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公开(公告)号：CN100584951C
公开(公告)日：2010-01-27
申请号：CN200710017948.8
申请日：2007-05-29
Applicant: 西北农林科技大学
IPC: C12N15/63
Abstract: 本发明公开公开了一种通用型基因打靶载体的构建方法，该方法选择正选基因(neo)和两个负选基因(HSV-tk1)，其中，在正选基因(neo)的两端加入Loxp序列，将正选基因(neo)和两个负选基因(HSV-tk1)分别连入克隆载体pGEM-3Z，合成含有Bsp14071，Nhe1，Not1，Bsu151(Cla1)，Bst11071，Pf12311，Spe1，Pst1，Sac II稀少酶切位点的序列，将这段序列插入正选基因(neo)和两个负选基因(HSV-tk1)之间，正选基因(neo)和两个负选基因(HSV-tk1)之间的酶切位点为稀少的酶切位点，从而便于不同基因作为同源臂插入。在基因打靶载体正选基因的两端加上Loxp序列便于后续工作中去除正选基因。
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公开(公告)号：CN101117636A
公开(公告)日：2008-02-06
申请号：CN200710017948.8
申请日：2007-05-29
Applicant: 西北农林科技大学
IPC: C12N15/63
Abstract: 本发明公开了一种通用型基因打靶载体的构建方法，该方法选择正选基因(neo)和两个负选基因(HSV－tk1)，其中，在正选基因(neo)的两端加入Loxp序列，将正选基因(neo)和两个负选基因(HSV－tk1)分别连入克隆载体pGEM－3Z，合成含有Bsp14071，Nhe1，Not1，Bsu151(Cla1)，Bst11071，Pf12311，Spe1，Pst1，Sac II稀少酶切位点的序列，将这段序列插入正选基因(neo)和两个负选基因(HSV－tk1)之间，正选基因(neo)和两个负选基因(HSV－tk1)之间的酶切位点为稀少的酶切位点，从而便于不同基因作为同源臂插入。在基因打靶载体正选基因的两端加上Loxp序列便于后续工作中去除正选基因。
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公开(公告)号：CN100494389C
公开(公告)日：2009-06-03
申请号：CN200610042617.5
申请日：2006-04-03
Applicant: 西北农林科技大学
IPC: C12N15/87
Abstract: 本发明公开了一种用于细胞核移植/克隆电融合的针状微电极，该针状微电极包括两个电极，它们均由粗细不同的A、B、C段组成，A段长度为20～30mm，直径为1mm；B段长度为20mm～30mm，直径为0.4mm～1mm；C段长度为5mm～10mm，直径为100μm～180μm；其中一个电极的C段为圆台形前端，另一个电极的C段为圆锥形前端。将上述电极其安装在显微操作仪的两个显微操作针的位置，借助于显微操作仪的操作手柄进行操作，操作简便、精确度高、使用速度快、实用性强。在电融合时，把供体细胞注入卵周隙后的重组体置于两微电极间，以其中一电极拨动重组体使其细胞膜接触面与两电极连线垂直，整个电融合操作时间能够比传统的融合槽法节约20～50倍，成功率提高20%以上。
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公开(公告)号：CN1834256A
公开(公告)日：2006-09-20
申请号：CN200610042617.5
申请日：2006-04-03
Applicant: 西北农林科技大学
IPC: C12N15/87
Abstract: 本发明公开了一种用于细胞核移植/克隆电融合的针状微电极，该针状微电极包括两个电极，它们均由粗细不同的A、B、C段组成，A段长度为20～30mm，直径为1mm；B段长度为20mm～30mm，直径为0.4mm～1mm；C段长度为5mm～10mm，直径为100μm～180μm；其中一个电极的C段为圆台形前端，另一个电极的C段为圆锥形前端。将上述电极其安装在显微操作仪的两个显微操作针的位置，借助于显微操作仪的操作手柄进行操作，操作简便、精确度高、使用速度快、实用性强。在电融合时，把供体细胞注入卵周隙后的重组体置于两微电极间，以其中一电极拨动重组体使其细胞膜接触面与两电极连线垂直，整个电融合操作时间能够比传统的融合槽法节约20～50倍，成功率提高20％以上。
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