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公开(公告)号：CN102220256A
公开(公告)日：2011-10-19
申请号：CN201110093701.0
申请日：2011-04-14
Applicant: 暨南大学
IPC: C12N1/19 , C12N15/81 , C07K19/00 , A61K38/38 , A61K38/19 , A61K47/48 , A61P37/02 , A61P31/22 , C12R1/84
CPC classification number: Y02A50/473
Abstract: 本发明公开了一种表达HAS-vMIP-Ⅱ融合蛋白的表达体系，由质粒pPICZaA-HSA-vMIP-Ⅱ转化至巴斯德毕赤酵母得到。本发明还公开了该表达体系的构建方法，是从含有质粒pPICZaA-HSA-vMIP-Ⅱ的大肠杆菌中提取重组质粒，对重组质粒进行线性化，电转化法转化巴斯德毕赤酵母菌感受态细胞，经抗性筛选后，PCR鉴定得到阳性克隆，利用阳性克隆子进行诱导表达，对表达产物进行SDS-PAGE分析，Western-Blot鉴定。本发明使得vMIP-Ⅱ在不丧失功能的情况下，在血浆中的半衰期得到显著地延长。这样HSA-vMIP-Ⅱ融合蛋白会降低给药频率和剂量，发挥出与vMIP-Ⅱ相似的药效作用。
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公开(公告)号：CN102241749B
公开(公告)日：2013-06-12
申请号：CN201110112488.3
申请日：2011-05-03
Applicant: 暨南大学
Abstract: 本发明公开了一种vMIP-II蛋白的固相合成方法，其步骤为：反应瓶加入二甲基二氯硅烷通风过夜使反应瓶硅烷化，乙醇粗洗后置于-80℃冷却，再次洗涤烘干，称取树脂置于反应瓶中，加入3倍于树脂体积的DCM(二氯甲烷)溶液，溶胀30min后排空液体，然后在多肽合成仪上按偶连氨基酸、茚三酮反应检测和α-氨基脱保护的循环从C端到N端进行，直到全部氨基酸残基都偶连上去。偶连完成后，取下反应瓶用DCM清洗，抽干树脂后用预冷的切割液切割，切割下来的多肽用HPLC进行纯化。多肽纯化在Waters600E高压液相色谱仪上，用Kromasil100-5C18柱子进行高压反相色谱，收集的目的峰多肽即为vMIP-II蛋白。
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公开(公告)号：CN102191204B
公开(公告)日：2013-01-02
申请号：CN201110094517.8
申请日：2011-04-15
Applicant: 暨南大学
Abstract: 本发明涉及一株新筛选的具有抗菌作用的细黄链霉菌及其应用。该菌株为细黄链霉菌GNF1（StreptomycesmicroflavusGNF1），2011年3月13日保藏于“中国典型培养物保藏中心”，保藏号为CCTCC NO：M2011061。该菌株以市售的复合微生物有机肥作为菌源，经筛选分离得到。其代谢产物含有较强的抑菌活性物质，不仅可以抑制土壤固有细菌，还能抑制人体的一些原核病原微生物。
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公开(公告)号：CN102241749A
公开(公告)日：2011-11-16
申请号：CN201110112488.3
申请日：2011-05-03
Applicant: 暨南大学
Abstract: 本发明公开了一种vMIP-II蛋白的固相合成方法，其步骤为：反应瓶加入二甲基二氯硅烷通风过夜使反应瓶硅烷化，乙醇粗洗后置于-80℃冷却，再次洗涤烘干，称取树脂置于反应瓶中，加入3倍于树脂体积的DCM(二氯甲烷)溶液，溶胀30min后排空液体，然后在多肽合成仪上按偶连氨基酸、茚三酮反应检测和α-氨基脱保护的循环从C端到N端进行，直到全部氨基酸残基都偶连上去。偶连完成后，取下反应瓶用DCM清洗，抽干树脂后用预冷的切割液切割，切割下来的多肽用HPLC进行纯化。多肽纯化在Waters600E高压液相色谱仪上，用Kromasil100-5C18柱子进行高压反相色谱，收集的目的峰多肽即为vMIP-II蛋白。
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公开(公告)号：CN102146132A
公开(公告)日：2011-08-10
申请号：CN201010580008.1
申请日：2010-12-09
Applicant: 暨南大学
Abstract: 本发明公开了一种具有拮抗趋化因子受体CCR5的活性多肽，具有SEQ ID NO:1的氨基酸序列或者具有通过在SEQ ID NO:1氨基酸序列中缺失、加入、插入、替换一个或多个氨基酸残基所得到的氨基酸序列。本发明还公开了这种多肽的制备方法，包括在数据库中搜索相关蛋白质序列，进行多重对齐比较分析，筛选出vMIP-Ⅱ受体结合的高度保守区，通过分析模拟手段排除无关残基干扰，确定目的多肽序列，固相合成法合成，最后检验其生物活性。本发明的多肽可作为CCR5受体拮抗剂用于抗炎药物开发以及作为治疗艾滋病的先导药物，也可以作为免疫调节作用药物或增加机体免疫系统功能的药物应用。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN102260324B
公开(公告)日：2013-09-04
申请号：CN201110150794.6
申请日：2011-06-07
Applicant: 暨南大学
Abstract: 本发明公开了一种炎症前期趋化因子拮抗肽及其制备方法和应用，属于基因工程技术领域。所述拮抗肽氨基酸序列如SEQIDNO:1所示。上述拮抗肽的筛选方法，是用内毒素刺激PBMC细胞产生趋化因子，离心收集上清液，分离纯化趋化因子；以细胞上清液作为靶标，加入噬菌体十二肽库与靶标结合，酸性洗脱液洗脱，筛选出的噬菌体进行扩增，此筛选步骤进行4轮，第4轮不再扩增；对第4轮所得噬菌体进行阳性筛选分析，分别进行结合活性分析、竞争抑制分析和趋化因子生成抑制分析，筛选阳性单克隆噬菌体；对阳性单克隆噬菌体DNA进行测序及序列分析，获得炎症前期趋化因子拮抗肽。本发明的拮抗肽可特异阻断炎症前期趋化因子的分泌，且具有生产成本低，特异性强、功效明确，安全可靠等优点。
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公开(公告)号：CN103045551A
公开(公告)日：2013-04-17
申请号：CN201210544100.1
申请日：2012-12-14
Applicant: 暨南大学
Abstract: 本发明公开了一种具有穿膜功能的hMnSOD-R9及其制备方法与应用，属于分子生物学与生物化学领域。通过设计引物进行PCR扩增得到引入R9的MnSOD的hMnSOD-R9基因片段，将该片段连接到pET15b构建表达质粒pET15b-hMnSOD-R9，再将该质粒转化大肠杆菌表达宿主Rosetta-gami得到表达菌株Rosetta-gami/pET15b-hMnSOD-R9。对该菌株进行诱导表达得到高效可溶的hMnSOD-R9，破碎表达菌体后直接对上清进行纯化，极大的简化生产工艺，降低了成本，解决了SOD工业化生产SOD原料的限制问题。
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公开(公告)号：CN102260324A
公开(公告)日：2011-11-30
申请号：CN201110150794.6
申请日：2011-06-07
Applicant: 暨南大学
Abstract: 本发明公开了一种炎症前期趋化因子拮抗肽及其制备方法和应用，属于基因工程技术领域。所述拮抗肽氨基酸序列如SEQIDNO:1所示。上述拮抗肽的筛选方法，是用内毒素刺激PBMC细胞产生趋化因子，离心收集上清液，分离纯化趋化因子；以细胞上清液作为靶标，加入噬菌体十二肽库与靶标结合，酸性洗脱液洗脱，筛选出的噬菌体进行扩增，此筛选步骤进行4轮，第4轮不再扩增；对第4轮所得噬菌体进行阳性筛选分析，分别进行结合活性分析、竞争抑制分析和趋化因子生成抑制分析，筛选阳性单克隆噬菌体；对阳性单克隆噬菌体DNA进行测序及序列分析，获得炎症前期趋化因子拮抗肽。本发明的拮抗肽可特异阻断炎症前期趋化因子的分泌，且具有生产成本低，特异性强、功效明确，安全可靠等优点。
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公开(公告)号：CN101914135A
公开(公告)日：2010-12-15
申请号：CN201010236745.X
申请日：2010-07-23
Applicant: 暨南大学
IPC: C07K7/06 , A61K38/08 , A61P31/00 , A61P31/12 , A61P31/20 , A61P31/18 , A61P35/04 , A61P29/00 , A61P9/10 , A61P37/06 , A61P37/08
Abstract: 本发明公开了一种广谱趋化因子受体拮抗性多肽及其应用。本发明广谱趋化因子受体拮抗性多肽的氨基酸序列为VLNAHCALH。本发明广谱趋化因子受体拮抗性多肽可以与细胞膜上的US28受体良好结合，下调由生理学趋化因子与受体结合引起的钙离子浓度升高，具有阻断受体信号转导的效应，体外可以抑制人类巨细胞病毒AD169和HIV-1诱导的噬菌斑形成，抑制病毒在细胞内的复制，减少病毒感染细胞的死亡，可以作为广谱炎症和病毒趋化因子的拮抗剂，用于研究病毒防治的相关工作中。
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公开(公告)号：CN103045551B
公开(公告)日：2016-02-10
申请号：CN201210544100.1
申请日：2012-12-14
Applicant: 暨南大学
Abstract: 本发明公开了一种具有穿膜功能的hMnSOD-R9及其制备方法与应用，属于分子生物学与生物化学领域。通过设计引物进行PCR扩增得到引入R9的MnSOD的hMnSOD-R9基因片段，将该片段连接到pET15b构建表达质粒pET15b-hMnSOD-R9，再将该质粒转化大肠杆菌表达宿主Rosetta-gami得到表达菌株Rosetta-gami/pET15b-hMnSOD-R9。对该菌株进行诱导表达得到高效可溶的hMnSOD-R9，破碎表达菌体后直接对上清进行纯化，极大的简化生产工艺，降低了成本，解决了SOD工业化生产SOD原料的限制问题。
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