一种羰基还原酶突变体及其在4-AA手性中间体合成中的应用

    公开(公告)号:CN118685378A

    公开(公告)日:2024-09-24

    申请号:CN202410973758.7

    申请日:2024-07-19

    Applicant: 福州大学

    Abstract: 本发明属于生物医药技术领域,具体涉及一种羰基还原酶突变体及4‑乙酰氧基氮杂环丁酮中间体(2S,3R)‑2‑苯甲酰氨甲基‑3‑羟基丁酸甲酯的酶催化不对称合成方法。本发明以2‑苯甲酰氨甲基‑3‑羰基丁酸甲酯为底物,利用羰基还原酶(或羰基还原酶突变体)为催化剂,在温和条件下(20‑40℃,pH 6‑9)不对称合成(2S,3R)‑2‑苯甲酰氨甲基‑3‑羟基丁酸甲酯。本发明提供的羰基还原酶突变体可以在5.5h内完全转化25%的2‑苯甲酰氨甲基‑3‑羰基丁酸甲酯(底物载量1M)合成光学纯的(2S,3R)‑2‑苯甲酰氨甲基‑3‑羟基丁酸甲酯,时空产率高达45.4g/L/h,是此前最高水平的7.3倍。该方法无需添加其它酶系和昂贵辅酶,无底物残留,方便纯化,合成收率可达95%,具有时空产率高、原子经济性高、便于纯化和绿色环保等优势。

    一种高产四氢嘧啶大肠杆菌工程菌株及四氢嘧啶的合成方法

    公开(公告)号:CN118667787A

    公开(公告)日:2024-09-20

    申请号:CN202410854076.4

    申请日:2024-06-28

    Applicant: 福州大学

    Inventor: 林娟 苏冰梅 杨雯

    Abstract: 本发明属于生物医药领域,具体涉及一种高产四氢嘧啶大肠杆菌工程菌株及四氢嘧啶的合成方法。本发明利用双质粒系统将L‑二氨基丁酸转氨酶(EctB)或其突变体、二氨基丁酸乙酰转移酶(EctA)、四氢嘧啶合成酶(EctC)和解除反馈抑制的天冬氨酸激酶(LysCfbr)等编码基因在大肠杆菌基因编辑菌株(E.coli BL21(DE3)‑Ptrc‑aspA)中过表达,构建了一株兼具高四氢嘧啶产量和高葡萄糖转化率的大肠杆菌工程菌株。该菌株在5L分批补料发酵中,可以以葡萄糖为碳源从头合成四氢嘧啶,经过75h发酵积累103g/L的四氢嘧啶,时空产率达1.37g/L/h,葡萄糖的转化率高达0.35g/g。

    一种羰基还原酶突变体及其在制备甾体激素--睾酮中的应用

    公开(公告)号:CN113528475A

    公开(公告)日:2021-10-22

    申请号:CN202110831411.5

    申请日:2021-07-22

    Applicant: 福州大学

    Abstract: 本发明属于生物工程技术领域,具体涉及一种羰基还原酶突变体及其在制备甾体激素‑‑睾酮中的应用。将羰基还原酶突变体PmCRm与甲酸脱氢酶BstFDH_m在大肠埃希氏菌中共表达,并以该共表达工程菌的静息细胞作为生物催化剂催化雄甾‑4‑烯‑3,17‑二酮合成睾酮。该生物催化剂具有较高的催化活性、区域选择性和立体选择性,可以在10 h以内完全转化28.8 g/L雄甾‑4‑烯‑3,17‑二酮生成目标产物睾酮,且无副产物产生,其底物投料量、转化率和时空转化率皆为国内生物法制备睾酮的最高水平,经过分离纯化,产物回收率高达95%以上,说明该生物催化剂是睾酮绿色合成的高效催化剂。

    一种定点突变改造热稳定性提高的琼胶酶突变体

    公开(公告)号:CN109207459A

    公开(公告)日:2019-01-15

    申请号:CN201811408686.2

    申请日:2018-11-23

    Applicant: 福州大学

    Abstract: 本发明提供一种定点突变改造热稳定性提高的琼胶酶突变体,属于基因工程与酶工程领域。本发明突变体是在SEQ ID NO.2所示的β-琼胶酶rAgaZC-1的氨基酸基础上,将第622位天冬氨酸突变为甘氨酸(D622G),突变体D622G核苷酸序列及对应的氨基酸序列如SEQ ID NO.3和SEQ ID NO.4所示。D622G的催化效率较于rAgaZC-1有17.6%的提高。热失活动力学和水解动力学分析表明,D622G的热稳定性明显提高,T5010提高1.5℃,41℃下的半衰期t1/2延长3倍,且在43℃下可以积累更多的琼胶寡糖,提高了琼胶酶在降解琼脂糖制备琼胶寡糖上的应用潜力。

    甾酮C1,2位脱氢酶突变体及其在合成醋酸四烯物中的应用

    公开(公告)号:CN118360261A

    公开(公告)日:2024-07-19

    申请号:CN202410526708.4

    申请日:2024-04-29

    Applicant: 福州大学

    Inventor: 林娟 苏冰梅 陈兵

    Abstract: 本发明公开了一种甾酮C1,2位脱氢酶突变体及其在合成醋酸四烯物中的应用,本发明通过分子生物学技术和蛋白质工程技术,挖掘并改造甾酮C1,2位脱氢酶,获得性质优良的突变体,甾酮C1,2位脱氢酶突变体的氨基酸序列分别如SEQ ID NO:5~SEQ ID NO:12所示,在递氢体和氧气的参与下,能够催化60g/L的醋酸三烯物的氧化合成醋酸四烯物,在10h内转化率达到99.1%,时空产率达5.94g/L/h,具有绿色安全、反应周期短、纯化简单、成本低廉等优势,具有极好的应用前景。

    一种3β-羟基甾体脱氢酶及其在制备去氢表雄酮中的应用

    公开(公告)号:CN115786292B

    公开(公告)日:2023-09-29

    申请号:CN202211028698.9

    申请日:2022-08-25

    Applicant: 福州大学

    Abstract: 本发明属于生物工程技术领域,具体涉及一种3β‑羟基甾体脱氢酶SfSDR及其在制备去氢表雄酮中的应用。本发明将3β‑羟基甾体脱氢酶SfSDR与葡萄糖脱氢酶BtGDH在大肠埃希氏菌中共表达,并以共表达工程菌的静息细胞作为生物催化剂协同酯酶Z03共同催化3‑乙酰氧基‑△3,5‑雄甾二烯‑17‑酮合成去氢表雄酮。该生物催化剂具有较高的催化活性、区域选择性和立体选择性,可以在6 h以内完全转化32.8 g/L的3‑乙酰氧基‑△3,5‑雄甾二烯‑17‑酮生成目标产物去氢表雄酮,无需添加有机溶剂且无副产物产生,经过分离纯化,产物回收率高达95%以上,说明该生物催化剂是去氢表雄酮绿色合成的高效催化剂。

    一种苯丙酮单加氧酶及在拉唑类药物制备中的应用

    公开(公告)号:CN113430216B

    公开(公告)日:2023-07-21

    申请号:CN202110845214.9

    申请日:2021-07-26

    Applicant: 福州大学

    Abstract: 本发明提供一种苯丙酮单加氧酶,其氨基酸序列由SEQ ID NO:2所示氨基酸序列通过突变获得,并公开基于该苯丙酮单加氧酶的不对称生物催化合成亚砜类药物的技术方法。本发明通过基因挖掘筛选获得来源于Limnobacter sp.的苯丙酮单加氧酶基因,采用基因工程技术构建重组大肠杆菌表达菌株,通过分子改造技术实现酶活力和立体选择性的提高。同时构建了单加氧酶突变体与不同脱氢酶的共表达菌株。以奥美拉唑硫醚为原料,采用全细胞或酶蛋白催化的方法,不对称催化合成光学纯埃索美拉唑。本发明可以在温和的条件下通过一步反应获得目标产物,没有副产物奥美拉唑砜,同时环境友好,是一种绿色生物催化合成途径。

    一种红曲色素的发酵制备方法

    公开(公告)号:CN106399382A

    公开(公告)日:2017-02-15

    申请号:CN201610918824.6

    申请日:2016-10-21

    Applicant: 福州大学

    CPC classification number: C12P1/02 C12R1/66

    Abstract: 本发明公开了一种高色价兼具高生物安全的红曲色素发酵制备方法,其以可溶性淀粉、硫酸盐等为原料制备液态发酵培养基,并在液态发酵的基础上结合硅胶柱层析法去除红曲色素发酵液中的桔霉素,可在提高红曲色素产量的同时有效去除桔霉素,为红曲色素在食品方面得到更广泛的应用打下了基础。

Patent Agency Ranking