公开(公告)号：CN120025984A

公开(公告)日：2025-05-23

申请号：CN202510183837.2

申请日：2025-02-19

Applicant: 西北农林科技大学

Inventor： 华进联 ,  吴文萍 ,  陈文博 ,  李娜 ,  万仕成 ,  雒璇

IPC: C12N5/10 ,  C12N15/113 ,  C12N15/867 ,  C12Q1/02 ,  G01N33/68

Abstract: 本发明属于生物技术领域，具体涉及一种Tyrobp基因敲除巨噬细胞株的构建方法及其在布鲁氏菌LPS诱导炎症反应中的应用。本发明采用CRISPR/Cas9基因编辑技术结合慢病毒表达系统，成功构建了Tyrobp基因敲除的RAW264.7巨噬细胞株（KO Tyrobp‑RAW264.7），并通过基因组测序和Western blot方法验证了基因敲除效果。试验表明，该基因敲除细胞株在维持正常增殖能力的同时，表现出显著的吞噬功能减弱。经布鲁氏菌LPS处理后，KO Tyrobp‑RAW264.7细胞株显示炎性因子及NFκB表达水平显著升高，表明Tyrobp基因在布鲁氏菌LPS诱导的炎症反应中具有重要调控作用。本发明为深入研究布鲁氏菌抗菌免疫机制提供了新的实验模型和技术平台，在生物医学领域具有重要的应用价值。