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公开(公告)号：CN103484444B
公开(公告)日：2015-01-07
申请号：CN201310438163.3
申请日：2013-09-24
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种谷氨酸脱羧酶突变体，酶活性中心附近的酸性氨基酸谷氨酸突变为中性氨基酸，其DNA序列分别为SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.2，该突变体蛋白的氨基酸序列分别为SEQ ID NO.3和SEQ ID NO.4。本发明利用DNA定点突变技术，对野生型谷氨酸脱羧酶GadB1编码基因进行分子改造，得到了两种突变体酶GadB1E312S和GadB1E91Q，相对野生酶其有效pH作用范围得到一定的扩展，尤其在偏中性pH条件下仍具有较好的活性。随着有效pH作用范围的拓宽，突变酶在pH5.5～6.5条件下，仍然具有较高的催化活性，因此解决了谷氨酸脱羧酶催化GABA生物合成时，在pH5.5～6.5时，催化能力低的问题，为利用该酶及其编码基因来生物合成GABA创造好的条件。
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公开(公告)号：CN103484444A
公开(公告)日：2014-01-01
申请号：CN201310438163.3
申请日：2013-09-24
Applicant: 江南大学
CPC classification number: C12N9/88 , C12N15/70 , C12P13/005 , C12Y401/01015
Abstract: 本发明公开了一种谷氨酸脱羧酶突变体，酶活性中心附近的酸性氨基酸谷氨酸突变为中性氨基酸，其DNA序列分别为SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.2，该突变体蛋白的氨基酸序列分别为SEQ ID NO.3和SEQ ID NO.4。本发明利用DNA定点突变技术，对野生型谷氨酸脱羧酶GadB1编码基因进行分子改造，得到了两种突变体酶GadB1E312S和GadB1E91Q，相对野生酶其有效pH作用范围得到一定的扩展，尤其在偏中性pH条件下仍具有较好的活性。随着有效pH作用范围的拓宽，突变酶在pH5.5～6.5条件下，仍然具有较高的催化活性，因此解决了谷氨酸脱羧酶催化GABA生物合成时，在pH5.5～6.5时，催化能力低的问题，为利用该酶及其编码基因来生物合成GABA创造好的条件。
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公开(公告)号：CN103484489B
公开(公告)日：2015-09-30
申请号：CN201310438191.5
申请日：2013-09-24
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了两种pH作用范围拓宽的谷氨酸脱羧酶突变体，其DNA序列分别为SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.3，氨基酸序列分别为SEQ ID NO.2和SEQ ID NO.4。本发明结合随机突变（易错PCR）技术和DNA定点突变技术，对野生型谷氨酸脱羧酶GadB1编码基因进行分子改造，得到了两种突变酶GadB1T17I/D294G/Q346H和GadB1T17I/D294G/E312S/Q346H，相对野生酶其有效pH作用范围得到一定的扩展，尤其在偏中性pH条件下仍具有较好的活性。随着有效pH作用范围的拓宽，突变酶在pH5.5～6.5条件下，仍然具有较高的催化活性，因此解决了谷氨酸脱羧酶催化GABA生物合成时，在pH5.5～6.5时，催化能力低的问题，为利用该酶及其编码基因来生物合成GABA创造好的条件。
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公开(公告)号：CN103484489A
公开(公告)日：2014-01-01
申请号：CN201310438191.5
申请日：2013-09-24
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了两种pH作用范围拓宽的谷氨酸脱羧酶突变体，其DNA序列分别为SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.3，氨基酸序列分别为SEQ ID NO.2和SEQ ID NO.4。本发明结合随机突变（易错PCR）技术和DNA定点突变技术，对野生型谷氨酸脱羧酶GadB1编码基因进行分子改造，得到了两种突变酶GadB1T17I/D294G/Q346H和GadB1T17I/D294G/E312S/Q346H，相对野生酶其有效pH作用范围得到一定的扩展，尤其在偏中性pH条件下仍具有较好的活性。随着有效pH作用范围的拓宽，突变酶在pH5.5～6.5条件下，仍然具有较高的催化活性，因此解决了谷氨酸脱羧酶催化GABA生物合成时，在pH5.5～6.5时，催化能力低的问题，为利用该酶及其编码基因来生物合成GABA创造好的条件。
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