公开(公告)号：CN110078841A

公开(公告)日：2019-08-02

申请号：CN201910273303.3

申请日：2019-04-04

Applicant: 华南农业大学

Inventor： 王弘 ,  宋亚 ,  黄日明 ,  朱敏倩 ,  韦晓群

IPC: C08B37/00 ,  A23L33/125

Abstract: 本发明公开了一种具有免疫调节的龙珠果多糖及其制备方法和应用，其制备方法包括以下步骤：龙珠果粉末加水进行提取，取上清；加入无水乙醇，静置，收集沉淀；溶解沉淀后采用Sevag法去除蛋白质；大孔树脂柱层析法去除色素；除小分子杂质，干燥。本发明建立了一种龙珠果多糖提取工艺，其工艺方法操作简单，使用方便、合理、稳定、可量化，具有重要的应用价值。通过该方法提取到的龙珠果多糖经体外免疫调节活性评价，其显著提高巨噬细胞的增殖能力，能显著促进其分泌NO、IL-6和TNF-α，是一种具有良好免疫调节作用的天然多糖，具有重要的开发和应用价值。

公开(公告)号：CN105801512B

公开(公告)日：2019-04-12

申请号：CN201610207332.6

申请日：2016-04-01

Applicant: 华南农业大学

Inventor： 肖治理 ,  王锋 ,  王弘 ,  沈玉栋 ,  杨金易 ,  孙远明 ,  王宇 ,  戴尽波 ,  刘凤银

IPC: C07D263/26 ,  C07C323/31 ,  C07K14/765 ,  C07K14/77 ,  C07K14/795 ,  G01N33/577 ,  G01N33/531 ,  G01N21/78 ,  G01N21/31

Abstract: 本发明提供了一种同时检测呋喃它酮代谢物（AMOZ）、孔雀石绿（MG）及隐孔雀石绿（LMG）的免疫检测方法。本发明科学合成AMOZ半抗原和LMG半抗原，将其分别与载体蛋白偶联制备人工抗原。利用AMOZ人工抗原和LMG人工抗原，分别制备针对两种对象的杂交瘤细胞株，采用杂交‑杂交瘤技术制备分泌同时抗AMOZ和LMG的双特异性抗体，并成功建立多残留免疫检测方法，实现对AMOZ、MG及LMG的同时检测，对AMOZ的检测限为0.1 ng/mL，半抑制浓度为1.3 ng/mL，对LMG的检测限为4.8 ng/mL，半抑制浓度为45.3 ng/mL。本发明方法特异性强，灵敏度较高，操作方法简便，在食品中AMOZ、MG及LMG的多残留检测方面具有广泛的应用前景。

公开(公告)号：CN108362879A

公开(公告)日：2018-08-03

申请号：CN201810031882.6

申请日：2018-01-12

Applicant: 华南农业大学

Inventor： 罗林 ,  徐振林 ,  杨金易 ,  孙远明 ,  雷红涛 ,  沈玉栋 ,  王弘

IPC: G01N33/577

Abstract: 本发明公开了一种基于铂-金双金属纳米颗粒类过氧化物酶特性的组胺免疫分析方法，包括如下步骤：S1.将铂-金纳米颗粒标记到组胺单克隆抗体上，制成铂-金标抗体纳米探针；S2.向已包被有组胺抗原的酶标板中加入待测样品与S1的纳米探针，通过竞争免疫分析模式形成抗原及铂-金标抗体的免疫复合物；S3.向酶标板中加入含3,3',5,5'-四甲基联苯胺与过氧化氢的显色底物液显色，并用硫酸终止；S4.用酶标仪对其450 nm的吸收进行测定，实现对样品中组胺的定量测定。本发明方法具有操作间便、灵敏度高、稳定性好、样品通量高等优势，适用对食品中组胺快速、高通量筛查，具有较大的应用前景。

公开(公告)号：CN108218747A

公开(公告)日：2018-06-29

申请号：CN201711484702.1

申请日：2017-12-29

Applicant: 华南农业大学

Inventor： 沈玉栋 ,  李然 ,  王弘 ,  徐振林 ,  杨金易 ,  韦晓群 ,  孙远明

IPC: C07C317/40 ,  C07C315/04 ,  C07K14/795 ,  C07K14/765 ,  C07K14/77 ,  C07K16/44 ,  G01N33/94

Abstract: 本发明公开了氟苯尼考及其类似物的半抗原、人工抗原与单克隆抗体及其酶联免疫检测方法。本发明首先在氟苯尼考分子苄羟基上衍生丁二酸半酯偶联手臂得到氟苯尼考半抗原，进一步与载体蛋白偶联得到氟苯尼考人工抗原，然后免疫动物获得氟苯尼考单克隆抗体，可用于氟苯尼考及其类似物氟苯尼考胺、甲砜霉素等的检测。本发明利用所述单克隆抗体建立了氟苯尼考的酶联免疫检测方法，可用于氟苯尼考残留的特异性检测，该方法对于氟苯尼考的IC50=5.85 ng/mL，线性检测范围为1.67～20.49 ng/mL，具有灵敏度高，特异性好等显著优势，可用于快速检测食品中残留的氟苯尼考，具有广阔的应用前景。

公开(公告)号：CN105353095B

公开(公告)日：2017-10-20

申请号：CN201510782599.3

申请日：2015-11-16

Applicant: 华南农业大学

Inventor： 沈玉栋 ,  邓丽华 ,  朱彬 ,  杨金易 ,  李瑞婷 ,  徐振林 ,  王弘 ,  雷红涛 ,  孙远明

IPC: C07D487/04 ,  G01N33/53

Abstract: 本发明属于免疫检测技术领域，公开了一种西地那非及其结构类似物的免疫检测方法，即以巯基西地那非半抗原制备人工抗原，再制备得到抗体，并用于检测西地那非及其结构类似物，该方法克服了现有检测西地那非技术的缺陷和步骤，对西地那非的最大检测范围为0.024～1.21 ng/mL，灵敏度为0.17 ng/mL，检出限为0.008 ng/mL，回收率为86.0～90.8%，该方法检测快速、大大缩短了检测时间，不考虑检测人员操作熟练程度的影响，整个检测过程仅仅需要80min左右即可完成，且检出限更低、灵敏度更高。

公开(公告)号：CN107255716A

公开(公告)日：2017-10-17

申请号：CN201710482242.2

申请日：2017-06-22

Applicant: 华南农业大学

Inventor： 王弘 ,  周晓文 ,  沈玉栋 ,  王锋 ,  徐振林 ,  孙远明 ,  肖治理 ,  杨金易

IPC: G01N33/577

CPC classification number: G01N33/577

Abstract: 本发明公开了一种能特异性识别细交链孢菌酮酸的单克隆抗体及其酶联免疫检测方法。本发明首先制备了半抗原（TEA‑CMO），并分别偶联血蓝蛋白（KLH）、牛血清白蛋白（BSA）得到免疫原（TEA‑CMO‑KLH）和包被原（TEA‑CMO‑BSA）；然后通过动物免疫和杂交瘤技术获得细交链孢菌酮酸的单克隆抗体，从而以所述细交链孢菌酮酸单克隆抗体建立间接竞争酶联免疫检测方法是一种细交链孢菌酮酸残留的快速检测方法，该方法检出限（IC10）为1.00 ng/mL，IC50=18.50 ng/mL，线性检测范围为3.56～96.24 ng/mL，可以实现细交链孢菌酮酸的直接检测，且与其余9种链格孢霉毒素结构类似物均无交叉反应，方法特异性好，灵敏度高。

公开(公告)号：CN105481859A

公开(公告)日：2016-04-13

申请号：CN201510782683.5

申请日：2015-11-16

Applicant: 华南农业大学

Inventor： 沈玉栋 ,  邓丽华 ,  杨金易 ,  徐振林 ,  华彦涛 ,  王弘 ,  肖治理 ,  雷红涛 ,  孙远明

IPC: C07D471/14 ,  G01N33/543 ,  C07K14/765 ,  C07K14/77 ,  C07K14/795 ,  C07K16/44

CPC classification number: C07D471/14 ,  C07K14/765 ,  C07K14/77 ,  C07K14/795 ,  C07K16/44 ,  C07K19/00 ,  G01N33/543

Abstract: 本发明公开了一种他达那非及其结构类似物的酶联免疫检测试剂盒及其使用方法。该试剂盒包括包被有他达那非抗原的酶标板、他达那非抗体工作液、辣根过氧化物酶标记的二抗、他达那非标准品工作液、底物液、底物缓冲液、反应终止液、浓缩洗涤液。本发明同时公开了利用所述试剂盒检测保健食品中他达那非及其结构类似物的方法。本发明提供的检测他达那非及其类似物的试剂盒采用间接竞争酶联免疫吸附分析技术，最大检测范围为 0.12～7.45 ng/mL，半抑制浓度为0.933 ng/ml，检出限为0.095 ng/mL，回收率为83.0～119.2%，检出限低、灵敏度高、稳定性好，成本低，非常适合大量样品的初筛，对保健食品中他达那非的违禁添加的快速检测具有重要现实意义。

公开(公告)号：CN103091494B

公开(公告)日：2015-07-29

申请号：CN201310013604.5

申请日：2013-01-14

Applicant: 华南农业大学

Inventor： 杨金易 ,  孙远明 ,  王弘 ,  雷红涛 ,  沈玉栋 ,  徐振林 ,  李萍

IPC: G01N33/577 ,  G01N33/543 ,  G01N21/76

Abstract: 本发明公开了一种黄曲霉毒素M1的化学发光酶联免疫检测试剂盒及使用方法，属于化学发光酶联免疫检测技术领域。该检测试剂盒包括包被有黄曲霉毒素M1抗原的化学发光酶标板，黄曲霉毒素M1标准品，黄曲霉毒素M1抗体，酶标抗抗体，化学发光液A液和B液。该试剂盒的使用方法包括如下步骤：（1）待测样品的前处理；（2）依次加入黄曲霉毒素M1标准品溶液或样品、黄曲霉毒素M1抗体，竞争反应后加入酶标抗抗体，最后加入化学发光液通过化学发光免疫分析仪进行黄曲霉毒素M1的定量检测；（3）结果处理与分析。本发明提供的检测试剂盒灵敏度高、稳定性好，适合大量样品的筛查，具有重要的实际应用推广意义。

公开(公告)号：CN103197061B

公开(公告)日：2015-04-08

申请号：CN201310077177.7

申请日：2013-03-12

Applicant: 华南农业大学

Inventor： 雷红涛 ,  孙远明 ,  唐秋实 ,  王弘 ,  沈玉栋 ,  杨金易 ,  徐振林

IPC: G01N33/566

Abstract: 本发明公开了一种罗丹明B ELISA检测方法。所述方法是采用新合成的人工抗原和抗体组合建立的。所述的罗丹明B人工抗原是将罗丹明B或罗丹明B异硫氰酸酯与BSA或OVA偶联获得特异性、灵敏性较好的人工抗原，免疫获得抗体，基于获得的人工抗原和抗体筛选灵敏性和特异性最优的组合建立罗丹明B ELISA检测方法，通过该组合建立的ELISA检测方法可更好地应用于快速检测食品中非法添加的罗丹明B，具有广阔的应用前景。

公开(公告)号：CN103787946A

公开(公告)日：2014-05-14

申请号：CN201310747570.2

申请日：2013-12-31

Applicant: 华南农业大学

Inventor： 王弘 ,  孙远明 ,  王雅丽 ,  沈玉栋 ,  肖治理 ,  杨星星 ,  杨金易 ,  徐振林 ,  雷红涛

IPC: C07D207/38 ,  C07K14/765 ,  C07K14/77 ,  C07K14/795 ,  C07K16/14 ,  G01N33/569

CPC classification number: C07D207/38 ,  C07K1/1077 ,  C07K14/765 ,  C07K14/77 ,  C07K14/795 ,  C07K16/44 ,  C07K19/00 ,  G01N33/56911

Abstract: 本发明提供了一种异细交链孢菌酮酸人工抗原和抗体及其制备方法与应用，属于食品安全领域。所述异细交链孢菌酮酸人工抗原的分子结构如下所示：或所述异细交链孢菌酮酸人工抗原是通过戊二醛法与载体蛋白偶联或活泼酯法与载体蛋白偶联制备得到的。利用本发明上述人工抗原制备得到的抗体的效价可达到1：32000，最低检测限为0.01ng/mL，半抑制浓度为0.77ng/mL，产生的抗体的特异性高、灵敏度高、准确度高，为建立快速、准确、灵敏的异细交链孢菌酮酸免疫检测方法奠定了基础。