一种制备S-2-(4-硝基苯基)环氧乙烷的方法

    公开(公告)号:CN103627776A

    公开(公告)日:2014-03-12

    申请号:CN201310666269.9

    申请日:2013-12-10

    Applicant: 江南大学

    Abstract: 本发明属于生物技术领域,涉及一种制备S-2-(4-硝基苯基)环氧乙烷的方法。该方法以消旋体对硝基溴代苯乙酮为原料,经过化学合成法,双酶偶联反应,最终经超滤和过硅胶柱得到高纯度的S-2-(4-硝基苯基)环氧乙烷。这种制备S-2-(4-硝基苯基)环氧乙烷的方法,所用酶酶活高,时间短,成本底,S-2-(4-硝基苯基)环氧乙烷纯度高,反应条件温和,具有很好的工业化前景。

    一种T载体介导的测定3′端侧翼未知序列的方法

    公开(公告)号:CN102140501A

    公开(公告)日:2011-08-03

    申请号:CN201010550861.9

    申请日:2010-11-19

    Applicant: 江南大学

    Abstract: 本发明是一种利用限制性内切酶酶切、pUCm-T载体和巢式PCR扩增等技术,基于已知DNA序列确定其3′端侧翼未知DNA序列的方法。该方法通过选用限制性内切酶酶切基因组DNA,纯化的酶切产物用Taq酶或Ex Taq酶进行补齐和3′端加A反应,与pUCm-T载体连接;利用引物设计软件选定T载体上T/A克隆位点下游的一段序列作为3′端引物;选定两条靠近未知序列端的已知DNA上的序列作为5′端引物。以pUCm-T载体连接物为模板,用设计的引物进行巢式PCR扩增,并对其扩增片段进行克隆和测序。本发明具有操作简便、应用范围广、操作限制少、结果验证简捷、未知序列长度不限和成本低廉等特点。

    一种T载体介导的测定5′端侧翼未知序列的方法

    公开(公告)号:CN102140500A

    公开(公告)日:2011-08-03

    申请号:CN201010550843.0

    申请日:2010-11-19

    Applicant: 江南大学

    Abstract: 本发明是一种涉及限制性内切酶酶切、pUCm-T载体和巢式PCR扩增等技术,基于已知DNA序列确定其5′端侧翼未知DNA序列的方法。该方法通过选用限制性内切酶酶切基因组DNA,纯化的酶切产物用Taq酶或Ex Taq酶进行补齐和3′端加A反应,与pUCm-T载体连接;利用引物设计软件选定T载体上T/A克隆位点上游的一段序列作为5′端引物,选定两条靠近未知序列端的已知DNA序列上的互补序列作为3′端引物;以pUCm-T载体连接物为模板,采用设计的引物进行巢式PCR扩增,并对其扩增片段进行克隆和测序。本发明具有操作简便、应用范围广、操作限制少、结果验证简捷、未知序列长度不限和成本低廉等特点。

    一种发卡结构介导的测定3′端侧翼未知序列的方法

    公开(公告)号:CN102140502A

    公开(公告)日:2011-08-03

    申请号:CN201010550886.9

    申请日:2010-11-19

    Applicant: 江南大学

    Abstract: 本发明是一种利用限制性内切酶酶切、发卡结构连接和巢式PCR扩增等技术,基于已知DNA序列测定其3′端侧翼未知DNA序列的方法。该方法通过合成一条易形成发卡结构的寡聚核苷酸序列;选用单一限制性内切酶酶切基因组DNA,纯化后与发卡结构连接;利用引物设计软件选定发卡结构序列上的互补序列作为3′端引物、两条靠近未知序列端的已知DNA序列上的特异性序列作为5′端引物;以发卡结构连接物为模板,用设计的引物进行巢式PCR扩增以获取已知DNA序列3′端侧翼的未知序列。本发明具有操作简便、应用范围广、操作限制少、引物特异性强、结果验证简捷、未知序列长度不限和成本低廉等特点。

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