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公开(公告)号:CN108220269B
公开(公告)日:2021-07-20
申请号:CN201711471839.3
申请日:2017-12-29
Applicant: 华南理工大学
IPC: C12N9/20
Abstract: 本发明公开了一种耐过氧化氢脂肪酶AflB晶体及其制备方法,该晶体为短棱柱状形貌,其空间结构为精细三维结构,结构中含有440个氨基酸,在每个不对称单元中含有3个分子,每个分子含有21个α螺旋结构和6个β折叠结构;结构中具有α=β=γ=90°晶包元,晶体的蛋白空间群为P41212。本发明提供的耐过氧化氢脂肪酶AflB晶体为解析脂肪酶AflB分子结构提供必要条件,为后续蛋白质工程提高脂肪酶AflB性能提供基础。
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公开(公告)号:CN113088379A
公开(公告)日:2021-07-09
申请号:CN202110250534.X
申请日:2021-03-08
Applicant: 华南理工大学
IPC: C11B3/00
Abstract: 本发明公开了一种油脂脱酸方法,该方法包括以下步骤:将质粒pET28a‑CvFAP导入大肠杆菌感受态细胞,培养至OD600达到0.7~0.8时,加入IPTG孵育,将发酵液离心,取菌体沉淀,洗涤并重悬,并加入蛋白酶抑制剂,得到CvFAP@E.coli细胞制剂;在蓝光照射下,将CvFAP@E.coli细胞制剂与油脂混合反应,离心,所得上层澄清油样即为脱除FFA的油脂。本发明采用常用水相体系,反应体系简单,反应条件温和,脱酸效果好;产物为简单的烷烯烃混合物,与甘油三脂成分的熔沸点差异较大,容易利用蒸馏技术分离,且中性油脂不参与反应,CvFAP对FFA具有专一性催化反应特点,不会对中性的油脂发生作用,回收率高。
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公开(公告)号:CN112961791A
公开(公告)日:2021-06-15
申请号:CN202110205876.X
申请日:2021-02-24
Applicant: 华南理工大学
Abstract: 本发明公开一种非特异性过氧合酶的重组菌株及其构建方法和应用,属于酶工程应用领域。所述重组菌株以pPICZαA质粒为出发载体,以毕赤酵母作为宿主菌,表达非特异性过氧合酶GmaUPO;所述非特异性过氧合酶GmaUPO的氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示。本发明通过基因工程技术,成功在毕赤酵母中异源表达了GmaUPO,并优化了发酵条件,进行了重组酶的催化应用的初步研究,旨在扩大UPO生物酶的资源库,以替代现有的化学法进行芳香烃的高效清洁生产,同时为其催化应用提供一定的研究基础。
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公开(公告)号:CN109082345B
公开(公告)日:2021-06-08
申请号:CN201811112970.5
申请日:2018-09-25
Applicant: 华南理工大学
Abstract: 本发明属于生物工程与食品技术领域,具体是一种一步转化高磷脂毛油生产脂肪酸的方法,包括以下步骤:(1)配置磷脂酶和脂肪酶浓度为1‑5000U/mL的酶液,向酶液中添加可溶性盐、亲水性溶剂和高磷脂毛油,配成多液相体系;(2)将配置好的多液相体系在搅拌条件下进行酶催化反应,反应结束后,静置或离心至分为四层,收集最上层即为脂肪酸。本发明利用多液相体系同步高效分离萃取不同物质和为不同界面反应提供不同反应界面的特性,避免不同反应相互干扰,大幅提高其催化效率。同时该方法具有大幅降低分离成本、能耗小、原料利用率高、过程简单等优点。
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公开(公告)号:CN112877347A
公开(公告)日:2021-06-01
申请号:CN202110118309.0
申请日:2021-01-28
Applicant: 华南理工大学
Abstract: 本发明涉及一种TLL‑CvFAP多酶复合体及其构建方法和应用,所述构建方法,包括先构建TLL‑linker‑SpyCatcher重组蛋白工程菌和CvFAP‑linker‑SpyTag重组蛋白工程菌,然后进行表达,得到CvFAP‑linker‑SpyTag蛋白和TLL‑linker‑SpyCatcher蛋白,将上述两种蛋白在胞外混合,进行自组装,得到TLL‑CvFAP多酶复合体。所述的TLL‑CvFAP多酶复合体作为催化剂在油脂生产烷(烯)烃中应用,提高级联反应的催化效率和烷(烯)烃的得率。
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公开(公告)号:CN112852892A
公开(公告)日:2021-05-28
申请号:CN202110201740.1
申请日:2021-02-23
Applicant: 华南理工大学 , 广州永华特医营养科技有限公司
IPC: C12P7/64 , C12N11/08 , C12N11/082 , C12N9/20
Abstract: 本发明公开了一种甘油解反应制备偏甘油酯的方法,包括以下步骤:(1)制备Lipase MAS1突变体的固定化脂肪酶;Lipase MAS1突变体为MAS1‑H108A,其氨基酸序列如SEQ NO.2所示;(2)酶催化甘油解反应制备偏甘油酯,按质量份计,将1~10份植物油,1~4份的甘油,0~40份有机相试剂,与0.2~1.5份固定化脂肪酶混合,在40~55℃的温度下反应1~6小时,得到产物混合物;(3)产物混合物经分离得到偏甘油酯。本发明工艺简单,反应速率快,生成物含量高,不存在副反应。
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公开(公告)号:CN112662644A
公开(公告)日:2021-04-16
申请号:CN202110067082.1
申请日:2021-01-19
Applicant: 华南理工大学
Abstract: 本发明属于酶的基因工程技术领域,公开了一种甘油磷酸二酯磷酸二酯酶(GDPD)突变体及其应用,所述突变体是在氨基酸序列为SEQ ID NO:1的亲本序列基础上突变所得,即亲本序列中第60位的天冬氨酸和第67位的丝氨酸中的至少一个突变为除与自身同一生化特性类别氨基酸以外的其他任意一种氨基酸。本发明获得的GDPD突变体可用于催化溶血磷脂获得高纯度溶血磷脂酸,相较于野生型,突变体能够达到水解溶血磷脂只生成单一溶血磷脂酸的目的,降低了溶血磷脂酸制备过程中的纯化难度,进一步提升了该酶在药物、食品、化妆品等领域的利用价值。
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公开(公告)号:CN112359086A
公开(公告)日:2021-02-12
申请号:CN202011125055.7
申请日:2020-10-20
Applicant: 华南理工大学
Abstract: 本发明公开了一种酶法制备植物甾醇酯的方法,包括以下步骤:1)预处理:去除植物油脱臭馏出物原料油中的水分;2)将预处理后的植物油脱臭馏出物原料油加入脂肪酶MAS1突变体进行反应,将原料油中的植物甾醇转化为植物甾醇酯;所述脂肪酶MAS1突变体的氨基酸序列如SEQ NO.1所示。本发明脂肪酶对植物油脱臭馏出物中植物甾醇转化为植物甾醇酯具有较高的选择性,最终可将植物油脱臭馏出物中70%的甾醇转化为甾醇酯。同时,本方法也可将原料油中的生育酚与角鲨烯得到最大限度的保留,将产品分离后,实现植物油脱臭馏出物的高值化利用。本发明反应条件温和,操作步骤简便,采用无溶剂体系,常温常压,具有良好的经济效益和环境效益。
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公开(公告)号:CN110540979B
公开(公告)日:2021-02-02
申请号:CN201910844697.3
申请日:2019-09-07
Applicant: 华南理工大学
Abstract: 本发明公开了一种双氧水耐受的脂肪酶突变体及其应用,属于生物技术领域,本发明基于酶蛋白结构分析,设计及构建酶突变库,筛选获得对双氧水耐受性增强的脂肪酶突变体,并构建得到高效表达该突变体的毕赤酵母工程菌,该双氧水耐受性增强的脂肪酶突变体,相对于野生型耐受双氧水的能力显著增强,在1M的双氧水中处理24h,其残余活力仍保留是78%,约是野生型的4倍,该突变体可在废纸脱墨的加工过程中应用,具有良好的稳定性能,可在应用过程中寿命延长,节约生产成本和提高生产效率。
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