1
申请日：2012-05-29
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明属于分子生物学领域，公开了菊花水孔蛋白编码基因CmAQP及其植物表达载体和构建方法。本发明所构建的表达载体pCAMBIA 1301-CmAQP是由CmAQP基因插入到克隆载体pMD19-T simple vector，经BamH I和Xba I双酶切后连接到载体pCAMBIA 1301的BamH I和Xba I位点而得到的重组质粒。将该植物表达载体用于植物遗传转化，CmAQP基因在CaMV35S启动子的启动下超量表达，大量合成CmAQP蛋白，从而提高拟南芥种子盐胁迫下的萌发率。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN102174567B
公开(公告)日：2012-11-28
申请号：CN201110049075.5
申请日：2011-03-01
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明属于植物基因工程和转基因育种领域，涉及一种通过转DdICE1基因提高菊花抗逆性的方法，包括以下步骤：构建DdICE1基因植物表达载体；采用农杆菌介导法将其转入菊花中，进行培养初步获得抗性植株。对转化植株进行PCR、半定量及定量RT-PCR检测证实外源基因已经转入转基因植株的基因组DNA中并发生转录。对转基因植株进行抗性检测，发现与未转基因植株相比，转基因植株抗寒、抗旱和抗盐性有很大提高。本发明通过转化外源DdICE1转录因子并正常转录表达，及在逆境下诱导下游一系列抗逆基因的表达从而提高切花菊的抗逆性，为利用基因工程技术选育菊花抗逆品种提供新颖而实用的方法，将有效推动菊花生物技术育种进程。
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公开(公告)号：CN102660557A
公开(公告)日：2012-09-12
申请号：CN201210171527.1
申请日：2012-05-29
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明属于分子生物学领域，公开了菊花水孔蛋白编码基因CmAQP及其植物表达载体和构建方法。本发明所构建的表达载体pCAMBIA 1301-CmAQP是由CmAQP基因插入到克隆载体pMD19-T simple vector，经BamH I和Xba I双酶切后连接到载体pCAMBIA 1301的BamH I和Xba I位点而得到的重组质粒。将该植物表达载体用于植物遗传转化，CmAQP基因在CaMV35S启动子的启动下超量表达，大量合成CmAQP蛋白，从而提高拟南芥种子盐胁迫下的萌发率。
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公开(公告)号：CN102559923A
公开(公告)日：2012-07-11
申请号：CN201210073698.0
申请日：2012-03-20
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明属于植物病原菌的分子生物学检测领域，公开了一种快速鉴定菊花真菌病害病原菌种类的方法。该方法包括：(1)植物病样制备；(2)聚合酶链式反应(PCR)、电泳检测及片段纯化；(3)测序及结果比对确定病原菌种类。本方法突破了传统的植物真菌病害鉴定周期长、专业性强等局限性，提供的检测方法可在6小时内即可完成检测与鉴定菊花真菌病害，检测广谱性强，灵敏度高，工序简单。
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公开(公告)号：CN102106239B
公开(公告)日：2012-05-23
申请号：CN201010598839.1
申请日：2010-12-22
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 一种利用嫁接提高切花菊插穗产量和品质的方法，属于花卉种苗生产技术领域。步骤包括砧木的准备、接穗的准备、嫁接与管理和插穗的采集。与目前采用的以扦插苗为采穗母株相比，本发明利用嫁接苗作为采穗母株，生长势旺，可获得高产量和高品质的插穗。各采穗批次中黄蒿嫁接苗较扦插苗在插穗产量、平均长度、平均节数、平均粗度、平均鲜重和平均干重指标上均有提高。且插穗的扦插生根能力有所提高，最早生根天数及插穗生根苗的不定根数、根长、根粗、根系干重等指标均高于扦插苗。
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公开(公告)号：CN101520447B
公开(公告)日：2012-05-23
申请号：CN200910029626.4
申请日：2009-04-08
Applicant: 南京农业大学
IPC: G01N33/00
Abstract: 本发明利用人工接种单株隔离对菊花抗蚜虫性鉴定的方法，属于抗性育种领域。选择苗高约10cm植株移栽，用毛笔将蚜虫接到鉴定植株的茎端或未展开幼叶处，随即用圆筒罩于植株上，使植株和蚜虫处于可以正常生长繁殖的条件下。接种后3周观察统计植株上的蚜虫数量，根据蚜虫的繁殖倍率对不同菊花材料的抗蚜虫能力做出比较鉴定。本发明利用的原材料非常普通，简单易行，成本低廉，可操作性强，实用性突出；试验结果受环境或人为因素的影响小，使筛选出对蚜虫抗性强的种质资源进行菊花育种成为可能，同时可用于抗蚜虫育种后代材料的早期鉴定，大大缩短开展菊花抗蚜虫育种所需的时间，确保所育品种对蚜虫抗性的真实性、科学性和稳定性。
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