母猪早期妊娠诊断miRNA标志物及其应用

    公开(公告)号:CN116064845A

    公开(公告)日:2023-05-05

    申请号:CN202211712146.X

    申请日:2022-12-29

    Abstract: 本发明提供了一种母猪早期妊娠诊断miRNA标志物及其应用。本发明通过大量的研究得出血清外泌体ssc‑let‑7c在母猪妊娠和非妊娠状态下,表达量具有显著差异;具体为,母猪在妊娠第9天ssc‑let‑7c的表达量即显著低于非妊娠状态的母猪,ssc‑let‑7c可以作为母猪早期妊娠诊断的标志物。本发明为母猪早期妊娠诊断提供了一种新的分子标志物,为母猪早期妊娠诊断提供更多可选择的分子标志物,对母猪早期妊娠诊断具有相当的必要性。

    一种基于CRISPR/Cas9系统敲除猪细胞Y染色体的方法

    公开(公告)号:CN116064541A

    公开(公告)日:2023-05-05

    申请号:CN202211294282.1

    申请日:2022-10-21

    Abstract: 本发明涉及一种基于CRISPR/Cas9系统敲除猪细胞Y染色体的方法,属于生物技术领域,该方法主要包括:(1)根据生物信息学找出位于Y染色体上的特异靶向重复序列并设计相应的gRNA;(2)进行CRISPR/Cas9载体的制备;(3)将构建好的载体电转入公猪胎儿成纤维细胞中,并通过q‑PCR验证其在细胞水平的靶基因表达水平下降情况;(4)选择效率较高的gRNA电转,进行流式分选稀释获取单克隆,并对单克隆进行PCR及核型分析验证。本发明在猪的特定染色体寻找能够被特异sgRNA识别的重复序列,为特定染色体及其携带基因功能的研究提供了一种新的工具,同时也为实现大型家畜性别控制提供一种新的技术方案。

    一种卵母细胞培养液及提高卵母细胞质量的体外培养方法

    公开(公告)号:CN110846272B

    公开(公告)日:2022-11-04

    申请号:CN201911231323.0

    申请日:2019-12-05

    Abstract: 本发明提供了一种卵母细胞培养液,该培养液中含有成熟的卵泡液。成熟的卵泡液相对于未成熟的卵泡液,成熟的卵泡液对卵母细胞体外成熟有积极作用的物质丰度更高,离成熟期越近的卵泡,它的卵泡液越能促进卵母细胞IVM,并改善其质量。使用体内成熟卵泡液作为卵母细胞体外成熟培养液的组分能有效提高卵母细胞的质量,并且能降低卵母细胞中的ROS含量。由此。不仅可以用来改善各种物种(如:牛、羊等)的卵母细胞体外成熟,提高制备优质的体外受精胚胎及克隆胚胎的生产率,还可供人类辅助生殖中卵母细胞体外培养成熟的运用提供参考,以改进现有的卵母细胞体外成熟的培养体系,从而促进生物医学的发展。

    一种新型多功能酶基因HG32及应用

    公开(公告)号:CN112852845B

    公开(公告)日:2022-07-15

    申请号:CN202110156059.X

    申请日:2021-02-04

    Abstract: 本发明公开了一种新型多功能酶基因HG32及应用,该酶来源于中华竹鼠肠道微生物,能够兼容真核生物细胞表达系统,表达高生物活性的纤维素酶,其可在畜禽饲料酶制剂、转基因动物制备、食品和药品行业等领域应用,以解决植物纤维素难降解、饲料营养利用率低等问题,减轻动物排泄物中氮和、有机物等污染问题。本发明通过对竹鼠肠道微生物宏转录组测序,序列拼接,与NCBI上已有的糖苷水解酶家族进行同源性对比,筛选高表达的、同源性高于50%的疑似纤维素酶的基因,预测其信号肽,并用猪腮腺分泌蛋白信号肽替换原有的信号肽,按猪密码子偏好优化后克隆到真核表达载体上,通过脂质体转染到猪肾上皮细胞中表达,收集细胞培养上清液进行酶活分析比较后获得。

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