公开(公告)号：CN118726277A

公开(公告)日：2024-10-01

申请号：CN202410730008.7

申请日：2024-06-06

Applicant: 海南大学

Inventor： 崔红光 ,  王琳淅 ,  戴兆基 ,  史玮

IPC: C12N7/01 ,  C12N7/04 ,  C12N15/70 ,  C07K14/08 ,  A01N63/40 ,  A01P1/00 ,  C12R1/19 ,  C12R1/94

Abstract: 本发明属于生物技术领域，提供了一种抗夜来香花叶病毒的弱毒疫苗R181K及其应用，以TelMV侵染性克隆质粒pPasFru为模板，以HCPro‑F、HCPro‑R、HCProK‑R和HCProK‑F为引物，使用Phusion高保真DNA聚合酶进行扩增，获得大小分别为1278bp和117bp的ab和cd片段，再以ab和cd片段的混合物为模板，获得大小为1359bp的ad片段，再进行PstI、SalI双酶切和连接反应，反应产物转化大肠杆菌DH10B，使HCPro的第181位精氨酸突变为赖氨酸，获得弱毒突变体pPasFru‑R181K；本发明通过将TelMV HCPro蛋白的第181位精氨酸突变为赖氨酸，获得弱毒疫苗，弱毒疫苗接种百香果植株后不表现症状但病毒含量仍较高，该弱毒疫苗作用稳定，可以起到有效的交叉保护作用，为田间防控TelMV提供了新途径。